[發明專利]一種表達鮭魚降鈣素的方法及其專用表達盒

有效

• 申請號: 201710015196.5
• 申請日: 2017-01-10
• 公開（公告）號: CN106591356B
• 公開（公告）日: 2020-02-14
• 發明（設計）人: 劉昱輝;李梅;賈士榮;王志興
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院生物技術研究所
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;C12N15/62;C07K14/585;A01H5/00;A01H6/20
• 代理公司: 11245 北京紀凱知識產權代理有限公司
• 代理人: 關暢;何葉喧

1.一種表達鮭魚降鈣素的方法，依次包括如下步驟：

（1）將含有表達盒的重組載體導入受體植物，得到轉基因植物；

所述表達盒自上游至下游依次包括如下元件：植物油體蛋白基因的啟動子、融合基因和終止序列；

所述融合基因中含有區段甲和區段乙；所述區段甲編碼植物油體蛋白；所述區段乙編碼鮭魚降鈣素的前體；所述鮭魚降鈣素的前體為氨基酸序列如序列表中序列5自N末端起第158至190位所示的蛋白質；

所述植物油體蛋白基因的啟動子為油菜油體蛋白基因的啟動子；所述植物油體蛋白為芝麻油體蛋白；所述終止序列為Nos polyA終止子；

所述區段乙為核苷酸序列是序列表中序列1自5′末端起第22至120位所示的DNA分子；

（2）通過培養所述轉基因植物得到鮭魚降鈣素；

所述受體植物為油菜品種中雙4號。

2.如權利要求1所述方法，其特征在于：所述融合基因還包括一個以上區段丙；所述區段丙編碼蛋白標簽。

3.如權利要求1或2所述方法，其特征在于：所述融合基因還包括區段丁；所述區段丁為蛋白酶的酶切識別序列。

4.如權利要求3所述方法，其特征在于：所述蛋白酶為滿足如下條件的蛋白酶：所述蛋白酶對于所述融合基因的表達產物的酶切位置為特定氨基酸殘基與其前一位氨基酸殘基之間；所述特定氨基酸殘基為所述鮭魚降鈣素的前體的第一個氨基酸殘基。

5.如權利要求4所述方法，其特征在于：所述融合基因自上游至下游依次包括如下區段：所述區段丙、所述區段甲、所述區段丁和所述區段乙。