[發明專利]用于治療惡性實體腫瘤的減毒細菌

有效

• 申請號: 201680079454.X
• 申請日: 2016-11-17
• 公開（公告）號: CN108472348B
• 公開（公告）日: 2022-12-27
• 發明（設計）人: 西蒙·伊泰格;馬利斯·阿姆斯特茨;克里斯托夫·卡斯帕;蓋伊·R·科內利斯
• 申請（專利權）人: 巴塞爾大學
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00;A61K39/02
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 史文靜;黃革生

1.重組減毒革蘭氏陰性細菌菌株在制備藥物或試劑盒中的用途，所述藥物或試劑盒與鐵載體組合用于治療受試者的惡性實體腫瘤，

其中所述重組減毒革蘭氏陰性細菌菌株是耶爾森氏菌（Yersinia），其在鐵載體產生方面有缺陷并且在至少細菌效應蛋白YopE、YopH、YopM、YopO、YopP和YopT的生產方面有缺陷并且用如下載體轉化，所述載體按5’至3’方向包含：

啟動子；

編碼來自細菌效應蛋白的遞送信號的第一DNA序列，其可操作地連接至所述啟動子，其中遞送信號包含YopE效應蛋白或其N末端片段，其中所述N末端片段至少包括或者為YopE效應蛋白的N-末端的52個氨基酸；

編碼異源蛋白的第二DNA序列，其與所述第一DNA序列的3’末端框內融合，

或者

所述重組減毒革蘭氏陰性細菌菌株是沙門氏菌，其在鐵載體產生方面有缺陷并且在至少細菌效應蛋白SopE，SopB和SptP的生產方面有缺陷并且用如下載體轉化，所述載體按5’至3’方向包含：

啟動子；

編碼來自細菌效應蛋白的遞送信號的第一DNA序列，其可操作地連接至所述啟動子，其中所述遞送信號包含SopE或SteA效應蛋白或SopE效應蛋白的N末端片段，其中所述SopE效應蛋白的N末端片段至少包括或者為SopE效應蛋白的N末端81個氨基酸；

編碼異源蛋白的第二DNA序列，其與所述第一DNA序列的3’末端框內融合，

其中鐵載體選自去鐵胺，去鐵敏E、地拉羅司和去鐵酮，其中所述重組減毒革蘭氏陰性細菌菌株在惡性實體腫瘤中積聚，并且其中所述異源蛋白選自由以下組成的組：參與細胞凋亡或細胞凋亡調節的蛋白、錨蛋白重復蛋白、納米抗體融合構建體和納米抗體。

2.根據權利要求1所述的用途，其中所述重組減毒革蘭氏陰性細菌菌株是小腸結腸炎耶爾森氏菌（Y. enterocolitica）或腸炎沙門氏菌(S.enterica)。

3.根據權利要求1所述的用途，其中所述重組減毒革蘭氏陰性細菌菌株在對真核細胞有毒力的所有細菌效應蛋白的生產方面有缺陷。

4.根據權利要求1所述的用途，其中所述重組減毒革蘭氏陰性細菌菌株是突變的耶爾森氏菌菌株，在突變的耶爾森氏菌菌株中，編碼對真核細胞有毒力的細菌效應蛋白的所有效應子編碼基因均被突變，使得所得耶爾森氏菌不再產生對真核細胞有毒力的任何功能性細菌效應蛋白；或者所述重組減毒革蘭氏陰性細菌菌株是突變的沙門氏菌菌株，在突變的沙門氏菌菌株中，編碼對真核細胞有毒力的細菌效應蛋白的所有效應子編碼基因均被突變，使得所得沙門氏菌不再產生對真核細胞有毒力的任何功能性細菌效應蛋白。

5.根據權利要求1所述的用途，其中YopE是小腸結腸炎耶爾森氏菌YopE效應蛋白，或所述SteA效應蛋白是腸炎沙門氏菌SteA效應蛋白，或所述SopE效應蛋白為腸炎沙門氏菌SopE效應蛋白。

6.根據權利要求1所述的用途，其中所述YopE效應蛋白的N-末端片段至少包括或者為YopE效應蛋白的N-末端的80個氨基酸。

7.權利要求1的用途，其中所述YopE效應蛋白的N-末端片段至少包括或者為YopE效應蛋白的N-末端的138個氨基酸。

8.權利要求1的用途，其中所述SopE效應蛋白的N末端片段至少包括或者為SopE效應蛋白的N末端105個氨基酸。

9.根據權利要求1所述的用途，其中所述異源蛋白選自參與細胞凋亡或細胞凋亡調節的蛋白、納米抗體融合構建體和納米抗體。

10.根據權利要求1所述的用途，其中所述異源蛋白選自參與細胞凋亡或細胞凋亡調節的蛋白。

11.根據權利要求1所述的用途，其中所述重組減毒革蘭氏陰性細菌菌株在對真核細胞有毒力的所有效應蛋白的生產方面有缺陷，并且所述重組減毒革蘭氏陰性細菌菌株表達前藥轉化酶。