[發(fā)明專利]改變的粘附基質(zhì)細胞及其產(chǎn)生和使用方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201680088005.1
• 申請日: 2016-06-06
• 公開（公告）號: CN109496236A
• 公開（公告）日: 2019-03-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: E·亞伯拉罕;L·拉維夫;M·瓦達馬尼;N·艾希科爾
• 申請（專利權(quán)）人: 普拉里斯坦有限公司
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775;A61K35/28;C12M3/00
• 代理公司: 永新專利商標(biāo)代理有限公司 72002
• 代理人: 左路;林曉紅

1.一種產(chǎn)生改性的粘附基質(zhì)細胞(ASC)的方法，所述方法包括在含有細胞因子的生長培養(yǎng)基中以三維(3D)培養(yǎng)溫育來自胎盤或者脂肪組織的ASC的步驟，其中所述含有細胞因子的生長培養(yǎng)基添加了一或多種促炎性細胞因子，從而產(chǎn)生改性的ASC。

2.權(quán)利要求1的方法，所述方法包括以下步驟：(a)在第一生長培養(yǎng)基中的3D培養(yǎng)中溫育來自胎盤或者脂肪組織的所述ASC，其中沒有向所述第一生長培養(yǎng)基添加促炎性細胞因子；和(b)隨后進行在所述含有細胞因子的生長培養(yǎng)基中溫育所述ASC的步驟。

3.權(quán)利要求1或2的方法，進一步包括通過從所述3D培養(yǎng)移出所述ASC以收獲所述ASC的后續(xù)步驟。

4.權(quán)利要求1-3任一項的方法，其中所述3D培養(yǎng)在生物反應(yīng)器中進行。

5.權(quán)利要求1-4任一項的方法，其中所述3D培養(yǎng)包含合成的粘附材料。

6.權(quán)利要求5的方法，其中所述合成的粘附材料選自聚酯、聚丙烯、聚烯烴、聚氟氯乙烯、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚砜、醋酸纖維素、玻璃纖維、陶瓷顆粒、聚-L-乳酸及惰性金屬纖維。

7.權(quán)利要求2的方法，其中所述3D培養(yǎng)在生物反應(yīng)器中進行，且步驟(a)的至少部分是以灌注模式進行。

8.權(quán)利要求2的方法，其中所述3D培養(yǎng)在生物反應(yīng)器中進行，且步驟(b)的至少部分是以灌注模式進行。

9.權(quán)利要求2的方法，其中所述3D培養(yǎng)在生物反應(yīng)器中進行，且步驟(a)進行至少3天。

10.權(quán)利要求2的方法，其中所述3D培養(yǎng)在生物反應(yīng)器中進行，且步驟(b)進行6-48小時。

11.權(quán)利要求1-10任一項的方法，其中在2D粘附細胞培養(yǎng)中溫育了所述ASC。

12.權(quán)利要求1-11任一項的方法，其中在所述含有細胞因子的生長培養(yǎng)基中溫育所述ASC的步驟在指數(shù)期開始。

13.權(quán)利要求4-12任一項的方法，其中在所述含有細胞因子的生長培養(yǎng)基中溫育所述ASC的步驟包括：(i)向所述生物反應(yīng)器中的培養(yǎng)基添加一次所述一或者多種促炎性細胞因子，從而產(chǎn)生所述含有細胞因子的生長培養(yǎng)基；和(ii)將含有細胞因子的所述第二生長培養(yǎng)基與包含額外量的所述含有細胞因子的生長培養(yǎng)基的外部容器的可操作地。

14.權(quán)利要求1-13任一項的方法，其中所述一或者多種促炎性細胞因子包括腫瘤壞死因子α(TNF-α)。

15.權(quán)利要求14的方法，其中所述一或者多種促炎性細胞因子還包括干擾素-γ(IFN-γ)。

16.權(quán)利要求1-13任一項的方法，其中所述一或者多種促炎性細胞因子包括干擾素-γ(IFN-γ)。

17.權(quán)利要求14-16任一項的方法，其中所述一或者多種促炎性細胞因子的每一種以1-4納克/毫升的濃度存在。

18.權(quán)利要求14-16任一項的方法，其中所述一或者多種促炎性細胞因子的每一種以4-8納克/毫升的濃度存在。

19.權(quán)利要求14-16任一項的方法，其中所述一或者多種促炎性細胞因子的每一種以8-12納克/毫升的濃度存在。