[發(fā)明專利]日本漆樹高效快速擴(kuò)繁方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710038718.3
• 申請(qǐng)日: 2017-01-19
• 公開（公告）號(hào): CN106818477B
• 公開（公告）日: 2018-11-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何承忠;羅一然;李旦;張雪;韓國(guó)偉;縱丹;唐軍榮;和潤(rùn)喜;廖聲熙
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西南林業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 昆明祥和知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 53114
• 代理人: 張亦凡

1.一種日本漆樹高效快速擴(kuò)繁方法，其特征在于按下列步驟實(shí)施：

（1）外植體的選擇與消毒：選取優(yōu)良日本漆樹單株的當(dāng)年生嫩莖或根萌幼苗，去除葉柄和葉片，除去表面雜質(zhì)，用2%的潔兒滅溶液浸泡10分鐘，凈水沖洗2小時(shí)，剪成3-4cm長(zhǎng)含1-2個(gè)腋芽的莖段，75%乙醇浸泡10秒，用1%潔兒滅浸泡1分鐘，無(wú)菌蒸餾水沖洗2-3次后，用0.1%升汞浸泡5分鐘，無(wú)菌蒸餾水沖洗5-8次，吸干外植體表的殘留水分；

（2）啟動(dòng)培養(yǎng)：將莖段兩端分別切去2-4mm，平放在啟動(dòng)培養(yǎng)基上，腋芽朝上，啟動(dòng)培養(yǎng)基的配方為： MS+ 6-BA 2.0mg/L + NAA 0.5mg/L+100mg/L半胱氨酸，30g/L蔗糖，4.5g/L瓊脂，pH為5.8-6.0，置于晝溫25±2℃，夜溫20±2℃的條件下培養(yǎng)15-20天后，腋芽處長(zhǎng)出1-2cm高腋芽，再置于光照強(qiáng)度1000-2000Lux，光照時(shí)間12小時(shí)/天，晝溫25±2℃，夜溫20±2℃的條件下光照培養(yǎng)10-15天；

（3）不定芽誘導(dǎo)：待腋芽長(zhǎng)到2-3cm高時(shí)，將其從老莖上剪下，去掉底部1-2個(gè)葉片，直立于不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS + ZT0.1mg/L + 6-BA0.5mg/L，30g/L蔗糖，4.5g/L瓊脂，pH為5.8-6.0，置于晝溫25±2℃，夜溫20±2℃的條件下培養(yǎng)15-20天；

（4）增殖培養(yǎng)：從基部切取含1-2個(gè)腋芽的莖段，并平放于增殖培養(yǎng)基上，增殖培養(yǎng)基的配方為：MS + ZT0.5mg/L + 6-BA1.0mg/L +TDZ0.1mg/L，30g/L蔗糖，4.5g/L瓊脂，pH為5.8-6.0；置于晝溫25±2℃，夜溫20±2℃的條件培養(yǎng)15-20天后，腋芽基部形成2cm³的愈傷組織，同時(shí)腋芽長(zhǎng)到3-4cm；待15天后，待不定芽小苗長(zhǎng)到3-4cm高，再將小苗切下，轉(zhuǎn)到相同的增殖培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)45天的培養(yǎng)，誘導(dǎo)出的小苗又長(zhǎng)到3-4cm，反復(fù)將高3-4cm的小苗切下進(jìn)行增殖培養(yǎng)；

（5）壯苗培養(yǎng)：莖段腋芽處長(zhǎng)出1-2cm高腋芽，形態(tài)學(xué)下端也形成1cm³的愈傷組織，壯苗培養(yǎng)基的配方為：MS + TDZ0.2mg/L+NAA0.1mg/L，30g/L蔗糖，4.5g/L瓊脂，pH為5.8-6.0；置于晝溫25±2℃，夜溫20±2℃的條件培養(yǎng)15-20天，再置于光照強(qiáng)度1000-2000Lux，光照時(shí)間12小時(shí)/天，晝溫25±2℃，夜溫20±2℃的條件下光照培養(yǎng)10-15天；

（6）生根培養(yǎng)：將3-4cm高的組培苗轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上，生根培養(yǎng)基的配方為：MS +ZT0.5mg/L + 6-BA1.0mg/L +TDZ0.1mg/L，0.1-0.5g/L活性炭，30g/L蔗糖，4.5g/L瓊脂，pH為5.8-6.0；置于光照強(qiáng)度1000-2000Lux，光照時(shí)間12小時(shí)/天，晝溫25±2℃，夜溫20±2℃的條件下光照培養(yǎng)10-15天后，得到漆樹生根苗，生根率高達(dá)89.2%。