[發(fā)明專利]DNA聚合酶變體

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201680069042.8
• 申請日: 2016-11-24
• 公開（公告）號: CN108350087A
• 公開（公告）日: 2018-07-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 石野良純;石野園子;山上健;上森隆司;高津成彰
• 申請（專利權(quán)）人: 國立大學(xué)法人九州大學(xué);寶生物工程株式會社
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C07K14/37;C07K14/415;C07K14/435;C12N9/10;C12N15/09
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 張桂霞;楊戩

1. 融合多肽，其在從N末端側(cè)到C末端側(cè)的方向包含：

a) 1個或多個與PCNA結(jié)合的肽；以及

b) 具有DNA聚合酶活性的多肽。

2.權(quán)利要求1所述的融合多肽，其特征在于：所述與PCNA結(jié)合的肽為包含PIP盒的肽。

3. 權(quán)利要求2所述的融合多肽，其特征在于：所述PIP盒是由序列表的SEQ ID NO: 52～91的任一個中所示的氨基酸序列構(gòu)成的肽。

4.權(quán)利要求1或2所述的融合多肽，其特征在于：所述與PCNA結(jié)合的肽是包含來自DNA聚合酶相關(guān)因子的PIP盒的肽。

5.權(quán)利要求1、2和4的任一項所述的融合多肽，其特征在于：所述與PCNA結(jié)合的肽是包含來自復(fù)制因子C大亞單元的PIP盒的肽。

6. 權(quán)利要求1、2、4和5的任一項所述的融合多肽，其特征在于：所述與PCNA結(jié)合的肽是序列表的SEQ ID NO: 3中所示的氨基酸序列、或者是包含上述氨基酸序列的肽。

7.權(quán)利要求1～6的任一項所述的融合多肽，其特征在于：所述融合多肽在與PCNA結(jié)合的肽和具有DNA聚合酶活性的多肽之間包含5～50個氨基酸的連接肽。

8.權(quán)利要求7所述的融合多肽，其特征在于：所述連接肽是由絲氨酸和甘氨酸構(gòu)成的氨基酸序列。

9. 權(quán)利要求1～8的任一項所述的融合多肽，其特征在于：所述具有DNA聚合酶活性的多肽是Pol I型DNA聚合酶或其片段。

10. 權(quán)利要求1～9的任一項所述的融合多肽，其特征在于：所述具有DNA聚合酶活性的多肽是Taq DNA聚合酶或其片段。

11.核酸，其編碼權(quán)利要求1～10的任一項所述的融合多肽。

12.核酸擴(kuò)增用組合物，其包含權(quán)利要求1～10的任一項所述的融合多肽。

13.權(quán)利要求12所述的核酸擴(kuò)增用組合物，其進(jìn)一步含有PCNA。

14.試劑盒，其包含權(quán)利要求1～10的任一項所述的融合多肽。

15.權(quán)利要求14所述的試劑盒，其進(jìn)一步包含PCNA。

16.與模板DNA互補的DNA的制造方法，其特征在于：使用包含權(quán)利要求1～10的任一項所述的融合多肽和PCNA的組合物。