[發(fā)明專利]應(yīng)用RPA技術(shù)對轉(zhuǎn)基因玉米Bt176品系特異性鑒定在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710047608.3 | 申請日: | 2017-01-22 |
| 公開(公告)號: | CN106801092A | 公開(公告)日: | 2017-06-06 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 宛煜嵩;李凱;李亮;董美;金蕪軍;劉衛(wèi)曉;溫洪濤;潘海會;王永;高進(jìn);王迪 | 申請(專利權(quán))人: | 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京中譽威圣知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司11279 | 代理人: | 葉立濤,司麗春 |
| 地址: | 100081 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 應(yīng)用 rpa 技術(shù) 轉(zhuǎn)基因 玉米 bt176 品系 特異性 鑒定 | ||
1.一種應(yīng)用RPA技術(shù)對轉(zhuǎn)基因玉米BT176品系特異性鑒定的引物和探針,其特征在于,所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示,探針的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
2.一種鑒定轉(zhuǎn)基因玉米BT176品系的試劑盒,其特征在于,包含權(quán)利要求1所述的引物和探針。
3.一種應(yīng)用RPA技術(shù)對轉(zhuǎn)基因玉米BT176品系特異性鑒定的方法,其特征在于,提取待測樣品的DNA作為模板,利用權(quán)利要求1所述的引物及探針進(jìn)行RPA快速擴(kuò)增及實時熒光檢測,如果得到擴(kuò)增曲線,則證明所檢樣品含有轉(zhuǎn)基因玉米BT176成分;如果得不到擴(kuò)增曲線,則證明所檢樣品不含有轉(zhuǎn)基因玉米BT176成分。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用RPA技術(shù)對轉(zhuǎn)基因玉米BT176品系特異性鑒定的方法,其特征在于,所述RPA快速擴(kuò)增的反應(yīng)體系為50μl,包括10μmol/L的引物各2μl,10μmol/L的探針0.5μl,模板DNA 50ng,緩沖溶液Buffer 29.5μl,其余用去離子水補(bǔ)齊。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用RPA技術(shù)對轉(zhuǎn)基因玉米BT176品系特異性鑒定的方法,其特征在于,所述RPA快速擴(kuò)增及實時熒光檢測的程序為:RPA擴(kuò)增檢測儀或熒光定量PCR儀于39攝氏度反應(yīng)20分鐘;同時進(jìn)行實時熒光檢測。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息,商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所,未經(jīng)中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所許可,擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作,請聯(lián)系【客服】
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