[發明專利]一種生產香蕉菌根組織培養種苗的方法

在審

• 申請號: 201710010831.0
• 申請日: 2017-01-06
• 公開（公告）號: CN107018883A
• 公開（公告）日: 2017-08-08
• 發明（設計）人: 覃曉娟;陳廷速;李冬萍;張金蓮;劉增亮;汪茜;龍艷艷;馮重陽;宋娟;晏衛紅;黃京華;陳振松
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區農業科學院微生物研究所;廣西物寶農業科技集團有限責任公司
• 主分類號: A01G31/00
• 分類號: A01G31/00;A01H4/00;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 北京高沃律師事務所11569
• 代理人: 王加貴

技術領域

本發明屬于植物菌根技術領域，特別涉及香蕉菌根組織培養種苗生產技術。

背景技術

香蕉是我國南方地區重要的經濟作物，目前，制約我國香蕉產業健康發展的兩大問題是香蕉主產區枯萎病病害嚴重和土壤肥力偏低。香蕉枯萎病又名香蕉巴拿馬病，黃葉病，是一種由古巴?；图怄哏牭毒秩揪S管束引起植株凋萎的毀滅性真菌土傳病害。叢枝菌根(AM)真菌是菌根真菌的一種，能促進植物宿主對水分和養分(特別是磷)的吸收和利用，在促進植物生長、改善土壤生態、抑制土傳病害和提高植株抗病性方面極具應用潛力的微生物資源。

利用香蕉組織培養技術，規模化生產香蕉種苗，能有效提高香蕉種苗質量。同時，利用菌根技術，在移栽時對組培苗進行高效菌根真菌的人工輔助接種，實現種苗菌根化，這對提高香蕉組織培養苗的移栽成活率、改善其生長狀況將起到至關重要的作用。但是目前在香蕉的實際生產中，未見有AM菌根在香蕉組培苗上的應用，更沒有找到一種具有明顯促生作用的AM菌劑。

發明內容

有鑒于此，本發明分離得到一株叢枝菌根真菌的優勢菌株，地表球囊霉LCGX-58，用該菌株制成AM菌劑，在適宜的共生培養體系條件下，對香蕉有顯著的促生功能。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了一株地表球囊霉(Glomus versiforme)LCGX-58，保藏編號為CGMCCNo.8775。

本發明提供了上述技術方案所述地表球囊霉LCGX-58在制備地表球囊霉(Glomus versiforme)LCGX-58菌劑中的應用。

本發明提供了上述技術方案所述地表球囊霉LCGX-58菌劑的制備方法，包含以下步驟：

(a)以玉米為宿主，將地表球囊霉LCGX-58的孢子接種于玉米幼苗根系，種植、培養；

(b)長出地表球囊霉菌絲后，對所述步驟(a)培養中的玉米停止澆水，待植株干枯后除去莖稈，保留根系，培養基質中所得菌絲、培養基質和玉米根系即為地表球囊霉LCGX-58菌劑。

優選的，步驟(a)中的玉米幼苗種植于培養基質中，大棚光照培養12～16周。

優選的，所述培養基質包括河砂和沸石；

優選的，所述河沙和沸石的體積比為2:1～3:1；

優選的，所述培養基質使用前經過滅菌處理。

優選的，LCGX-58菌劑包含培養基質中所得菌絲、培養基質和玉米根系。

本發明還提供了上述技術方案所述LCGX-58菌劑在香蕉生產中的應用，包含以下步驟：

(1)將香蕉植株的吸芽無菌處理后修剪成帶生長點的莖尖，將所述莖尖在溫度為25℃～28℃、光強度為2000～3000lx、光照時間為l2h·d-1的培養條件下依次進行誘導培養35～40天、繼代培養25～30天和生根培養20～30天，得到香蕉組培苗；

(2)將所述步驟(1)得到的香蕉組培苗進行為期15～20天的煉苗；

(3)將所述步驟(2)煉苗后的香蕉組培苗移栽至育苗培養基上進行培養，所述育苗培養基包括體積比為1:1～1:2的地表球囊霉LCGX-58菌劑與育苗基質。

優選的，所述步驟(3)的培養過程中進行養護管理，所述養護管理具體為：蓋塑料薄膜保濕15～20天，保持濕度70～80％；在所述培養過程中，每2周噴施一次Hoagland′s營養液。

優選的，步驟(1)中所述誘導培養用誘導培養基包括MS基礎培養基、占所述MS基礎培養基濃度為2～5mg/L的BA和占所述MS基礎培養基濃度為0.1～0.2mg/L的NAA。

優選的，步驟(1)中所述繼代培養用繼代培養基包括MS基礎培養基、占所述MS基礎培養基濃度為1～3mg/L的BA和占所述MS基礎培養基濃度為0.05～0.15mg/L的NAA。

優選的，步驟(1)中所述生根培養用生根培養基包括1/2MS基礎培養基、占所述1/2MS基礎培養基濃度為0.1～0.2mg/L的NAA和占所述1/2MS基礎培養基濃度為0.1～0.5％的活性炭。

技術效果