[發明專利]離子交換和硅膠柱層析法分離制備漢防己甲、乙素的方法

有效

• 申請號: 201710034052.4
• 申請日: 2017-01-18
• 公開（公告）號: CN106831804B
• 公開（公告）日: 2018-08-07
• 發明（設計）人: 鄧勝;楊燕歡;郜杰
• 申請（專利權）人: 石藥集團江西金芙蓉藥業股份有限公司
• 主分類號: C07D491/18
• 分類號: C07D491/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

離子交換和硅膠柱層析法分離制備漢防己甲、乙素的方法。漢防己是防己科千金藤屬植物粉防己的干燥塊根，其有效成分為漢防己堿，其中主要有效成分為漢防己甲素和乙素，漢防己堿具有抗心肌缺血、抗心率失常、降壓、抗炎、抗矽肺、抗癌及鎮痛等作用。藥用時，對其純度要求達到99%以上，提取純化為限制二者藥用的重要原因。當前，提取純化漢防己甲素和乙素工藝，大量運用到劇毒且昂貴的氯仿，以及強堿等，氯仿對人和環境均有很大的毒害作用，另外對放大生產的設備腐蝕性強。此外，樣品純度不高，工藝過程復雜。在此現狀上，本發明開發了，運用離子交換樹脂和C18鍵合硅膠柱層析法，快速分離純化制得高純度的漢防己甲素和乙素，同時公開了一種利用乙醇進行重結晶純化漢防己甲素和乙素的方法。本制備工藝沒有運用任何有毒試劑，柱層析填料可重復利用，所用乙醇可回收利用。

技術領域

本發明涉及的是從中藥中分離制備有效成分的方法，屬于中藥領域。為一種利用離子交換樹脂和反相C₁₈鍵合硅膠柱層析法同時快速制備漢防己甲素和漢防己乙素的方法。

背景技術

漢防己甲素是從中藥防己中提取分離而出的一種生物堿。近年來的藥理研究表明漢防己甲素具有抗心肌缺血、抗心率失常、降壓、抗炎、抗矽肺、抗癌及鎮痛等作用，目前以之為原料生產的注射液、粉針、片劑已廣泛用于臨床。但漢防己甲素作為藥用時，尤其是作為注射液使用時，必須具有較高的純度，一般要求達到99%以上，并且不能含有苯、氯仿等其它雜質，這就使得高純度漢防己甲素原料非常緊俏，遠遠不能滿足制劑生產需要。目前國內漢防己甲素提取工藝主要有兩種：一種是冷苯法，其基本工藝過程是用乙醇為溶劑回流提取，提取液濃縮后加石灰沉淀，沉淀用苯冷浸提取，回收苯后，用乙醇重結晶，該方法使用的苯毒性極大，容易殘留，對人體危害大，不能適應大生產，很難得出符合藥用要求的漢防己甲素；另一種是氯仿萃取法，其基本工藝過程是用乙醇為溶劑回流提取，提取液濃縮后酸沉，酸液過濾后加氨水堿化，堿液加氯仿萃取，回收氯仿后用丙酮重結晶，該方法使用的氯仿成本高、毒性大、對設備的密封圈腐蝕大、容易泄漏，回收的氯仿很難處理，廢液中的氯仿難分離，對環境污染大，生產的漢防己甲素含量低、顏色深、熔點低、成本高、有機殘留嚴重。上述兩種方法提取的漢防己甲素均用苯及氯仿為提取溶劑，并用丙酮進行重結晶，這樣的提取方法均殘留有毒性較大的有機溶劑，并且在提取過程中難以與漢防己乙素分離，從而影響了漢防己甲素的純度。此外，目前國內外還未見不用苯及氯仿為溶劑的漢防己甲素提取方法，及不含苯及氯仿的漢防己甲素的報道。

發明內容

本發明提供了一種利用易實現產業化生產的離子交換樹脂和反相C₁₈鍵合硅膠制備漢防己甲素和漢防己乙素的方法，此制備方法未使用苯及氯仿，并且同時制備出了高純度漢防己甲素和漢防己乙素。

取適量防己藥材，利用5-8倍體積的80-95%乙醇，回流提取5-8小時，調整pH值至1-7，濾過，取濾液加于陽離子交換樹脂柱上，先以水洗脫除雜，再用乙醇洗脫，依次使用不同濃度的乙醇洗脫，最后用無水乙醇洗脫至無色，除去色素以及其他非離子狀態等雜質；然后，首先以0.5-1.5 mol/L 的氨水和50%-70%乙醇洗脫，再以1.6-2.5 mol/L 的氨水和70%-100%乙醇洗脫，收集該部分洗脫液，經脫鹽處理。濃縮得流浸膏，用50%乙醇混懸，上反相C18鍵合硅膠柱，利用70%-90%乙醇沖洗柱子，利用紫外檢測器監測，監測波長為230nm，按照色譜峰進行接收，然后利用乙醇對得到粉防己甲素和粉防己乙素進行重結晶。重結晶一次，即可得到高純度的產品。

上述工藝基于如下原理，首先，分離對象的堿性，漢防己甲素和漢防己乙素分子結構中均有兩個處于叔胺狀態的氮原子，堿性較強。其次，分離對象的親脂性，漢防己甲素和漢防己乙素親脂性較強，具有脂溶性生物堿的一般溶解性。再次，分離對象之間極性差異，由于兩者分子結構中取代基的差異，前者為甲氧基，后者為酚羥基，故漢防己甲素的極性較小。