[發明專利]一種納米顆粒及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710014816.3
• 申請日: 2017-01-09
• 公開（公告）號: CN108283719B
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發明（設計）人: 劉瑞田;張凌宵;劉棟群
• 申請（專利權）人: 中國科學院過程工程研究所
• 主分類號: A61K47/69
• 分類號: A61K47/69;A61K47/52;A61K31/713;A61K39/00;A61K39/385;A61P37/04;A61P35/00
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟;侯桂麗

1.一種納米顆粒，其特征在于，以層狀雙羥基復合金屬氧化物作為載體，所述載體負載小干擾RNA和抗原表位肽，其中，所述小干擾RNA插入載體中，抗原表位肽吸附在所述載體表面；

所述小干擾RNA為吲哚胺2,3-雙加氧酶小干擾RNA；所述小干擾RNA正義鏈如SEQ IDNO.1所示，所述小干擾RNA反義鏈如SEQ ID NO.2所示；

所述抗原表位肽為酪氨酸酶抗原表位肽、Melan-A/MART-1抗原表位肽、gp100抗原表位肽、雞卵白蛋白、HER-2/neu腫瘤相關抗原或MUC1抗原肽中的任意一種或至少兩種的組合。

2.根據權利要求1所述的納米顆粒，其特征在于，所述酪氨酸酶抗原表位肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

3.一種如權利要求1或2所述的納米顆粒的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)制備雙羥基復合金屬氧化物；

(2)將步驟(1)制備得到的雙羥基復合金屬氧化物載體與小干擾RNA混合，混合后靜置，得到含有小干擾RNA插層的納米顆粒；

(3)將步驟(2)制備得到的含有小干擾RNA插層的納米顆粒與抗原表位肽混合，混合后靜置，離心得到所述含有小干擾RNA和抗原表位肽的納米顆粒。

4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述的制備雙羥基復合金屬氧化物包括如下具體步驟：

將摩爾濃度為0.01-0.1M的硝酸鎂和摩爾濃度為0.01-0.1M的硝酸鋁混合后加入摩爾濃度為0.01-0.1M的氫氧化鈉溶液中，攪拌10-20min，12000離心1-10min，用去碳酸水30℃震蕩混勻20-35min，轉至透析袋透析1-10h，再轉移到密閉容器中30℃，100-400rpm震蕩混懸0.5-3h，移至聚四氟乙烯水熱釜中100-130℃恒溫10-20h，自然冷卻得到雙羥基復合金屬氧化物。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述硝酸鎂的摩爾濃度為0.03M。

6.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述硝酸鋁的摩爾濃度為0.01M。

7.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述氫氧化鈉溶液的摩爾濃度為0.15M。

8.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述攪拌的時間為15min。

9.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述離心的時間為5min。

10.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述震蕩混勻的時間為30min。

11.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述透析的時間為5h。

12.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述震蕩混懸的轉速為280rpm。

13.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述震蕩混懸的時間為1h。

14.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述恒溫的溫度為120℃。

15.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述恒溫的時間為15h。

16.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述的小干擾RNA的終濃度為0.01-1μg/μL。

17.根據權利要求16所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述的小干擾RNA的終濃度為0.05-0.5μg/μL。