[發(fā)明專利]用于生產(chǎn)疫苗的化學(xué)限定無血清培養(yǎng)基中的MDCK懸浮細(xì)胞系有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201680072472.5 | 申請日: | 2016-10-31 |
| 公開(公告)號: | CN109689868A8 | 公開(公告)日: | 2019-07-09 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 方珍妮;倪孝慈;胡勇志;翁彩娟 | 申請(專利權(quán))人: | 財團(tuán)法人衛(wèi)生研究院;富士膠片歐文科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/06 | 分類號: | C12N15/06;C12N5/07;A61K39/12 |
| 代理公司: | 廣州三環(huán)專利商標(biāo)代理有限公司 44202 | 代理人: | 郝傳鑫 |
| 地址: | 中國臺*** | 國省代碼: | 中國臺灣;71 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 改良 化學(xué)限定培養(yǎng)基 疫苗 無血清培養(yǎng)基 細(xì)胞系生長 懸浮細(xì)胞系 狗腎細(xì)胞 化學(xué)限定 懸浮培養(yǎng) 血清 狗腎 生產(chǎn) 生長 | ||
1.包含改良的馬丁達(dá)比狗腎(MDCK)細(xì)胞和生長培養(yǎng)基的組合物,所述生長培養(yǎng)基包含化學(xué)限定的且無動物成分的培養(yǎng)基,其中,所述改良的MDCK細(xì)胞處于懸浮培養(yǎng)物中無需微載體。
2.如權(quán)利要求1所述的組合物,其中,所述改良的MDCK細(xì)胞具有約30小時至約35小時的平均倍增時間。
3.如權(quán)利要求1或2所述的組合物,其中,所述改良的MDCK細(xì)胞適于生產(chǎn)疫苗用病毒。
4.如權(quán)利要求3所述的組合物,其中,所述病毒維持抗原性。
5.如權(quán)利要求3或4所述的組合物,其中,所述病毒是流感病毒。
6.如上述權(quán)利要求中任一項所述的組合物,其中,所述改良的MDCK細(xì)胞在培養(yǎng)過程中無需更換培養(yǎng)基。
7.如權(quán)利要求1或2所述的組合物,其中,所述改良的MDCK細(xì)胞是保藏在Leibniz-Institut DSMZ-Deutsche Sammlung von Mikro-organismen und Zell kulturen GmbH的保藏號為---的細(xì)胞。
8.在無需微載體的條件下以懸浮形式培養(yǎng)改良的馬丁達(dá)比狗腎(MDCK)細(xì)胞的方法,所述方法包括:使所述改良的MDCK細(xì)胞與化學(xué)限定的且無動物成分的生長培養(yǎng)基接觸,其中,所述改良的MDCK細(xì)胞能夠以懸浮培養(yǎng)物的形式在無需微載體的條件下生長,并且所述改良的MDCK細(xì)胞能夠在5%CO2條件下生長。
9.如權(quán)利要求8所述的方法,其中,所述改良的MDCK細(xì)胞具有約30小時至約35小時的平均倍增時間。
10.如權(quán)利要求8或9所述的方法,其中,所述改良的MDCK細(xì)胞適于生產(chǎn)人疫苗用病毒。
11.如權(quán)利要求10所述的方法,其中,所述病毒維持抗原性。
12.如權(quán)利要求10或11所述的方法,其中,所述病毒是流感病毒。
13.如權(quán)利要求8-12中任一項所述的方法,其中,所述改良的MDCK細(xì)胞在培養(yǎng)過程中無需更換培養(yǎng)基。
14.用于在改良的馬丁達(dá)比狗腎(MDCK)細(xì)胞中生產(chǎn)疫苗生產(chǎn)用病毒的方法,所述改良的MDCK細(xì)胞能夠在無需微載體的條件下以懸浮形式培養(yǎng),所述方法包括使所述改良的MDCK細(xì)胞與化學(xué)限定的且無動物成分的生長培養(yǎng)基接觸,采用病毒感染細(xì)胞以及收獲所述病毒。
15.如權(quán)利要求14所述的方法,其中,不向所述培養(yǎng)基中加入額外的葡萄糖。
16.如權(quán)利要求14或15所述的方法,其中,所述改良的MDCK細(xì)胞是保藏在Leibniz-Institut DSMZ-Deutsche Sammlung von Mikro-organismen und Zellkulturen GmbH的保藏號為---的細(xì)胞。
17.生產(chǎn)馬丁達(dá)比狗腎(MDCK)細(xì)胞的方法,所述MDCK細(xì)胞能夠在無需微載體的條件下在化學(xué)限定無血清培養(yǎng)基中以懸浮形式培養(yǎng),所述方法包括:
a)提供貼壁MDCK細(xì)胞;
b)在含有血清的生長培養(yǎng)基中、在攪動的生物反應(yīng)器中并在不存在微載體的條件下培養(yǎng)所述貼壁MDCK細(xì)胞持續(xù)一段足以使MDCK細(xì)胞適應(yīng)懸浮培養(yǎng)的時間段;
c)在化學(xué)限定無血清培養(yǎng)基中以懸浮培養(yǎng)物的形式培養(yǎng)懸浮-適應(yīng)的MDCK細(xì)胞,從而提供能夠在無需微載體的條件下在化學(xué)限定無血清培養(yǎng)基中以懸浮形式培養(yǎng)的MDCK細(xì)胞。
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