[發明專利]熒光假單胞菌、熒光假單胞菌脂肪酶LIPASEBJ10及其應用

有效

• 申請號: 201710020302.9
• 申請日: 2017-01-12
• 公開（公告）號: CN106701629B
• 公開（公告）日: 2020-08-14
• 發明（設計）人: 呂加平;張維清;逄曉陽;張書文;劉鷺;蘆晶
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農產品加工研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N15/55;C12N9/20;C12N1/21;C12P7/64;C12R1/39;C12R1/19
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 史霞

本發明公開了熒光假單胞菌、熒光假單胞菌脂肪酶及其應用；具體為，一株熒光假單胞菌，所述菌株在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏號為：CGMCC No.13279，保藏日期為：2016年11月15日；本發明還公開了一種熒光假單胞菌的脂肪酶，其為自原料乳分離出的熒光假單胞菌BJ?10中開發得到的一種新的脂肪酶；本發明還公開一種熒光假單胞菌脂肪酶基因，并通過生物工程技術構建了含有脂肪酶基因的重組表達載體和基因工程菌，經培養基因工程菌后獲得脂肪酶；本發明還公開一種熒光假單胞菌脂肪酶在生產生物柴油、洗滌劑和酯交換等生產工藝中的應用。

技術領域

本發明涉及生物化工和生物工程技術領域，特別涉及一種熒光假單胞菌脂肪酶LIPASEBJ10及其應用。

背景技術

脂肪酶(lipase E.C.3.1.1.3)亦稱酰基甘油水解酶(acylglycerolhydrolases)，是一類能催化脂肪酸甘油酯水解為甘油和脂肪酸的酶類(或者是此反應的逆反應)，廣泛存在于原核生物和真核生物中，脂肪酶的活性中心通常具有Gly-X1-Ser-X2-Gly的五肽模型(除個別如枯草芽胞桿菌為Ala-X1-Ser-X2-Gly)。

脂肪酶的天然底物是甘油酯類,然而研究表明，脂肪酶除了能夠催化甘油酯類化合物的水解和合成之外，還可以用于催化酯交換反應、生物表面活性劑的合成、多肽合成、聚合物的合成和藥物的合成等，尤其是利用某些脂肪酶的立體專一性，催化旋光異構體的拆分和手性藥物的合成成為酶工程領域研究的新熱點。

目前，脂肪酶已廣泛用于多個工業領域，如在洗滌劑中加入少量的假單胞菌脂肪酶,能提高洗滌劑的去污能力并降低表面活性劑和三聚磷酸鈉的用量,減少去污劑對環境的污染；廢水處理時加入一定量的脂肪酶；可高效除去脂肪，減少廢水處理的成本和降低二次污染。

發明內容

本發明的一個目的是解決至少上述問題，并提供至少后面將說明的優點。

本發明還有一個目的是提供一種熒光假單胞菌；

本發明還有一個目的是提供一種熒光假單胞菌脂肪酶LIPASEBJ10，其為自原料乳分離出的熒光假單胞菌（Pseudomonasfluorescens）BJ-10中開發得到的一種新的脂肪酶LIPASEBJ10；

本發明還有一個目的是提供一種熒光假單胞菌的脂肪酶基因lipaseBJ10，并通過生物工程技術構建了含有脂肪酶基因lipaseBJ10的重組表達載體和基因工程菌，經培養基因工程菌后獲得脂肪酶LIPASEBJ10；

本發明還有一個目的是提供一種熒光假單胞菌脂肪酶LIPASEBJ10在生產生物柴油、洗滌劑和酯交換等生產工藝中的應用。

為了實現根據本發明的這些目的和其它優點，提供了一種熒光假單胞菌的脂肪酶，其特征在于，該脂肪酶的氨基酸序列如 SEQ ID NO :3 所示。

優選的是，所述脂肪酶的多核苷酸序列如SEQ ID NO : 2所示。

一種基因工程菌株，其特征在于，所述基因工程菌株含有表達如權利要求1所述的脂肪酶的質粒。

一種熒光假單胞菌的脂肪酶在催化生產生物柴油中的應用。

一株熒光假單胞菌，其特征在于，所述菌株在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏號為：CGMCC No. 13279，保藏日期為：2016年11月15日，分類命名為：熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens；保藏地址為：北京市朝陽區北辰西路 1 號院 3號；編碼所述熒光假單胞菌的 16S rRNA 的基因的多核苷酸序列如 SEQ ID NO:1所示。

一種熒光假單胞菌的脂肪酶LIPASEBJ10基因，該基因編碼的氨基酸序列如 SEQID NO :3 所示。