[發(fā)明專利]水源性高碘地區(qū)人群甲狀腺自身抗體篩查分析方法及應用

在審

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• 申請日: 2017-01-13
• 公開（公告）號: CN106645701A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發(fā)明（設計）人: 侯振江;張靖宇;牟兆新;范洪;王鳳玲;李紅巖;左瑞菊;王華新
• 申請（專利權）人: 滄州醫(yī)學高等專科學校
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發(fā)明涉及自身抗體篩查技術領域，具體為水源性高碘地區(qū)人群甲狀腺自身抗體篩查分析方法及應用。

背景技術

甲狀腺自身抗體包括甲狀腺微粒體抗體(TMAb)、甲狀腺球蛋白抗體(TgAb)、促甲狀腺激素受體抗體(TRAb)和甲狀腺激素抗體(TAb)。其中甲狀腺微粒體抗體中有一種叫做甲狀腺過氧化物酶抗體(TROAb)，其作用相當重要，是甲狀腺的主要破壞性抗體，在自身免疫性甲狀腺疾病中水平升高，是對甲狀腺細胞主要的破壞性抗體。促甲狀腺激素、TROAb、TRAb等抗體在自身免疫性甲狀腺疾病診斷過程中的敏感性、特異性、準確性較高，聯(lián)合檢測對自身免疫性甲狀腺疾病的診斷價值更大。

近年來隨著人們生活水平的提高，飲食結構的改變，精神壓力的增加，生活節(jié)奏的加快，保健意識的增強以及環(huán)境影響甲狀腺功能物質的增加，甲狀腺疾病的發(fā)病率呈上升趨勢。竇瑜貴等對成人碘營養(yǎng)及甲狀腺功能狀態(tài)研究證實，隨著碘攝入量的增加，TPOAb、TGAb的陽性率呈上升趨勢，水源性高碘地區(qū)健康體檢人群甲狀腺自身抗體的陽性率較高，對甲狀腺功能正常而自身抗體陽性者進行動態(tài)監(jiān)測、隨訪或早期干預，有利于甲狀腺疾病早期診斷、鑒別診斷及其防治。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供水源性高碘地區(qū)人群甲狀腺自身抗體篩查分析方法，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術方案：水源性高碘地區(qū)人群甲狀腺自身抗體篩查分析方法，包含以下步驟：

A、將吡啶釕標記的X物質對應的抗體、待測血清和生物素化的X物質充分混合，使待測血清和吡啶釕標記的抗體競爭與生物素化的X物質結合；

B、加入鏈霉親和素包被的磁性微粒，充分反應后，鏈霉親和素包被的磁性微粒與生物素化的抗原-抗體復合物緊密結合；

C、將反應液吸入流動池，通過電磁作用，磁珠微粒吸附于電極表面，加入三羥甲基氨基甲烷，除去未吸附于電極表面的物質；

D、加入一定量的三丙胺溶液，加電壓啟動ECL反應，使吡啶釕標記復合體化學發(fā)光，并通過光電倍增器測定發(fā)光強度，發(fā)光的強弱程度與待測血清中抗體的含量成反比；

E、繪制或計算發(fā)光信號強弱對該抗體量的曲線，從而建立疾病發(fā)生前或整個疾病過程中受試者的抗體產(chǎn)生譜，動態(tài)監(jiān)測以建立抗體產(chǎn)生譜；

F、應用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計學分析，在不同性別、年齡組中甲狀腺過氧化物酶抗體、甲狀腺球蛋白抗體的陽性率以及自身抗體在各種甲狀腺疾病中的陽性率，采用χ²檢驗進行組間比較，應用非條件Logi-stic回歸，計算甲狀腺抗體陽性人群中發(fā)生各種甲狀腺功能異常的風險。

優(yōu)選的，所述待測樣品為血清。

優(yōu)選的，所述待測物質為甲狀腺自身抗體。

優(yōu)選的，所述第一抗體為單克隆免疫球蛋白。

與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果是：采用電化學發(fā)光免疫分析測定血清甲狀腺過氧化物酶抗體、甲狀腺球蛋白抗體水平，對甲狀腺疾病的診斷和鑒別診斷具有重要價值，結合分析甲狀腺過氧化物酶抗體、甲狀腺球蛋白抗體等抗體水平差異，對甲狀腺疾病尤其是自身免疫性甲狀腺疾病的診斷具有重要價值。聯(lián)合檢測促甲狀腺激素、甲狀腺過氧化物酶抗體、甲狀腺球蛋白抗體等對自身免疫性甲狀腺疾病和非自身免疫性甲狀腺疾病的敏感性和特異性均高于單項指標的檢測。因此，測定血清甲狀腺過氧化物酶抗體、甲狀腺球蛋白抗體水平有助于自身免疫性甲狀腺疾病的診斷、鑒別診斷、療效觀察和預后監(jiān)測。

具體實施方式

下面對本發(fā)明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發(fā)明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。

本發(fā)明提供一種技術方案：水源性高碘地區(qū)人群甲狀腺自身抗體篩查分析方法，包含以下步驟：

A、將吡啶釕標記的X物質對應的抗體、待測血清(含X物質對應的抗體)和生物素化的X物質充分混合，使待測血清和吡啶釕標記的抗體競爭與生物素化的X物質結合；

B、加入鏈霉親和素包被的磁性微粒，充分反應后，鏈霉親和素包被的磁性微粒與生物素化的抗原-抗體復合物緊密結合；

C、將反應液吸入流動池，通過電磁作用，磁珠微粒吸附于電極表面，加入三羥甲基氨基甲烷，除去未吸附于電極表面的物質；