[發明專利]通過電刺激的血小板的鈣控制活化

有效

• 申請號: 201680082886.6
• 申請日: 2016-12-29
• 公開（公告）號: CN108697763B
• 公開（公告）日: 2022-12-09
• 發明（設計）人: V.B.內庫萊斯;A.S.托雷斯;S.L.克羅普曼
• 申請（專利權）人: 通用電氣公司
• 主分類號: A61K38/18
• 分類號: A61K38/18;A61K35/19;G01N33/49
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 麥振聲;黃希貴

本公開涉及活化的血小板產物的產生，其中以下的一個或多個由在活化過程中鈣離子的存在或濃度控制：凝塊存在或不存在，凝塊形成(如果存在)的時刻和/或凝塊(如果存在)的機械強度。在某些實施方案中，作為活化過程的一部分，在脈沖電場或化學活化劑(例如凝血酶)存在下控制鈣離子濃度。

背景

本文公開的主題一般涉及用于各種醫學應用的血小板療法，所述醫學應用例如用于手術或創傷的治療。某些實施方案涉及通過改變各種活化條件，包括但不限于脈沖電場的存在和特性以及鈣的存在和濃度，進行血小板活化和凝血控制。

血小板凝膠(也稱為“富含活化血小板的血漿”)的使用是一種新興的治療方法，其可以在臨床或其他健康護理設施中用于各種應用，包括促進傷口愈合(例如手術后)和止血。特別是，對于許多類型的損傷和病癥，例如神經損傷、腱炎、骨關節炎、心肌損傷和骨修復和再生，存在對使用血小板療法作為傷口愈合治療的關注。另外，對患者使用的血小板凝膠的衍生可以是自體的，意味著血小板來自患者自身的組織和/或流體。因此，來自患者的血液樣品可用于衍生用于治療該患者的血小板凝膠。

舉例來說，醫生可以從患者抽取血液。然后可以將血液離心以產生富血小板血漿(PRP)。在血小板活化后，血液中的血小板釋放有利于和促進傷口愈合級聯的生長因子和蛋白質。因此，臨床工作流程可包含從患者抽取血液，離心血液以分離出血小板，以及進行離體血小板活化，例如使用牛凝血酶。然后可將活化的血小板或血小板凝膠施用于傷口或其他治療區域。在替代地使用體內血小板活化的情況下，醫生可以在不添加血小板活化劑的情況下將PRP應用于該部位。血小板活化，包括生長因子釋放和凝血，通常由結締組織內的膠原誘導。

對于這樣的離體應用，其中凝血酶(例如牛凝血酶)用于誘導血小板活化，所得的生長因子水平可以基于生物反應來固定。即，不同生長因子的量和/或各自的比例或比率由基于凝血酶的活化的性質決定。因此，在這樣的反應中，臨床醫生不能調節或操縱不同生長因子的相應量或比率，而必須改為設法使用常規活化組合物。此外，在某些臨床情況下，可能需要具有或不具有凝血和/或在凝血的存在下控制凝塊的機械強度或其他特性。

簡要描述

在一個實施方案中，提供了用于產生活化產物的方法。根據該方法，制備富血小板血漿(PRP)樣品用于活化。通過添加相應濃度的鈣離子來制備PRP樣品。所述相應濃度的選擇是基于凝塊是否要存在于使用PRP樣品產生的活化產物組合物中，并且如果要存在凝血，則基于直至凝塊形成的時間或凝塊的機械強度中的一者或多者。PRP樣品相對于電磁刺激裝置的電極放置。指定一組電脈沖參數。PRP樣品暴露于根據參數值產生的一個或多個電脈沖。當暴露于一個或多個電脈沖時，PRP樣品產生包含一種或多種生長因子并具有特定凝血特性的活化產物組合物。

在另一個實施方案中，提供了用于產生活化產物的方法。根據該方法，制備抗凝血劑處理的富血小板血漿(PRP)樣品用于活化。將鈣離子添加到PRP樣品中以獲得選自可能濃度范圍的鈣離子濃度。基于使用PRP樣品產生的活化產物組合物中要存在的一種或多種生長因子的目標水平來選擇濃度。PRP樣品暴露于電活化刺激。當暴露于電活化刺激時，PRP樣品產生包含目標水平的一種或多種生長因子的活化產物組合物。在不改變電活化刺激的情況下改變鈣離子濃度，使所述一種或多種生長因子的絕對或相對水平中的一者或兩者變化。

在另外的實施方案中，提供了用于控制血小板凝膠中的凝塊機械強度的方法。根據該方法，確定要在血小板凝膠中產生的一個或多個凝塊的預期的機械強度。預期的機械強度大于僅使用凝血酶產生血小板凝膠所觀察到的機械強度。基于預期的機械強度，從多個鈣離子濃度中選擇對應于預期的機械強度的鈣離子濃度。通過活化包含選擇鈣離子濃度的鈣離子的富血小板血漿(PRP)樣品來產生血小板凝膠。使用電刺激活化PRP樣品。血小板凝膠包含凝塊，該凝塊一旦形成，具有預期的機械強度。

附圖的簡要描述

當參考附圖閱讀以下詳細描述時，將更好地理解本發明的這些和其他特征、方面和優點，附圖中相同的字符在整個附圖中表示相同的部分，其中：