[發明專利]苦碟子注射液指紋圖譜檢查方法

在審

• 申請號: 201710031328.3
• 申請日: 2017-01-17
• 公開（公告）號: CN106841434A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 鄒敬韜;李遇伯;楊彬;付深蘭;李鈺
• 申請（專利權）人: 華楠
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 通化旺維專利商標事務所有限公司22205
• 代理人: 王偉

技術領域

本發明涉及一種中藥注射液質量檢查方法，即苦碟子注射液指紋圖譜檢查方法。

背景技術

在現有技術中，苦碟子注射液（曾用名：碟脈靈注射液）列入國家藥品標準產品（國藥準字Z20025450），由通化華夏藥業有限責任公司生產。

處方：抱莖苦荬菜1000g，制成1000ml。

含量測定：本品每10ml含總黃酮以無水蘆丁（C₂₇H₃₀O₁₆）計，不得少于4.0mg。含抱莖苦荬菜以腺苷（C₁₀H₁₂N₅O₄）計，不得少于0.025mg。

功能主治：活血止痛，清熱祛瘀。用于瘀血閉阻的胸痹，證見：胸悶、心痛，口苦，舌暗紅或存瘀斑等。適用于冠心病、心絞痛見上述病狀者。亦可用于腦梗塞者。

用法用量：靜脈滴注，一次10－40ml，一日1次；用5%葡萄糖或0.9%氯化鈉注射液稀釋至250－500ml后應用；14天為一療程；或遵醫囑。

規格：每支裝（1）10ml，（2）20ml，（3）40ml。

中藥注射劑質量的穩定、可控是臨床用藥安全、有效的保證。中藥注射劑中化學成分具有復雜性和多樣性，僅通過單個或幾個化學成分的含量測定不能全面反映和控制中藥注射劑的質量。這就需要建立一種合理有效的中藥注射劑質量控制方法。目前，中藥指紋圖譜作為現代中藥質量標準體系的核心技術已得到國際公認，FDA、WHO、德國、印度和日本等國家均采用指紋圖譜技術作為植物藥的質量控制手段。國家食品藥品監督管理總局（CFDA）在中藥注射劑安全性再評價指導原則中已明確要求中藥注射劑必須設立指紋圖譜檢查項。由于目前苦碟子注射液質量標準中尚無規定指紋圖譜檢查項及檢查方法。因此，本發明可以為苦碟子注射液指紋圖譜檢查提供方法，彌補質量標準的不足。

發明內容

本發明的目的是針對上述問題與需求，而建立一種苦碟子注射液指紋圖譜檢查方法。

本發明的技術解決方案是：建立苦碟子注射液指紋圖譜檢查方法，其特征步驟如下：

1、色譜條件與系統適用性試驗：

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，色譜柱：Waters Symmetry C18 4.6 mm×250 mm，5μm；以乙腈為流動相A，0.2%磷酸溶液為流動相B，按下表中的規定進行梯度洗脫；流速為1.0ml/min；檢測波長：260nm；柱溫為40℃。理論板數按木犀草素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷峰計算應不低于5000。

2、參照物溶液的制備：

取腺苷對照品、木犀草素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷對照品和菊苣酸對照品，精密稱定，加25%甲醇溶液制成每1mL含腺苷5μg、木犀草素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷150μg和菊苣酸60μg的混合溶液，即得。

3、供試品溶液的制備：

取苦碟子注射液，用0.45 μm濾膜濾過，即得。

4、測定法：

精密吸取參照物溶液與供試品溶液各5μL，注入液相色譜儀，測定，記錄75分鐘內的色譜峰，即得。

苦碟子注射液中所含有的主要有效成分為腺苷、有機酸和黃酮類等成分，根據其化學性質，選擇反相高效液相色譜法來進行指紋圖譜分析。本發明采用的Waters Symmetry色譜柱得到的色譜峰峰形良好；流動相系統對苦碟子注射液中的主要成分有良好的洗脫和分離能力；在260nm的檢測波長下，腺苷的響應值大，同時還能較為全面地檢測到其他的主要成分。本發明建立的苦碟子注射液指紋圖譜分析方法靈敏度高，分離度和重現性好，基線噪音小。

本發明指紋圖譜中應呈現與腺苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷以及菊苣酸三個對照品色譜峰保留時間一致的色譜峰，并應出現10個共有峰，以1、2 (S)、3、4、5、6、7、8 (S)、9 (S)、10號峰為標記，經中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統軟件計算，與對照指紋圖譜相比較，相似度應不低于0.85。

圖1中，峰2(S) 腺苷；峰3 尿苷；峰4鳥苷；峰5 單咖啡酰基酒石酸；峰7 木犀草素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷；峰8(S) 木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷；峰9(S) 菊苣酸；峰10 芹菜素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷。