[發明專利]一種利用糖來優選逆流色譜溶劑的方法

有效

• 申請號: 201710039600.2
• 申請日: 2017-01-19
• 公開（公告）號: CN106770852B
• 公開（公告）日: 2018-08-07
• 發明（設計）人: 吳世華;張利紅
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: G01N30/42
• 分類號: G01N30/42
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 萬尾甜;韓介梅

本發明提供一種利用糖來優選逆流色譜溶劑的方法，該方法是利用糖來增加天然產物分配系數和選擇逆流色譜溶劑，具體是將一系列不同劑量的糖加入已選定的兩相體系中并徹底混勻，分析糖劑量與分配系數的關系，然后根據這一關系確定需要的糖劑量，從而確定合適的逆流色譜溶劑的組成。采用該方法可以很容易的獲得合適的溶劑，使得目標化合物在這一溶劑中具有合適的K值，尤其適用于成分復雜的天然產物，該方法簡單實用，可大大減少逆流色譜溶劑選擇的難度和時間，便于推廣應用。

技術領域

本發明屬于逆流色譜技術領域，涉及一種確定逆流色譜溶劑的方法，尤其涉及一種利用糖來優選逆流色譜溶劑的方法。

背景技術

逆流色譜是一種無需固相載體的全液－液相分配色譜，由于其不使用固相載體而僅使用液相作固定相，因此與其它色譜相比，逆流色譜有顯著的優勢，不僅可以避免固相載體造成的吸附、變性、拖尾等不利因素，使樣品幾乎100％回收，而且對于一些結構類似而分配系數不同的化合物，也常常有較好的選擇性。此外，逆流色譜也容易較好地與其它色譜進行聯用，解決分離中的問題。但是，由于天然產物成分復雜，逆流色譜分離天然產物仍有很多挑戰，其關鍵還是在于兩相分配。選擇合適的溶劑體系是逆流色譜分離過程中的第一步也是最重要的一步，約占據了整個工作量的90％。盡管已經存在許多兩相溶劑體系家族和相對應的溶劑選擇策略，例如在Ito規律上建立的Ito溶劑體系、Arizona溶劑體系、以薄層色譜為基礎的HEMWat溶劑體系猜測法、九九表式定向溶劑選擇策略和別的以實驗為基礎的計算方法。但是選擇合適的溶劑仍然需要專業的知識并且非常繁瑣和耗時。因此，選擇一個合適的溶劑，使目標化合物在這一溶劑中具有合適的K值，仍是當前研究的重點和難點。

發明內容

本發明的目的是針對上述現有逆流色譜分離過程中溶劑選擇復雜、耗時長、需要專業知識等缺點，提供一種利用糖來優選逆流色譜溶劑的方法，經大量實驗驗證該方法是一種可行且簡單的溶劑選擇策略，可以快速地分離高純度的黃酮類化合物和鬼臼毒素類化合物。

本發明提供一種利用糖來增加天然產物分配系數和選擇逆流色譜溶劑的方法，該方法是將一系列不同質量分數的糖的水溶液加入已選定的兩相溶劑中并徹底混勻得到兩相體系，分析糖劑量與分配系數的關系，然后根據所需的分配系數確定合適的糖劑量，從而獲得逆流色譜溶劑的組成。

上述技術方案中，所述的糖是蔗糖、葡萄糖、果糖、麥芽糖、半乳糖、山梨糖、甘露糖、鼠李糖、木糖中的一種或多種組合。

上述的用來調節分配系數以獲得糖劑量與分配系數關系的糖水溶液的質量分數可以是5-30％。

所述的兩相體系是正己烷－乙酸乙酯－甲醇－糖的水溶液。

本發明的有益效果在于：

該方法簡單實用，可大大減少逆流色譜溶劑選擇的難度和時間，便于推廣應用。

(1)糖是一種甜的、短鏈、可溶性的碳水化合物。作為添加劑，和鹽析制備化合物的策略相比，糖析制備的策略更綠色更環保，不會產生鹽腐蝕等并發癥。

(2)本發明中添加糖到正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水的兩相體系，可以改變溶劑以及化合物在兩相體系中的分配，從而可以快速有效地找到合適的溶劑體系。

(3)采用正己烷、乙酸乙酯、甲醇、糖的水溶液兩相體系進行逆流色譜分離，可以實現高純度的逆流色譜制備。

(4)當吸附有含糖的純品的反相C18色譜柱用甲醇和水洗脫時，也可良好地實現逆流色譜和柱色譜的連用，提高單位時間的生產效率，同時也降低能耗；也可以重復進行，便于自動化生產。

附圖說明

圖1在正己烷－乙酸乙酯－甲醇－水(4:6:4:6，v/v)體系中，蔗糖與化合物K值關系圖；

圖2.在正已烷－乙酸乙酯－甲醇－水(5:5:5:5，v/v)體系中，蔗糖與化合物K值關系圖；