[發(fā)明專利]三步酸解離酶聯(lián)免疫吸附(TADELIS)測(cè)定法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201680073882.1
• 申請(qǐng)日: 2016-12-14
• 公開（公告）號(hào): CN108369227B
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: G·喬丹;R·史塔克
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 豪夫邁·羅氏有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/536
• 分類號(hào): G01N33/536;G01N33/68;G01N33/94
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所 11247
• 代理人: 張莉;黃革生

1.一種用于在樣品中測(cè)定治療性抗體的配體的總量的方法，其按以下順序包括以下步驟：

-對(duì)樣品進(jìn)行酸處理，

-通過首先向樣品中加入過量的標(biāo)記的治療性抗體，并孵育該酸處理的樣品與該過量的標(biāo)記的治療性抗體以形成二元復(fù)合物，即標(biāo)記的治療性抗體-配體，并通過在形成二元復(fù)合物之后向樣品中加入多克隆抗配體抗體以形成三元復(fù)合物，即標(biāo)記的治療性抗體-配體-抗配體抗體，

由此在溶液中形成三元復(fù)合物，其中所述三元復(fù)合物包含

i)抗配體抗體，

ii)配體，和

iii)標(biāo)記的治療性抗體，和

-測(cè)定三元復(fù)合物的量，和

由此確定治療性抗體的配體的量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法用于測(cè)定能夠被治療性抗體特異結(jié)合的配體的量。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述樣品是血漿樣品或血清樣品。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述樣品是血漿樣品或血清樣品。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述樣品在酸處理之前不被稀釋。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述樣品在酸處理之前不被稀釋。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述樣品在酸處理之前不被稀釋。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在復(fù)合物的形成中，標(biāo)記的治療性抗體與可檢測(cè)標(biāo)記綴合。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中抗配體抗體與結(jié)合對(duì)的第一成員綴合。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法包括在形成三元復(fù)合物之后將形成的三元復(fù)合物固定在固體支持物上的步驟。

11.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述方法包括在形成三元復(fù)合物之后將形成的三元復(fù)合物固定在固體支持物上的步驟。

12.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述方法包括在形成三元復(fù)合物之后將形成的三元復(fù)合物固定在固體支持物上的步驟。

13.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中所述方法包括在形成三元復(fù)合物之后將形成的三元復(fù)合物固定在固體支持物上的步驟。

14.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中固體支持物與結(jié)合對(duì)的第二成員綴合。

15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述結(jié)合對(duì)的第二成員能夠與綴合至抗配體抗體的結(jié)合對(duì)的第一成員形成復(fù)合物。

16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法按以下順序包括以下步驟：

-對(duì)樣品進(jìn)行酸處理，

-將樣品與標(biāo)記的治療性抗體孵育，所述標(biāo)記的治療性抗體與可檢測(cè)的標(biāo)記綴合，

-將樣品與多克隆抗配體抗體孵育，所述多克隆抗配體抗體與結(jié)合對(duì)的第一成員綴合，

-將樣品施加至與結(jié)合對(duì)的第二成員綴合的固體支持物上，所述結(jié)合對(duì)的第二成員與結(jié)合對(duì)的第一成員形成非共價(jià)復(fù)合物，和

-通過測(cè)定固相固定的標(biāo)記的治療性抗體的量來(lái)確定所述治療性抗體的配體的量。