[發(fā)明專(zhuān)利]一種蘭科植物的育種方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710016840.0
• 申請(qǐng)日: 2017-01-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106718846A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王景雪
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山西大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): A01H1/02
• 分類(lèi)號(hào): A01H1/02;A01H1/04;A01H4/00
• 代理公司: 山西五維專(zhuān)利事務(wù)所(有限公司)14105
• 代理人: 張福增

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物育種技術(shù)，具體屬于一種蘭科植物的育種方法。

背景技術(shù)

蘭科植物是單子葉第一大植物，其中許多極具價(jià)值的高檔花卉和珍貴藥用植物。君子蘭、蕙蘭等中國(guó)蘭自古以來(lái)就是文人心中高風(fēng)亮節(jié)的代表花朵。蘭花以其強(qiáng)韌的生命力和環(huán)境適應(yīng)力，優(yōu)美雅麗的花朵，被賦予高雅脫俗的人文意義。蝴蝶蘭(Phalaenopsis)又稱(chēng)蝶蘭,是蘭科植物中栽培最廣泛、最普及的種類(lèi)之一。由于，花色艷麗豐富，花形別致，花大，開(kāi)花期長(zhǎng)(2-3個(gè)月)，深受人們的喜愛(ài),享有“花中皇后”的美譽(yù)。素有“九大仙草之首”之稱(chēng)的鐵皮石斛更是名貴的中藥材。具有滋陰養(yǎng)胃，抗癌抑菌，降糖降壓等重要功效。

雖然蘭科植物具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，但是由于蘭科植物的種子無(wú)胚乳，自然條件下，萌發(fā)率極低或者不能萌發(fā)，加之蘭科植物生長(zhǎng)發(fā)育慢，新品種選育需要經(jīng)過(guò)漫長(zhǎng)的時(shí)間，因此，蘭科植物普遍存在著品種結(jié)構(gòu)單調(diào)，優(yōu)種繁育周期長(zhǎng)等弊病。因此，高效的育種、繁殖技術(shù)對(duì)蘭科植物產(chǎn)業(yè)的高速發(fā)展具有重要意義，同時(shí)也是育種行業(yè)迫切需要的。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種蘭科植物的育種方法。

本發(fā)明提供的一種蘭科植物的育種方法，包括如下步驟：

1)根據(jù)育種目標(biāo)選取蘭科植物親本材料進(jìn)行栽植培養(yǎng)，在盛花期進(jìn)行人工授粉，授粉后100-150天采收果莢；

果莢經(jīng)消毒后，在無(wú)菌條件下播種于種子萌發(fā)培養(yǎng)基上，置于25±2℃下培養(yǎng)，光照時(shí)間16小時(shí)/天，光照強(qiáng)度2000±100lx；50天后，誘導(dǎo)出原球莖；

所述的萌發(fā)培養(yǎng)基為：花寶1號(hào)2-4g/L+6-BA1-5mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂6g/L+活性炭1-2g/L；

2)將誘導(dǎo)出的原球莖轉(zhuǎn)入類(lèi)原球莖誘導(dǎo)培養(yǎng)基上誘導(dǎo)產(chǎn)生類(lèi)原球莖及增殖培養(yǎng)；培養(yǎng)條件：25±2℃，光照時(shí)間16小時(shí)/天，光照強(qiáng)度2000±100lx；

所述的類(lèi)原球莖誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：花寶1號(hào)2-4g/+6-BA 1.0-6.0mg/L+NAA0.1-0.8mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂6g/L+活性炭1-2g/L；

3)類(lèi)原球莖基因型鑒定：利用過(guò)氧化物酶(POD)同工酶對(duì)類(lèi)原球莖的進(jìn)行鑒定；根據(jù)POD同工酶條帶的位置和顏色深淺確定其與親本的關(guān)系，對(duì)獲得的類(lèi)原球莖個(gè)體進(jìn)行篩選；

4)將入選的類(lèi)原球莖，無(wú)菌條件下，接種于花寶1號(hào)2-4g/L+6-BA 1.0-4.0mg/L+NAA0.2-0.5mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂6g/L+活性炭1-2g/L，pH為5.4-5.8的分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)；培養(yǎng)條件：溫度為25.0±2℃，光照時(shí)間16小時(shí)/天，光照強(qiáng)度2000±100lx；培養(yǎng)30天后分化出芽和根；

5)將分化出的蘭科植物幼苗培養(yǎng)于壯苗培養(yǎng)基中生長(zhǎng)至幼苗長(zhǎng)出3-5片葉，移入溫室生長(zhǎng)至開(kāi)花；

所述的壯苗培養(yǎng)基為：花寶1號(hào)2-4g/L+蔗糖20g/L+瓊脂6.5g/L+活性炭1-2.0g/L，pH為5.4-5.8；培養(yǎng)條件：溫度為25.0±2℃，光照時(shí)間16小時(shí)/天，光照強(qiáng)度為2000±100lx，空氣濕度為65％-80％。

與目前常規(guī)的蘭科植物雜交育種技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)和有益效果：

1)本發(fā)明利用現(xiàn)代生化技術(shù)或分子生物學(xué)技術(shù)，對(duì)雜交一代進(jìn)行快速鑒定，不需要先選育自交系，節(jié)省了育種的時(shí)間。

2)本發(fā)明利用原球莖誘導(dǎo)產(chǎn)生類(lèi)原球莖并誘導(dǎo)類(lèi)原球莖進(jìn)行增殖，大大擴(kuò)大了種子的數(shù)量，又節(jié)省了種子繁育時(shí)間。

3)本發(fā)明不僅為蘭科植物提供了一個(gè)新的育種技術(shù)，而且也為其他難以進(jìn)行正常有性繁殖的植物種提供了可以借鑒得育種技術(shù)。

附圖說(shuō)明

圖1蝴蝶蘭品種HCH(左)和品種HOO7(右)，為本實(shí)驗(yàn)蝴蝶蘭雜交的母本和父本。

圖2蝴蝶蘭原球莖發(fā)育圖，其中：A播種45天的蝴蝶蘭原球莖；B蝴蝶蘭原球莖接種于增殖培養(yǎng)基30d后的生長(zhǎng)情況；C類(lèi)蝴蝶蘭原球莖接種于分化培養(yǎng)基60天后的生長(zhǎng)情況

圖3蝴蝶蘭類(lèi)原球莖POD同工酶分析，其中：1.母本；5.父本；2-4.為不同的雜交后代。

圖4鐵皮石斛原球莖發(fā)育圖，其中：A播種50天的鐵皮石斛原球莖；B鐵皮石斛原球莖增殖；C鐵皮石斛再生苗

圖5鐵皮石斛類(lèi)原球莖POD同工酶分析，其中：1.為自交親本；2-為自交后代。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1蝴蝶蘭雜交育種

(1)蝴蝶蘭雜交及雜交種子無(wú)菌播種方法