[發明專利]通過密度梯度進行流體分離的裝置和方法

在審

• 申請號: 201680065865.3
• 申請日: 2016-09-15
• 公開（公告）號: CN108367288A
• 公開（公告）日: 2018-08-03
• 發明（設計）人: M·G·阿達姆斯基;P·谷曼
• 申請（專利權）人: 斯帕克技術股份公司
• 主分類號: B01L3/00
• 分類號: B01L3/00
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 茅翊忞

一種用于離心容器、具體為管的裝置，該裝置用于分離具有所需密度范圍的液體餾分，具體為發明應用于形成懸浮液的生物流體和/或液體，其特征在于，所述裝置具有分隔件(7)，該分隔件(7)將容器(1)的內部分隔成豎直布置的至少兩個室——上室(2)和下室(3)，并且具有分隔件(7)的裝置具有可與引導件(12)對齊的孔(4)，在其上的液體、具體為流體樣本可以從離心容器(1)的上室(3)向下流至下室(4)。本發明還包括用于通過使用根據本發明的裝置從包含不同密度的餾分的樣本中分離出具有所需密度范圍的餾分的方法。

技術領域

本發明涉及一種裝置、具有該裝置的容器以及借助密度梯度離心分離進行流體分離的方法。同時，本發明涉及一種執行該方法的套件。具體地，本發明用于分離諸如動物血液、人體血液的體液，以進行類似臨床診斷或研究的進一步分析。本發明涉及實驗室用的容器領域，具體地涉及專用離心管/容器。本發明的另一用途涉及與通過確定其化學、物理或生物特性進行的材料測試或分析，具體為液體生物材料、例如血液的分析相關聯的的領域。

背景技術

包括血液的流體樣本的采集、凈化、分離成各種餾分和/或保存在醫學診斷以及臨床試驗中都起著重要作用。在用于大規模采集血液樣本的常規系統和方法的情況下，從患者獲得的血液樣本可以通過離心、過濾或淘析分離成不同的餾分，并存儲以備后用或進一步測試。分離的血液成分通常包括紅細胞、白細胞、血小板和血漿的餾分。血液分離成其餾分可以在血液采集期間連續進行，或者在血液采集后分階段進行。對于許多治療應用和臨床試驗用途而言，至關重要的是血液分離成其各種餾分在高度無菌條件下進行。

存在很多血液分離成其各種餾分的方法。現有技術的方法對于其正確操作來說，要求使用高質量的專業醫療設備以及訓練有素的人員。

從國際專利申請WO8805331已知一種將紅細胞(紅血球)與白細胞(白血球)分離的技術。它涉及將血液樣本與工作溶液混合，工作溶液接著使紅細胞聚集，結果凝集的紅細胞的沉降速度增加。分離流體的密度調節成使得白細胞的沉降過程僅稍微改變。這可以防止白細胞沉淀在容器底部，在分離之后，白細胞可以從分離的血液樣本的上部收集，同時紅細胞沉淀到容器底部。

還有另一種技術，其中紅細胞聚集的工作溶液不與血液混合，血液樣本被小心地分層到工作分離流體的表面上。結果，紅細胞開始凝集或聚集在血液和分離液之間的界面表面上并沉降到管的底部。有幾種眾所周知的引起紅細胞凝集的基于聚合物的化合物，例如FICOLL 400(瑞典Pharmacia精細化學公司)。血液的分離可以在重力的影響下或在離心的影響下進行。作為分離的效果，大部分白血細胞保留在液體界面處。然而，這種方法不能將白細胞分離成亞群，例如，分離成外周血單核細胞(PBMC)和多形核細胞(PMN)。最需要的方法將包括一步式過程，其中分離介質具有允許同時將白血細胞分離成亞群的密度。

為了分離白細胞亞群，已知的用于離析單核白血細胞(PBMC)的方法之一采用密度梯度離心分離。在該方法的第一步中，正在使用Isopaque-Ficoll(挪威Nyegaard&Co.公司)與作為主要成分的metrizoat的混合物。該方法的第二步使得能夠采用葡聚糖或明膠從血液中離析出PMN餾分，這導致紅細胞的沉淀增加。另一種方法使用不連續的密度梯度，其中兩種或兩種以上的工作流體被小心地分層在彼此之上。密度選擇成使得非連續梯度處于最佳要求范圍內——其根據分離物質的密度來選擇。

又一美國專利申請No.US4824560A公開了具有至少兩個相鄰室的管狀容器的旋轉方法和裝置，所述室通過狹窄的毛細管狀開口相互連接。工作原理如下：工作流體放置在下室中，待分離成各餾分的流體施加在上室中。不需要任何特殊的預防措施來避免液體在離心分離前混合。與上述手動方法相比，該方法具有幾個優點。它也具有缺點，因為即使在離心期間，兩個室之間的狹窄開口也阻止血細胞在兩個室之間的有效通過，結果血液分離的效率降低。