[發(fā)明專利]L-蘇氨酸轉運蛋白ThrG及其編碼基因與應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710028653.4
• 申請日: 2017-01-16
• 公開（公告）號: CN108314713A
• 公開（公告）日: 2018-07-24
• 發(fā)明（設計）人: 丁久元;張英姿;王宇;趙智
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所
• 主分類號: C07K14/34
• 分類號: C07K14/34;C12N15/31;C12N1/21;C12P13/08;C12R1/15
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;何葉喧

本發(fā)明公開了一種L?蘇氨酸轉運蛋白ThrG及其編碼基因與應用。本發(fā)明提供的蛋白質，命名為ThrG蛋白，是如下(a)或(b)：(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質；(b)將序列1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與L?蘇氨酸轉運相關的由序列1衍生的蛋白質。編碼ThrG蛋白的基因也屬于本發(fā)明的保護范圍，將其命名為thrG基因。本發(fā)明還保護ThrG蛋白的應用：作為L?蘇氨酸轉運蛋白；促進L?蘇氨酸轉運；促進L?蘇氨酸轉運至微生物體外生產L?蘇氨酸。本發(fā)明具有重大的應用價值。

技術領域

本發(fā)明屬于生物技術領域，具體涉及一種L-蘇氨酸轉運蛋白ThrG及其編碼基因與應用。

背景技術

L-蘇氨酸是必需氨基酸之一，在醫(yī)藥、食品以及飼料領域有廣泛的應用。食品領域，是一種重要的營養(yǎng)強化劑，可以強化谷物、糕點、乳制品，有緩解人體疲勞，促進生長發(fā)育的效果。醫(yī)藥領域，對人體皮膚具有持水作用，對保護細胞膜起重要作用，在體內能促進磷脂合成和脂肪酸氧化。飼料領域，廣泛用作仔豬飼料、種豬飼料、肉雞飼料、對蝦飼料和鰻魚飼料等的添加物，可調整飼料中氨基酸平衡促進生長，可改善肉質，可降低畜禽糞便和尿液中的含氮量、畜禽舍中氨氣濃度及釋放速度。

氨基酸的轉運是細胞生命活動的重要環(huán)節(jié)之一。在原核以及真核細胞中都存在氨基酸轉運系統(tǒng)。細胞通過內運系統(tǒng)從外部環(huán)境攝取氨基酸用于細胞內物質的合成，為生命活動提供碳源和氮源以及能源。通過外運系統(tǒng)將代謝物分泌到細胞外。大多數(shù)氨基酸可以通過發(fā)酵法生產。基于對氨基酸轉運系統(tǒng)的了解，可以在氨基酸生產菌株的理性改造方面定向對其進行修飾，從而實現(xiàn)提高產量的目的。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是提供一種L-蘇氨酸轉運蛋白ThrG及其編碼基因與應用。

本發(fā)明提供的蛋白質，獲自谷氨酸棒桿菌(C.glutamicum)，命名為ThrG蛋白，是如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

(b)將序列1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與L-蘇氨酸轉運相關的由序列1衍生的蛋白質。

上述蛋白中，所述一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加是指不多于十個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加。

為了使(b)中的蛋白質便于純化和檢測，可在由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質的氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標簽。

表1標簽的序列

上述(b)中的蛋白質可人工合成，也可先合成其編碼基因，再進行生物表達得到。上述(b)中的蛋白質的編碼基因可通過將序列表中序列2所示的DNA序列中缺失一個或幾個氨基酸殘基的密碼子，和/或進行一個或幾個堿基對的錯義突變，和/或在其5′端和/或3′端連上表1所示的標簽的編碼序列得到。

編碼ThrG蛋白的基因也屬于本發(fā)明的保護范圍，將其命名為thrG基因。

thrG基因為如下1)至6)中任一所述的DNA分子：

1)編碼區(qū)如序列表中序列2第1至678位核苷酸所示的DNA分子；

2)編碼區(qū)如序列表中序列2所示的DNA分子；

3)編碼區(qū)如序列表中序列6第14-694位核苷酸所示的DNA分子；

4)序列表中序列6所示的DNA分子；

5)在嚴格條件下與1)或2)或3)或4)限定的DNA序列雜交且編碼L-蘇氨酸轉運相關蛋白的DNA分子；