[發(fā)明專利]利用由物理刺激引起的環(huán)境流入的細(xì)胞重編程方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201680084450.0 | 申請日： | 2016-08-09 |
| 公開（公告）號： | CN109089423A | 公開（公告）日： | 2018-12-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 金舜學(xué) | 申請（專利權(quán)）人： | 斯特昂株式會社 |
| 主分類號： | C12N13/00 | 分類號： | C12N13/00;C12N5/079;C12N5/077;C12N5/071;C12N5/074 |
| 代理公司： | 北京三友知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11127 | 代理人： | 金玲 |
| 地址： | 韓國*** | 國省代碼： | 韓國;KR |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 分化細(xì)胞 物理刺激 未分化細(xì)胞 細(xì)胞重編程 超聲波處理 熱處理 多能細(xì)胞 化學(xué)物質(zhì) 激光處理 生產(chǎn)過程 外部環(huán)境 誘導(dǎo)因子 自體細(xì)胞 重編程 表型 誘導(dǎo) 分化 細(xì)胞 引入 治療 | ||
1.一種細(xì)胞的重編程方法，其特征在于，包括：
向分化細(xì)胞或未分化細(xì)胞與培養(yǎng)基的混合物提供能夠促進環(huán)境流入的物理刺激的步驟，
將接受上述物理刺激的混合物培養(yǎng)規(guī)定時間來獲得重編程的細(xì)胞的步驟。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞的重編程方法，其特征在于，上述環(huán)境流入包含：來自接受物理刺激的分化細(xì)胞或未分化細(xì)胞的遺傳物質(zhì)、化學(xué)物質(zhì)、小分子、外泌體或包含外泌體的細(xì)胞外囊泡；或者培養(yǎng)基成分的細(xì)胞內(nèi)流入。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞的重編程方法，其特征在于，上述物理刺激為超聲波、激光、磁場、等離子體、發(fā)光二極管、電刺激、化學(xué)性暴露、熱處理或酸處理中的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞的重編程方法，其特征在于，上述分化細(xì)胞或未分化細(xì)胞為體細(xì)胞、癌細(xì)胞、器官組織細(xì)胞、誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞或胚胎干細(xì)胞中的一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞的重編程方法，其特征在于，上述重編程的細(xì)胞為多能細(xì)胞；或者是肝細(xì)胞、成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、肌肉細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、毛囊細(xì)胞、胰腺β細(xì)胞或心肌細(xì)胞的分化細(xì)胞中的一種，上述分化細(xì)胞或未分化細(xì)胞以及重編程的細(xì)胞具有不同的細(xì)胞表型。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的細(xì)胞的重編程方法，其特征在于，上述多能細(xì)胞為用于表達Oct3/4、SOX2、NANOG、c-MYC、KLF4、TDGF1、SSEA4、TRA-1-60、PAX6、巢蛋白、鼠短尾突變體表型、SMA、GATA4或AFP中的一種的多能性標(biāo)記基因或者三胚層標(biāo)記基因的細(xì)胞。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的細(xì)胞的重編程方法，其特征在于，上述分化細(xì)胞為用于表達PAX6、巢蛋白、Soxl、Sox2、MAP2、TuJl、GFAP或O4中的一種的神經(jīng)細(xì)胞；用于表達結(jié)蛋白、輔肌動蛋白、Pax3、SMA、GATA4或NKX2-5中的一種的肌肉細(xì)胞；用于表達AFP、HNFla、HNF4a、CK18或ALB中的一種的肝細(xì)胞；或者能夠進行油紅O染色且用于表達Pparc2、C/ebpa、aP2或Fabp4中的一種的脂肪細(xì)胞中的一種。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞的重編程方法，其特征在于，上述培養(yǎng)基為干細(xì)胞培養(yǎng)基、專能干細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基、成肝細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基、成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基、脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基、肌肉細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基、星形膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基、神經(jīng)元細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基、血管內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基、角質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基、胰腺β細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基或心肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基中的一種。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的細(xì)胞的重編程方法，其特征在于，還包括在對培養(yǎng)基以及分化細(xì)胞或未分化細(xì)胞進行混合之前在輸出強度為lW/cm2至20W/cm2的條件下對培養(yǎng)基進行超聲波處理1分鐘至20分鐘的步驟。
10.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的細(xì)胞的重編程方法，其特征在于，對于培養(yǎng)基以及分化細(xì)胞或未分化細(xì)胞的混合物的超聲波處理在輸出強度為0.5W/cm2至3W/cm2的條件下進行1秒鐘至5秒鐘。
11.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的細(xì)胞的重編程方法，其特征在于，還包括在對培養(yǎng)基以及分化細(xì)胞或未分化細(xì)胞進行混合之前利用波長范圍為300nm至900nm的脈沖激光束對培養(yǎng)基進行照射1分鐘至20分鐘的步驟。
12.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的細(xì)胞的重編程方法，其特征在于，在對于培養(yǎng)基以及分化細(xì)胞或未分化細(xì)胞的混合物的激光處理中，利用波長范圍為300nm至900nm的射脈沖激光束照射1秒鐘至10秒鐘。
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