[發(fā)明專利]胃泌酸調(diào)節(jié)素類似物及其制備和使用方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201680070111.7
• 申請(qǐng)日: 2016-10-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108602894A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-09-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 慶·林;阿維納什·穆皮迪;偉軍·沈;華飛·鄒;彼得·舒爾茨;玉林·田
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 紐約州立大學(xué)研究基金會(huì);加州生物醫(yī)學(xué)研究所
• 主分類號(hào): C07K19/00
• 分類號(hào): C07K19/00;C12Q1/6883;A61K38/26;A61P3/10
• 代理公司: 北京清亦華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11201
• 代理人: 宋融冰

提供了胃泌酸調(diào)節(jié)素類似物。該肽類似物具有至少兩個(gè)半胱氨酸。這兩個(gè)半胱氨酸被六個(gè)氨基酸隔開(kāi)，使得可以采用合適的交聯(lián)部分將這兩個(gè)半胱氨酸交聯(lián)。交聯(lián)肽具有較長(zhǎng)的半衰期和/或功效。例如，將肽類似物組合物用于誘導(dǎo)體重減輕和/或降低血糖水平。

相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用

本申請(qǐng)要求于2015年10月30日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)第62/248,866號(hào)的優(yōu)先權(quán)，通過(guò)引用將其內(nèi)容合并于此。

關(guān)于聯(lián)邦資助研究的聲明

本發(fā)明是根據(jù)由國(guó)立衛(wèi)生研究院授予的合同第GM085092號(hào)在政府支持下進(jìn)行的。政府對(duì)本發(fā)明享有一定權(quán)利。

技術(shù)領(lǐng)域

本公開(kāi)大體上涉及胃泌酸調(diào)節(jié)素類似物。更具體地，本公開(kāi)涉及交聯(lián)的胃泌酸調(diào)節(jié)素類似物及其用途。

背景技術(shù)

肥胖是發(fā)展為2型糖尿病(T2DM)的主要危險(xiǎn)因素。胃泌酸調(diào)節(jié)素(OXM)是由胰高血糖素原衍生而來(lái)的37-氨基酸肽激素，由于其對(duì)葡萄糖體內(nèi)平衡、食物攝取和能量消耗多方面的影響，該胃泌酸調(diào)節(jié)素對(duì)于治療T2DM是一種有吸引力的潛在療法。值得注意的是，發(fā)現(xiàn)在將OXM輸注至臨床前模型中后，其在體重減輕和葡萄糖降低效果方面優(yōu)于胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)受體單激動(dòng)劑的效果。然而，OXM的臨床應(yīng)用因其短暫的循環(huán)半衰期而受限制；因此，已經(jīng)探索了PEG和脂質(zhì)修飾的OXM類似物。盡管這些綴合物顯示出循環(huán)半衰期顯著更長(zhǎng)，但是它們通常表現(xiàn)出效力顯著降低；結(jié)果是，在其給藥期間注射了相對(duì)大量的經(jīng)過(guò)修飾的肽。這些大劑量限制了對(duì)替代性遞送技術(shù)(如微針或納米顆粒)的探索。

發(fā)明內(nèi)容

本公開(kāi)提供了OXM類似物，其表現(xiàn)出血漿穩(wěn)定性升高和對(duì)GLP-1R和GCGR兩者的激活效力更高(參見(jiàn)表1和2)。OXM類似物包括但不限于交聯(lián)的類似物。

例如，OXM類似物是具有以下序列的交聯(lián)肽：

HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNRNNIA(SEQ ID NO：1)，或其與SEQ ID NO：1具有至少65％同源性的變體。SEQ ID NO：1的第i位的第一氨基酸和第i+7位的第二氨基酸獨(dú)立地被L-半胱氨酸或D-半胱氨酸替換。位置i可以處于從且包括第7位到第30位之間的任何位置。類似物是在處于i和i+7位的半胱氨酸之間使用交聯(lián)部分進(jìn)行交聯(lián)的。交聯(lián)部分選自由以下各項(xiàng)組成的組：

取代基R在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、聚乙二醇(PEG)基團(tuán)、脂質(zhì)基團(tuán)、或脂肪二酸基團(tuán)，該脂肪二酸基團(tuán)可以通過(guò)間隔基部分(例如，柔性間隔基部分，如PEG間隔基部分)與交聯(lián)部分隔開(kāi)。

交聯(lián)的OXM類似物與野生型OXM相比，具有延長(zhǎng)的半衰期和/或表現(xiàn)出優(yōu)異的抗高血糖活性。

本公開(kāi)還提供了通過(guò)向受試者給予一種或多種本公開(kāi)的交聯(lián)OXM類似物來(lái)治療糖尿病(包括2型糖尿病)的方法。本公開(kāi)還提供了通過(guò)向受試者施用一種或多種交聯(lián)的OXM類似物來(lái)降低受試者血糖水平的方法。本公開(kāi)還提供了通過(guò)向受試者施用一種或多種交聯(lián)的OXM類似物來(lái)誘導(dǎo)受試者體重減輕的方法。

附圖說(shuō)明

為了更全面地理解本公開(kāi)的性質(zhì)和目的，應(yīng)結(jié)合附圖進(jìn)行以下詳細(xì)的描述。

圖1示出了(a)胃泌酸調(diào)節(jié)素、胰高血糖素、GLP-1和毒蜥外泌肽-4的序列。下劃線標(biāo)出了對(duì)受體激活重要的保守N-末端殘基。確定了胃泌酸調(diào)節(jié)素上半胱氨酸取代和隨后交聯(lián)的位點(diǎn)。(b)結(jié)合至GLP-1R胞外域的胃泌酸調(diào)節(jié)素的結(jié)構(gòu)模型(PDB代碼3C59)，交聯(lián)位點(diǎn)是著色的。胃泌酸調(diào)節(jié)素結(jié)構(gòu)模仿胰高血糖素的晶體結(jié)構(gòu)(PDB代碼：1GCN)，其具有顯示為點(diǎn)狀I(lǐng)I型β-螺旋轉(zhuǎn)角的八肽延伸部分。