[發(fā)明專利]具有提高的脂質(zhì)生產(chǎn)率的藻類突變體

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201680070512.2
• 申請日: 2016-11-02
• 公開（公告）號: CN108368491B
• 公開（公告）日: 2022-12-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: I·阿加維;L·索里亞戈;M·阿奎;E·R·默里林
• 申請（專利權(quán)）人: 合成基因組股份有限公司
• 主分類號: C12N1/13
• 分類號: C12N1/13;C12N9/10;C12N9/22;C07K14/405;C12N15/82;C12P7/6463;C12R1/89
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 王永偉;趙蓉民

1.一種具有基因敲除的突變加的斯微擬球藻，所述基因編碼包含TAZ鋅指結(jié)構(gòu)域和布羅莫結(jié)構(gòu)域的多肽，其中當(dāng)所述突變加的斯微擬球藻和對照加的斯微擬球藻在所述對照加的斯微擬球藻積聚生物質(zhì)的相同的條件下培養(yǎng)時，所述突變加的斯微擬球藻產(chǎn)生比對照加的斯微擬球藻多至少20％的脂質(zhì)并且產(chǎn)生所述對照加的斯微擬球藻積聚的生物質(zhì)的量的至少45％的量的生物質(zhì)，所述脂質(zhì)通過FAME分析確定，其中所述多肽具有選自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、或SEQ ID NO:8的氨基酸序列。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的突變加的斯微擬球藻，其中所述對照加的斯微擬球藻是野生型加的斯微擬球藻。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的突變加的斯微擬球藻，其中當(dāng)所述突變加的斯微擬球藻和對照加的斯微擬球藻在所述對照加的斯微擬球藻積聚生物質(zhì)的相同的條件下培養(yǎng)時，所述突變加的斯微擬球藻產(chǎn)生比所述對照加的斯微擬球藻多至少30％的脂質(zhì)并且產(chǎn)生所述對照加的斯微擬球藻積聚的生物質(zhì)的量的至少80％的量的生物質(zhì)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的突變加的斯微擬球藻，其中培養(yǎng)基就所述對照加的斯微擬球藻而言是營養(yǎng)素充足的。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的突變加的斯微擬球藻，其中所述培養(yǎng)基包含少于2mM的銨。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的突變加的斯微擬球藻，其中所述培養(yǎng)基包含硝酸鹽。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的突變加的斯微擬球藻，其中所述培養(yǎng)基中硝酸鹽的濃度為至少2mM。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的突變加的斯微擬球藻，其中所述突變加的斯微擬球藻具有編碼包含TAZ鋅指結(jié)構(gòu)域和布羅莫結(jié)構(gòu)域的多肽的基因中的敲除突變。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的突變加的斯微擬球藻，其中所述突變加的斯微擬球藻包含編碼包含TAZ鋅指結(jié)構(gòu)域和布羅莫結(jié)構(gòu)域的多肽的基因中的插入突變。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的突變加的斯微擬球藻，其中所述突變加的斯微擬球藻包含所述基因的5’或3’末端的Cas/CRISPR介導(dǎo)的插入。

11.一種產(chǎn)生FAME脂質(zhì)的方法，其包括在包含氮源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)根據(jù)權(quán)利要求1所述的突變加的斯微擬球藻以產(chǎn)生FAME脂質(zhì)。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其還包括從所述培養(yǎng)物分離所述脂質(zhì)。

13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述培養(yǎng)在光合自養(yǎng)條件下進(jìn)行。