[發(fā)明專利]一種提高白羽王鴿乳鴿胸腿肌率的分子標(biāo)記輔助選擇方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710005015.0
• 申請(qǐng)日: 2017-01-04
• 公開（公告）號(hào): CN106591467B
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姜潤深;萬意;周幫園;黃媛媛;馬陳東;王志成;戴猛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6869
• 分類號(hào): C12Q1/6869;C12Q1/6888;A01K67/02
• 代理公司: 上海怡恩專利代理事務(wù)所(普通合伙) 31336
• 代理人: 潘青青

本發(fā)明公開了一種提高白羽王鴿乳鴿胸腿肌率的分子標(biāo)記輔助選擇方法，包括以下步驟：育種基礎(chǔ)群建立：選擇成年白羽王鴿種鴿作為育種基礎(chǔ)群，即0世代；種鴿采取籠養(yǎng)，種鴿編號(hào)；基礎(chǔ)群親鴿連續(xù)繁殖，獲得G1代，由種鴿孵化、哺育；G1代后備鴿飼養(yǎng)；G1代后備鴿分子標(biāo)記輔助選擇；G1代選留的后備鴿進(jìn)入繁殖期選種。純繁繼代，獲得G2代，如此循環(huán)，獲得Gn代。本發(fā)明提供的L?FABP基因分子標(biāo)記與乳鴿胸肌率和腿肌率有遺傳關(guān)聯(lián)，因此可以通過標(biāo)記輔助選擇來提高乳鴿胸肌率和腿肌率，避免破壞性度量；另外，利用標(biāo)記輔助選擇可以實(shí)現(xiàn)早期選種，加快育種進(jìn)展。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于禽類遺傳標(biāo)記技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種提高白羽王鴿乳鴿胸肌率和腿肌率的分子標(biāo)記輔助選擇方法。

背景技術(shù)

我國是肉鴿養(yǎng)殖大國，全國種鴿存欄約5000萬對(duì)，年產(chǎn)乳鴿8億只。我國肉鴿生長以農(nóng)戶小規(guī)模養(yǎng)殖為主，且大多數(shù)實(shí)行自繁自養(yǎng)，因小群體近交和缺乏相關(guān)育種技術(shù)，鴿群生產(chǎn)性能不佳甚至退化。白羽王鴿是從美國引進(jìn)的品種，是我國當(dāng)前肉鴿生產(chǎn)的主要鴿種，然而伴隨著雜交、近交、盲目選種，導(dǎo)致白羽王鴿種源混雜、生產(chǎn)性能良莠不齊。近年來，一些規(guī)模較大的企業(yè)和科研單位著手肉鴿育種工作，但是至今尚未培育成國家審定的新品種，表明肉鴿育種較雞、豬等其他畜禽滯后。

分子標(biāo)記輔助選擇是利用表型數(shù)據(jù)和基因型數(shù)據(jù)來選擇的育種技術(shù)，在豬、牛、雞等畜禽育種中已經(jīng)得到了較廣泛的應(yīng)用，然而在肉鴿育種中尚未多見。本發(fā)明人前期研究發(fā)現(xiàn)，白羽王鴿肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白基因(L-FABP)外顯子2存在T1327C突變，等位基因C是乳鴿胸肌率和腿肌率的有利基因卻不影響乳鴿的體重，因此可以通過選育提高鴿群L-FABP等位基因C的基因頻率來提高乳鴿胸肌率和腿肌率，從而提高乳鴿的屠宰性能，增加可食部分的比例。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種提高白羽王鴿乳鴿胸腿肌率的分子標(biāo)記輔助選擇方法。在常規(guī)選育的基礎(chǔ)上，利用L-FABP基因分子標(biāo)記，開展標(biāo)記輔助選擇，逐代提高白羽王鴿乳鴿胸肌率和腿肌率。

其具體技術(shù)方案為：

一種提高白羽王鴿乳鴿胸腿肌率的分子標(biāo)記輔助選擇方法，包括以下步驟：

步驟1、育種基礎(chǔ)群建立

選擇成年白羽王鴿作為育種基礎(chǔ)群，即0世代。種鴿采取籠養(yǎng)、編號(hào)。

步驟2、基礎(chǔ)群繁殖獲得G1代

基礎(chǔ)群(0世代)種鴿連續(xù)繁殖，獲得G1代。由種鴿孵化、哺育。

步驟3、G1代后備鴿飼養(yǎng)

乳鴿25日齡時(shí)，淘汰明顯體重偏小的個(gè)體，留種的個(gè)體佩戴帶有唯一編號(hào)的腳環(huán)作為個(gè)體識(shí)別。佩戴腳環(huán)的同時(shí)，翼根靜脈取血0.2ml，抗凝冷凍保存?zhèn)溆?。乳鴿佩戴腳環(huán)后，轉(zhuǎn)入青年鴿舍作為后備種鴿飼養(yǎng)。

步驟4、G1代后備鴿分子標(biāo)記輔助選擇

(1)配對(duì)前，選留羽色、脛色等符合本品種外貌特征、體重中等偏上、體型勻稱的個(gè)體，留種比例約80％。

(2)對(duì)選留的個(gè)體進(jìn)行肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白基因L-FABP的基因型鑒定

①后備鴿基因組DNA提取：采用酚-氯仿法提取乳鴿血液中的基因組DNA。

②L-FABP基因片段PCR擴(kuò)增：合成PCR引物：上游引物序列為GAAATCCTCACAGTTGGGCG、下游引物序列為CTTGGCCTTCTCTCCTGTCA；PCR擴(kuò)增體系為20ul，其中基因組DNA 1μL、上下游引物各1μL、2×Premix Taq 10μL、ddH₂O 7μL；PCR程序?yàn)?4℃5min，后接35個(gè)循環(huán)，94℃30s，x℃45s，72℃30s，后接72℃10min；