[發明專利]用于穩定細胞外核酸的已滅菌組合物的制備方法

有效

• 申請號: 201680067712.2
• 申請日: 2016-11-21
• 公開（公告）號: CN108291250B
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 丹尼爾·格勒爾茲;安德烈埃·由立烏斯
• 申請（專利權）人: 凱杰有限公司
• 主分類號: C12Q1/6806
• 分類號: C12Q1/6806;C12N15/10
• 代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司 11219
• 代理人: 金海霞;楊青

1.一種制造適用于穩定生物樣品的細胞外核酸群體的已滅菌組合物的方法，所述方法包括：

a)提供一種組合物，其包含：

i.至少一種半胱天冬酶抑制劑，和

ii.至少一種選自硫醇、水溶性維生素、和水溶性維生素E衍生物的化合物，所述硫醇是N-乙酰半胱氨酸或谷胱甘肽，其中所述水溶性維生素是抗壞血酸或維生素B6，并且其中所述水溶性維生素E衍生物是trolox；以及

b)輻照所述組合物進行滅菌。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述輻照是電離輻照。

3.根據權利要求2所述的方法，其中所述電離輻照選自γ輻照、電子束輻照或X射線。

4.根據權利要求1所述的方法，其中以5kGy至35kGy、6kGy至30kGy、7kGy至26kGy、約8kGy至約25kGy、或約8kGy至約15kGy的輻照劑量來輻照所述組合物，其中表述“約”旨在表示給定值±10％。

5.根據權利要求1所述的方法，其中以5kGy至35kGy、6kGy至30kGy、7kGy至26kGy、約8kGy至約25kGy、或約8kGy至約15kGy的輻照劑量通過γ輻照來輻照所述組合物，其中表述“約”旨在表示給定值±10％。

6.根據權利要求1所述的方法，其中輻照滅菌導致所述組合物的無菌性保證水平(SAL)為10^-6或更低。

7.根據權利要求1所述的方法，其中所述組合物以固體形式制備或以液體形式制備。

8.根據權利要求1所述的方法，其中所述組合物以固體形式制備并在輻照前溶解以提供液體組合物。

9.根據權利要求1所述的方法，其中所述組合物以液體形式輻照。

10.根據權利要求1所述的方法，其中所述組合物以含水液體形式輻照。

11.根據權利要求1所述的方法，其中所述組合物具有酸性pH。

12.根據權利要求1所述的方法，其中所述組合物具有pH 4.0至7.0、pH 4.1至6.9、pH4.2至6.8、pH 4.3至6.6、pH 4.4至6.3、pH 4.5至6.0、或pH 4.5至5.5。

13.根據權利要求1所述的方法，其中所述組合物是經緩沖的。

14.根據權利要求1至13中的任一項所述的方法，其中所述組合物包含濃度小于20mg/ml、15mg/ml或更低、10mg/ml或更低、7mg/ml或更低、3mg/ml或更低、或1.5mg/ml或更低的所述至少一種選自N-乙酰半胱氨酸、谷胱甘肽、抗壞血酸、維生素B6和trolox的化合物。

15.根據權利要求1至13中的任一項所述的方法，其中所述組合物包含N-乙酰半胱氨酸，其中N-乙酰半胱氨酸的濃度為0.05mg/ml至15mg/ml、0.1mg/ml至10mg/ml、0.1mg/ml至7.5mg/ml、0.1mg/ml至5mg/ml、0.1mg/ml至2mg/ml、0.2mg/ml至1mg/ml、或0.3mg/ml至0.8mg/ml。

16.根據權利要求1至13中的任一項所述的方法，其中所述組合物包含谷胱甘肽，其中谷胱甘肽的濃度為0.03mg/ml至10mg/ml、0.075mg/ml至5mg/ml、0.15mg/ml至4mg/ml、或0.4mg/ml至1.3mg/ml。

17.根據權利要求16所述的方法 ，其中所述谷胱甘肽是還原形式的谷胱甘肽。