[發(fā)明專利]生鮮肉及肉制品中瘦肉精的檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710028489.7
• 申請日: 2017-01-16
• 公開（公告）號: CN107505417B
• 公開（公告）日: 2020-08-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 謝家寬
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東增源檢測技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/02
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 宋靜娜;郝傳鑫

1.生鮮肉及肉制品中瘦肉精的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法為：先進行樣品前處理，得到樣品溶液，再采用高效液相色譜測定所得樣品溶液；其中，所述樣品為生鮮肉或肉制品，樣品前處理包括以下步驟:

(1)酶解：稱取攪碎的樣品，向樣品中加入緩沖液和酶，酶解10～30min后離心，取上清液即得樣品酶解液；所述緩沖液為乙酸銨溶液，所述酶包括β-葡萄醛酸苷肽酶和芳基硫酸脂酶；

(2)提取：按照每克樣品加入6～10mL提取試劑的比例向所得樣品酶解液中加入提取試劑，超聲提取5～10min，即得樣品提取液；其中，所述提取試劑由水和有機溶劑組成，水和有機溶劑的體積比為1:3～1:5，且所述有機溶劑為二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷和二甲基亞砜中的至少一種；

(3)凈化：向所得樣品提取液中加入吸水劑和鹽析劑，混勻后離心，取上清液即得樣品凈化液；所述吸水劑與樣品的質(zhì)量比為1:2～2:3，所述鹽析劑與樣品的質(zhì)量比為1:1～2:1；所述吸水劑為Na₂SO₄，所述鹽析劑為NaCl；

(4)濃縮：氮吹將所得樣品凈化液進行氮吹濃縮，得到濃縮物；

(5)復溶：采用由乙酸水溶液和乙醇組成的混合液溶解步驟(4)所得濃縮物，得到樣品復溶液；所述乙酸水溶液中乙酸的體積分數(shù)為0.15％～0.25％，乙酸水溶液與乙醇的體積比為1:1～1:3；

(6)過濾：向步驟(5)所得樣品復溶液中加入吸附劑，混勻后離心、取上清液，再使用濾膜過濾，即得樣品溶液；所述吸附劑為C₁₈；

所述高效液相色譜測定的條件為：色譜柱為：C18色譜柱，柱長為250mm，柱內(nèi)徑為4.6mm，粒徑為5μm；

檢測波長為：243nm；

流速為：0.5mL/min；

進樣量為：10μL；

流動相由流動相A和流動相B組成，流動相A為0.05mol/ml乙酸銨水溶液，且流動相A中含有體積分數(shù)為0.1％的乙酸，流動相B為乙醇；

所述高效液相色譜的梯度洗脫程序為:時間為0min時，流動相中流動相A的體積分數(shù)為75％，流動相B的體積分數(shù)為25％；

時間為5min時，流動相中流動相A的體積分數(shù)為60％，流動相B的體積分數(shù)為40％；

時間為8min時，流動相中流動相A的體積分數(shù)為60％，流動相B的體積分數(shù)為40％；

時間為13min時，流動相中流動相A的體積分數(shù)為40％，流動相B的體積分數(shù)為60％；

時間為15min時，流動相中流動相A的體積分數(shù)為40％，流動相B的體積分數(shù)為60％。

2.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟(1)中，酶解時間為20min。

3.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟(2)中，有機溶劑為二氯甲烷。

4.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟(2)中，有機溶劑為乙酸乙酯和二甲基亞砜的混合液，且乙酸乙酯與二甲基亞砜的體積比為2:1。

5.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟(2)中，按照每克樣品加入9mL提取試劑的比例向所得樣品酶解液中加入提取試劑，且所述提取試劑中，水和有機溶劑的體積比為1:4。

6.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟(3)中，吸水劑與樣品的質(zhì)量比為3:5，鹽析劑與樣品的質(zhì)量比為1.5:1。

7.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟(5)中，乙酸水溶液中乙酸的體積分數(shù)為0.20％，乙酸水溶液與乙醇的體積比為1:2。

8.如權(quán)利要求7所述的檢測方法，其特征在于，所述高效液相色譜測定的標準品為克倫特羅、沙丁胺醇和萊克多巴胺，標準品溶液的溶劑為乙醇。