[發(fā)明專利]一種梭子蟹用誘抗素

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710049081.8
• 申請日: 2017-01-23
• 公開（公告）號: CN106719207A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發(fā)明（設計）人: 周君恩;金山;周翰波;朱軍;李兆軍;王陽光
• 申請（專利權）人: 岱山縣通衢水產(chǎn)食品有限公司
• 主分類號: A01K61/59
• 分類號: A01K61/59;C12N15/01
• 代理公司: 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙)11548
• 代理人: 李靜

技術領域

本發(fā)明涉及一種梭子蟹用誘抗素的制備及應用，具體為采用誘抗素誘導梭子蟹成為多倍體水產(chǎn)動物的方法。

背景技術

三疣梭子蟹的漁汛一年有春秋兩次，漁期長，產(chǎn)量高，體大肉多，味鮮美，營養(yǎng)豐富，尤其是卵巢和肝臟。卵巢可供作上等調味品。肉多，脂膏肥滿，味鮮美，營養(yǎng)豐富。每百克蟹內(nèi)含蛋白質14克、脂肪2．6克。鮮食以蒸食為主，還可鹽漬加工“槍蟹”、蟹醬，蟹卵經(jīng)漂洗曬干即成為“蟹籽”，均是海味品中之上品。肉除鮮食外，還可制作罐頭,暢銷國內(nèi)外。殼可作藥材用，又可提取甲殼質，廣泛用于多種工業(yè)。黃海和東海年產(chǎn)量各有1～2萬噸上下。為中國最重要的海產(chǎn)蟹，經(jīng)濟意義重大。近似種南海和東海還有遠海梭子蟹和紅星梭子蟹，在南海為常見經(jīng)濟種。是中國重要的出口暢銷品之一，出口輸往國別和地區(qū)：日本，香港、澳門。出口口岸：遼寧、河北、天津、山東、江蘇、浙江、福建。

實踐證明,三倍體水產(chǎn)動物具有生長迅速、肉質改善及生物基因污染風險降低等優(yōu)勢一個普遍特征是性腺發(fā)育受阻。近年來,養(yǎng)殖蟹類特別是養(yǎng)殖的梭子蟹個體小型化、性早熟等現(xiàn)象比較突出,三倍體性腺的不育性有望解決其性早熟問題,從而培育大規(guī)格的梭子蟹,提高養(yǎng)殖產(chǎn)量和經(jīng)濟效益，與二倍體群體相比,放養(yǎng)后68~106d,三倍體群體在殼長、殼寬、體質量上都表現(xiàn)出明顯的生長優(yōu)勢(P<0.01),并且其營養(yǎng)組成與二倍體蟹存在差異。三倍體幼蟹蟹體氨基酸總量高于正常二倍體幼蟹,必需氨基酸中蘇氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、精氨酸、異亮氨酸、組氨酸和賴氨酸的含量高于二倍體,而關于三倍體蟹類生產(chǎn)性狀的研究較少因此開展蟹類的多倍體誘導研究十分必要并具有重要的研究和生產(chǎn)意義。

已有的誘抗素：通過化學試劑抑制極體釋放或第一次細胞分裂產(chǎn)生三倍體或四倍體的方法。常用的多倍體誘抗素主要有細胞松弛素B(CB)、6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)、咖啡因、秋水仙素等。目前,細胞松弛素B因價格高且對人體及生物具有較大的生物毒性,目前應用已不多。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明提供了一種高效制備多倍體三疣梭子蟹的方法。使得所需的梭子蟹產(chǎn)品品質更加完美。

梭子蟹的養(yǎng)殖：池塘的整理，池塘整理主要是清除池底過多的淤泥，翻松曝曬池底，另外還要維修塘堤、閘門、水渠等配套設施；設置障礙物，為了便于蟹苗休息和隱藏,當整修好池塘后，還要在池底放上水泥管、瓦片、竹筒等障礙物；進水并繁殖餌料生物，清塘半個月以后，就可以開閘進水，為了防止一些有害生物進入池子，可以用60-80目的篩絹網(wǎng)過濾海水，池水深度一般保持在60-80公分，池塘進水后，要施用化肥來培育餌料生物，一般N肥在1.5-2㎏/畝，P肥為0.3-0.5㎏/畝，并且要保持池水的透明度在20-30公分左右。

為實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明通過以下技術方案予以實現(xiàn)。本發(fā)明提供了一種三疣梭子蟹誘抗素的制備方法及用量比例。

本發(fā)明所用梭子蟹用誘抗素：利用細胞松弛素B(CB)3-5份、6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)1-3份和氯化鉀(KCl)2-4份。誘導蟹三倍體和四倍體的方法,分別利用上述誘抗素處理抱卵蟹,在囊胚期檢測的最高三倍體率分別為47-49%,51-52%和75-77%,四倍體最高誘導率依次是48-50%,53-55%和78-80%。并且使用KCl對抱卵蟹誘導處理獲得的溞狀幼體最高三倍體誘導率為85.3%,最高四倍體誘導率27.3%。該研究克服了以往三倍體誘導中離體培養(yǎng)的困難,首次獲得了蟹三倍體溞狀幼體,并極大提高了溞狀幼體階段四倍體誘導率。

誘抗素參數(shù)優(yōu)化：本發(fā)明者利用KCl誘導蟹三倍體的關鍵參數(shù)進行了優(yōu)化,優(yōu)化的結果為:10-15℃,將產(chǎn)卵后1.5-2h孵化膜形成并舉起作為中華絨螯蟹三倍體誘導起始點的形態(tài)學標記,以4-6g/L的KCl溶液處理4h,獲得了最高為100%的離體卵三倍體誘導率。另外,對三疣梭子蟹的三倍體誘導進行了嘗試,利用6-DMAP和KCl處理獲得。