[發(fā)明專利]辛伐他汀在制備抑制乙肝病毒藥物中的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710036737.2
• 申請日: 2017-01-18
• 公開（公告）號: CN106983743A
• 公開（公告）日: 2017-07-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉培軍;安紅麗;王博;李娟;李萍萍;劉潔;苗裔;梁哲勇;曹菲
• 申請（專利權(quán)）人: 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院
• 主分類號: A61K31/366
• 分類號: A61K31/366;A61P31/20
• 代理公司: 北京匯捷知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11531
• 代理人: 李宏偉

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明是涉及藥物的用途，特別是辛伐他汀在制備抑制乙肝病毒藥物中的應(yīng)用，屬于西藥領(lǐng)域。

背景技術(shù)

乙型肝炎病毒(HBV)感染大約4億人，是世界范圍內(nèi)最常見的慢性感染性疾病，是導(dǎo)致原發(fā)性肝細(xì)胞癌(HCC)的主要原因，每年約有100萬人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和肝癌。目前對HBV感染的治療主要是干擾素和核苷類似物，干擾素治療的長期有效率僅為30％左右,并且毒副作用較多；核苷類似物如拉米夫定雖然抗病毒能力較強(qiáng)，但停藥后病毒復(fù)制水平快速反跳及耐藥病毒株的出現(xiàn)，使得臨床抗病毒方案的實(shí)施面臨極大的挑戰(zhàn)。因此，對慢性HBV感染治療的積極探索已成為臨床研究的重要領(lǐng)域。

病毒本身的基因組非常小，只能編碼有限數(shù)量的基因，所以病毒必須利用宿主細(xì)胞的因子及元件進(jìn)行復(fù)制，尤其是真核細(xì)胞基因復(fù)制、轉(zhuǎn)錄相關(guān)的因子。在流感病毒RNA基因的復(fù)制過程中，微小染色體維持蛋白(MCMs)起著重要的穩(wěn)定作用，MCMs是宿主細(xì)胞DNA復(fù)制起始和延長過程中的重要因子，同時(shí)也參與細(xì)胞周期調(diào)控。MCM7是MCM(Minichromosome Maintenance Protein)蛋白家族成員之一,負(fù)責(zé)細(xì)胞增殖過程中DNA復(fù)制的啟動(dòng)。研究發(fā)現(xiàn)，在體外應(yīng)用阿托伐他汀處理的分離所得的兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，可以抑制該細(xì)胞的增殖能力。該研究還對E2F活性以及MCM6、MCM7進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)阿托伐他汀可通過影響E2F活性下調(diào)MCM蛋白的表達(dá)，而這種抑制作用可 以被外源性MVA解除，證明他汀類藥物可能通過其抑制膽固醇合成的作用減少M(fèi)AV合成，進(jìn)一步抑制DNA復(fù)制因子MCM6、MCM7的表達(dá)，阻滯細(xì)胞周期進(jìn)程。

目前臨床常用的辛伐他汀是羥甲戊二酰輔酶A還原酶(HMG CoA還原酶)抑制劑，一直被用來治療高膽固醇血癥及預(yù)防心血管疾病。目前尚無辛伐他汀以MCM7為靶點(diǎn)抑制細(xì)胞增值的相關(guān)研究報(bào)道，因此闡明辛伐他汀在HBV感染的相關(guān)機(jī)制研究具有積極的意義和研究價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目是：提供一種辛伐他汀在制備抑制乙肝病毒藥物中的應(yīng)用，由于辛伐他汀具有很強(qiáng)的抗乙肝病毒的活性，為臨床制備抑制乙肝病毒藥物提供了新的有效方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案是：辛伐他汀在制備抑制乙肝病毒藥物中的應(yīng)用，其特征是：所述的辛伐他汀在制備以MCM7為靶標(biāo)的藥物中的應(yīng)用。

所述的辛伐他汀在制備以MCM7為靶標(biāo)的抑制乙肝病毒的藥物中的應(yīng)用。

所述的辛伐他汀在制備以MCM7為靶標(biāo)的抑制肝癌的藥物中的應(yīng)用。

所述的肝癌是由HBV感染引起的原發(fā)性肝癌。

本發(fā)明的有益效果是：辛伐他汀通過抑制HepG2.2.15細(xì)胞中MCM7表達(dá)水平，從而抑制了該細(xì)胞中HBV的復(fù)制，阻滯細(xì)胞周期進(jìn)程。由于辛伐他汀具有很強(qiáng)的抗乙肝病毒的活性，為臨床制備抑制乙肝病毒藥物提供了新的有效方法。

附圖說明

圖1是A siRNA干擾MCM7后AdGFP的表達(dá)情況；

圖2是siMCM7干擾后HepG2.2.15細(xì)胞MCM7表達(dá)情況；

圖3是下調(diào)MCM7后，HepG2.2.15細(xì)胞水平HBV DNA拷貝數(shù)(*VS control，P<0.05)；

圖4是不同濃度辛伐他汀對HepG2.2.15細(xì)胞增殖率的影響；

圖5是不同濃度辛伐他汀對HepG2.2.15細(xì)胞細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響；

圖6是HepG2.2.15細(xì)胞干預(yù)4d的細(xì)胞形態(tài)(A：溶劑對照，B:辛伐他汀40μmol/L)；

圖7 5×10⁶個(gè)HepG2.2.15細(xì)胞上清中HBV的DNA拷貝數(shù)；

圖8 5×10⁶個(gè)HepG2.2.15細(xì)胞上清中HBV的DNA拷貝數(shù)；

圖9辛伐他汀對肝癌HepG2.2.15細(xì)胞周期的影響；

圖10是辛伐他汀干預(yù)4d對肝癌HepG2.2.15細(xì)胞周期的影響；

圖11是辛伐他汀干預(yù)后HepG2.2.15細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的表達(dá)；

圖12A是MCM7轉(zhuǎn)錄水平的變化；

圖12B是MCM7蛋白水平的變化；

圖13是辛伐他汀作用后對HepG2.2.15細(xì)胞蛋白水平的影響。

具體實(shí)施方式

下面通過給出的具體實(shí)施例可以進(jìn)一步清楚的說明本發(fā)明，但不作為對本發(fā)明的限定。

本發(fā)明的是通過以下的實(shí)驗(yàn)得到證實(shí)的。