[發(fā)明專利]用于抑制納米藥物粒子透過胎盤屏障的抑制劑

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710043443.2
• 申請日: 2017-01-19
• 公開（公告）號: CN108324945B
• 公開（公告）日: 2020-09-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 唐紅波;蔣子雯;馮欣;代蔭梅;周志敏;劉小艷;韓朝宏
• 申請（專利權(quán)）人: 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院;中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物醫(yī)學(xué)工程研究所
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61K45/06;A61K47/36;A61K31/573;A61K31/4965;A61K31/5415;A61K31/7048;A61K31/165;A61K31/40
• 代理公司: 北京天達共和知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11586
• 代理人: 張嵩;薛侖

本發(fā)明涉及一種抑制納米藥物粒子跨胎盤屏障模型的方法。具體方法為同時應(yīng)用炎癥因子抑制劑和吞噬途徑抑制劑，考察納米藥物粒子跨胎盤屏障模型的數(shù)量的變化。采用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，將炎癥因子抑制劑和吞噬途徑抑制劑與細(xì)胞共孵育一段時間，加入熒光標(biāo)記的納米粒子，應(yīng)用ELISA方法考察納米粒子被細(xì)胞攝取的情況。本發(fā)明創(chuàng)新性強，加入的各項試劑易得，對于減少納米藥物粒子潛在的胚胎毒副作用具有重要的意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及納米藥物粒子，具體來說，涉及一種抑制納米藥物粒子透過胎盤屏障的抑制劑。

背景技術(shù)

納米粒子的吞噬途徑、被攝取過程的數(shù)學(xué)模型及相關(guān)參數(shù)均正逐漸被認(rèn)識和建立^[1]。納米粒子的攝取主要通過內(nèi)吞(endocytosis)途徑進行，納米粒子的尺寸、形狀、電荷、所組成的材料以及表面的修飾基團等均影響納米粒子進入吞噬細(xì)胞，其入胞機制目前尚無一致結(jié)論。可能的內(nèi)吞途徑包括巨胞飲(macropinocytosis)、胞飲(pinocytosis)、網(wǎng)格蛋白依賴性內(nèi)吞(clathrin-dependent endocytosis)、小凹蛋白依賴性內(nèi)吞(caveolin-dependent endocytosis)以及依賴肌動蛋白的吞噬途徑(phagocytosis)等。研究發(fā)現(xiàn)幾乎所有的內(nèi)吞信號通路都參與了超順磁性鐵納米粒子進入RAW264.7巨噬細(xì)胞的過程^[2]。而超小順磁性氧化鐵和超順磁性氧化鐵納米粒子是通過網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)和清道夫受體介導(dǎo)的內(nèi)吞進入人巨細(xì)胞的^[3]。另一方面的研究表明，納米粒子作為“異物”進入機體，可激活炎癥反應(yīng)途徑，引起炎癥細(xì)胞因子分泌^[4]。炎癥反應(yīng)與NF-kB(Nuclear factor kB)信號通道激活的關(guān)系已經(jīng)得到證明，NF-kB信號通道前炎癥因子TNF-α和IL-1均可被微生物產(chǎn)物脂蛋白(Lipopolysaccharide,LPS)激活，介導(dǎo)炎癥的發(fā)生。

妊娠期用藥關(guān)系著母體和胎兒的安危，納米藥物載體/輸送系統(tǒng)因緩/控釋和靶向等特點使其在妊娠期用藥方向呈現(xiàn)巨大潛力，與此同時也可能透過胎盤屏障對胎兒產(chǎn)生毒性，一定程度上限制了納米藥物在圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的深入研究與開發(fā)應(yīng)用；納米藥物載體能否透過胎盤屏障進入胎兒體內(nèi)循環(huán)產(chǎn)生毒性，是如何透過胎盤屏障的等相關(guān)問題的研究具有重要意義。

胎盤屏障是胎盤絨毛組織與子宮血竇間的屏障，這一特殊屏障調(diào)控了母體與胎兒之間的物質(zhì)交換。國內(nèi)外研究納米粒子透過胎盤屏障的模型有人絨毛膜癌細(xì)胞BeWo細(xì)胞模型、人胎盤體外灌注模型，還包括應(yīng)用嚙齒類動物進行的在體研究等。人絨毛膜癌細(xì)胞BeWo細(xì)胞可形成滋養(yǎng)層單層細(xì)胞，是有效評價營養(yǎng)物質(zhì)和藥物攝取、外排和轉(zhuǎn)運的胎盤屏障體外模型^[5-7]。Cartwright等^[8]將BeWo模型進行優(yōu)選，利用Transwell擴散池建立模型，應(yīng)用透射電鏡、激光共聚焦儀和光子相關(guān)光譜法等有效地觀測了聚苯乙烯納米粒子透過胎盤屏障的情況。人類胎盤灌注模型被成功地用于納米粒子透過胎盤屏障研究^[9]，納米粒子通過胎盤轉(zhuǎn)運的實驗條件可以達到，可獲得重復(fù)的結(jié)果，胎盤灌注模型可以被標(biāo)準(zhǔn)化，用于評估納米粒子經(jīng)胎盤轉(zhuǎn)運，但是這一胎盤屏障高度依賴于妊娠周期。利用此模型，研究者已經(jīng)考察了聚苯乙烯納米粒子、Cd、Te、Si、TiO₂和金等納米粒子的胎盤轉(zhuǎn)運情況^[10]。在國內(nèi)，關(guān)于體外胎盤灌注模型的研究處在起步階段。有越來越多的納米粒子透過胎盤屏障的細(xì)胞分子機制也正在被揭示，研究表明，納米粒子可能通過胎盤屏障的途徑有擴散、膜泡運輸和滋養(yǎng)細(xì)胞通道系統(tǒng)，與納米粒子的屬性如粒徑大小、電荷和功能化有關(guān)^[10-11]。簡單擴散很快，膜泡運輸包括通過網(wǎng)格蛋白依賴性內(nèi)吞和小凹蛋白依賴性內(nèi)吞等。