[發明專利]用于生產毛囊和新生乳頭的方法及其用于體外測試和體內植入物的用途在審
| 申請號: | 201680078151.6 | 申請日: | 2016-11-14 |
| 公開(公告)號: | CN108473951A | 公開(公告)日: | 2018-08-31 |
| 發明(設計)人: | 格爾德·林德納 | 申請(專利權)人: | 柏林工業大學 |
| 主分類號: | C12N5/071 | 分類號: | C12N5/071 |
| 代理公司: | 深圳市博銳專利事務所 44275 | 代理人: | 張明 |
| 地址: | 德國柏林*** | 國省代碼: | 德國;DE |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 毛囊 成纖維細胞 新生乳頭 真皮乳頭 細胞培養條件 結締組織鞘 體內植入物 球狀細胞 體外測試 聚集體 粘附的 生產 | ||
1.一種用于生產新生乳頭的方法,包括以下步驟:
a)提供來自至少一個毛囊的至少一個真皮乳頭(DP)的分離的真皮乳頭成纖維細胞(DPF);
b)提供來自至少一個毛囊的分離的結締組織鞘成纖維細胞(CTSF);以及
c)在基本上非粘附的細胞培養條件下將所述DPF與所述CTSF共培養以形成球狀細胞聚集體。
2.根據權利要求1所述的方法,其中,將所述DPF和所述CTSF以1-20:1-20的比例共培養。
3.根據權利要求1或2所述的方法,其中,在步驟c)中的所述共培養期間另外存在內皮細胞(EC)和/或間質血管碎片(SVF)的細胞。
4.根據前述權利要求中任一項所述的方法,其中,所述新生乳頭由2個至20000個細胞、優選為10個至15000個、特別優選為1000個至10000個、非常特別地優選為1500個至5000個細胞組成。
5.根據前述權利要求中任一項所述的方法,其中,所述新生乳頭被細胞外基質蛋白包被。
6.根據前述權利要求中任一項所述的方法,其中,所述共培養在轉動、旋轉或搖動攪動下進行。
7.根據前述權利要求中任一項所述的方法,其中,所述共培養進行至少10分鐘,優選進行20分鐘至48小時。
8.一種使用根據權利要求1至7中任一項所述的方法生產的新生乳頭。
9.一種用于生產毛囊的方法,包括以下步驟:
a)提供至少一個使用根據權利要求1至7中任一項所述的方法生產的新生乳頭;
b)提供選自角蛋白細胞(KC)、黑素細胞(MC)或結締組織鞘成纖維細胞(CTSF)的至少一種另外的細胞群;以及
c)在基本上非粘附的細胞培養條件下,將所述新生乳頭與所述至少一種另外的細胞群共培養。
10.根據權利要求9所述的方法,其中,將所述新生乳頭與KC、MC和/或CTSF以1-10:1-50的比例共培養。
11.根據權利要求9或10所述的方法,其中,所述至少一種另外的細胞群能夠從毛囊獲得和/或是從毛囊獲得的。
12.根據權利要求9至11中任一項所述的方法,其中,所述共培養進行至少10分鐘,優選進行20分鐘至48小時。
13.一種使用根據權利要求8至12中任一項所述的方法生產的毛囊。
14.一種皮膚等同物,包含根據權利要求8所述的新生乳頭和/或根據權利要求13所述的毛囊。
15.一種移植物,包含有效量的根據權利要求14所述的皮膚等同物以及可選的可藥用佐劑。
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