[發明專利]利用UFLC法同時檢測山茱萸中5種三萜酸成分的方法

有效

• 申請號: 201710039626.7
• 申請日: 2017-01-19
• 公開（公告）號: CN106706811B
• 公開（公告）日: 2021-05-11
• 發明（設計）人: 康杰芳;王艷珍;蔣羅曼;張秋生;王福興;王喆之
• 申請（專利權）人: 陜西師范大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74;G01N30/86
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 陸萬壽

本發明涉及利用UFLC法同時檢測山茱萸中5種三萜酸成分的方法，先分別配置熊果酸、齊墩果酸、山楂酸、科羅索酸和白樺脂酸的對照品溶液，對對照品溶液進行色譜分析，分別獲得各組分的峰面積，以對照品溶液的進樣量為橫坐標，對照品溶液中各組分的峰面積為縱坐標分別繪制標準曲線；向山茱萸粉末中加入提取劑，提取得到樣品溶液，將樣品溶液抽濾，所得濾液為供試液；對供試液進行色譜分析，獲得供試液中各被測組分的峰面積，計算得到各組分的含量，完成利用UFLC法同時對山茱萸中5種三萜酸成分的檢測。本發明應用UFLC法，對山茱萸成分進行分析研究，顯著減少分析時間，在9min內即可獲得很好的分離效果；同時相應減少溶劑、樣品消耗。

【技術領域】

本發明涉及成分檢測領域，具體涉及利用UFLC法同時檢測山茱萸中5種三萜酸成分的方法。

【背景技術】

山茱萸為山茱萸科植物山茱萸(Cornus offcinalis Sieb.et Zucc)的干燥成熟果肉，味酸、澀，性微溫，歸肝、腎經，具有補益肝腎、澀精固脫的功效。近年來山茱萸及其提取物已被證明有多種藥理活性，如抗炎、抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂、保肝以及神經保護等作用。山茱萸中主要化學成分有環烯醚萜苷類、鞣質、黃酮、有機酸、多糖、三萜類、揮發性成分等。山茱萸中的三萜酸大部分屬于三萜類中的五環三萜酸，目前檢測到山茱萸三萜酸成分主要包括熊果酸、齊墩果酸、山楂酸、科羅索酸、白樺脂酸，參見袁菊麗等.山茱萸的主要化學成分及藥理作用[J].化學與生物工程,2011,05:7-9；劉博等.HPLC法測定山茱萸中科羅索酸的含量[J].藥物分析雜志,2011,12:2217-2219；劉博,吳和珍.山茱萸藥材中三萜類成分的研究[J].湖北中醫雜志,2010,12:75-76。已有研究表明山茱萸中的三萜酸可以降低血糖、改善糖尿病并發癥如心肌病變、視網膜病變、糖尿病腎病等，因此檢測山茱萸中三萜酸成分及其含量對于預防和治療糖尿病及其并發癥具有指導意義。

目前關于山茱萸中三萜酸成分都是獨立檢測，金德莊等運用HPLC的方法分析山茱萸中熊果酸、齊墩果酸含量，劉博等運用HPLC法檢測山茱萸中科羅索酸含量，山楂酸和科羅索酸、齊墩果酸和熊果酸為同分異構體，這5種酸同為山茱萸中三萜酸其結構和性質相似，用高效液相色譜法測定分析時間較長且不易分離，如何快速、準確地同時測定山茱萸中山楂酸、科羅索酸、白樺脂酸、齊墩果酸和熊果酸含量具有重要意義。

【發明內容】

本發明的目的在于克服現有技術中存在的問題，提供一種利用UFLC法同時檢測山茱萸中5種三萜酸成分的方法，能夠快速檢測出山茱萸中5種三萜酸成分含量，且精確度高。

為了達到上述目的，本發明采用如下技術方案：

包括以下步驟：

(1)分別配置熊果酸、齊墩果酸、山楂酸、科羅索酸和白樺脂酸的對照品溶液，對對照品溶液進行色譜分析，獲得熊果酸、齊墩果酸、山楂酸、科羅索酸和白樺脂酸的峰面積，以對照品溶液的進樣量為橫坐標，對照品溶液中各組分的峰面積為縱坐標分別繪制標準曲線；

(2)向山茱萸粉末中加入提取劑，提取得到樣品溶液，將樣品溶液抽濾，所得濾液為供試液；

(3)對供試液進行色譜分析，獲得供試液中各被測組分的峰面積，以供試液中各被測組分的峰面積為縱坐標代入標準曲線中，得出供試液中各被測組分的進樣量，再計算得到供試液中熊果酸、齊墩果酸、山楂酸、科羅索酸和白樺脂酸的含量，完成利用UFLC法同時對山茱萸中5種三萜酸成分的檢測。

進一步地，步驟(1)中采用甲醇分別配置熊果酸、齊墩果酸、山楂酸、科羅索酸和白樺脂酸的對照品溶液。

進一步地，步驟(1)中熊果酸、齊墩果酸、山楂酸、科羅索酸和白樺脂酸的對照品溶液的濃度分別為0.8mg/mL、0.1mg/mL、0.005mg/mL、0.005mg/mL和0.001mg/mL。

進一步地，步驟(2)中提取劑為體積分數40～80％乙醇溶液。