[發明專利]止血材料

有效

• 申請號: 201680063288.4
• 申請日: 2016-09-01
• 公開（公告）號: CN108495658B
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發明（設計）人: 秦曉華;保羅·斯萊扎克;海因茨·雷德爾
• 申請（專利權）人: 巴克斯特國際公司
• 主分類號: A61L24/00
• 分類號: A61L24/00;A61L24/10
• 代理公司: 上海華誠知識產權代理有限公司 31300
• 代理人: 湯國華

公開了一種止血材料，其中凝血酶受體活化劑被共價結合至生物相容性基質。

技術領域

本發明涉及止血材料以及生產和使用該材料的方法。

背景技術

不受控制的出血仍然是創傷和手術損傷中死亡的主要原因^[1]。因此，開發有效的治療方法來控制出血具有最重要的臨床和社會價值。在過去的幾十年中，已經開發了許多止血產品^[2]，包括基于纖維蛋白的膠或密封劑^[3a,b]，沸石散劑^[4a,b]，交聯明膠基質^[5a,b]等。但是，這些產品中的每一種都有其各自的局限性。纖維蛋白產品成本高、保質期短且機械強度低^[6]。沸石礦物容易引起嚴重的灼傷并且不可被降解^[6]。只有當與高劑量的凝血酶結合時，交聯明膠基質才能在幾分鐘內止血^[7]。然而，由于自體蛋白水解，凝血酶在溶液中不穩定。已知高濃度的凝血酶會誘導人體角質細胞的凋亡并能導致傷口愈合障礙^[8]。因此，存在設計具有改善的安全性的替代止血材料的強烈需要。特別地，設計避免使用高濃度凝血酶的有效策略是一種理想的解決方案。

凝血酶是一種絲氨酸蛋白酶，它在血液凝結(凝固)中發揮重要的作用^[9a,b]。作為關鍵凝固蛋白酶，凝血酶將可溶性纖維蛋白原轉化成由轉谷氨酰胺酶(FXIII)交聯的纖維蛋白網絡^[10]。另外，凝血酶通過刺激蛋白酶活化受體(PAR)成為最有效的血小板活化劑^[11,^12]。在被凝血酶活化后，血小板在物理上改變GP IIb/IIIa受體的構象并為纖維蛋白原提供高親和力的結合位點，從而提供纖維蛋白原交聯的血小板聚集。PAR-1和PAR-4均存在于人血小板上，但凝血酶活化人血小板主要由PAR-1介導^[13]。圖7A描述了凝血酶活化PAR-1的分子機制。PAR-1在血小板中高度表達^[14a,b]，并且通過凝血酶蛋白水解切割PAR-1受體的細胞外N末端結構域的一部分而啟動PAR-1的活化。蛋白水解產生新的N端配體結構域(SFLLRN(SEQ ID NO：1)，又稱凝血酶受體激動劑肽-6：TRAP6)，其與胞外環2內的受體相互作用并觸發PAR-1活化的信號通路。已經證明短TRAP6肽(SFLLRN)可以單獨作為有效的血小板活化劑，并通過PAR-1信號傳導刺激血小板的聚集^[15]。TRAP試驗已成為全血或富含血小板血漿中的標準體外測定法，用于定量測定由TRAP6引發的血小板功能。TRAP試驗允許分析通過PAR-1信號傳導活化的血小板功能而不引發纖維蛋白的形成，反之，當凝血酶作激動劑時則會引發纖維蛋白的形成，這是由于樣品中使用了凝血酶抑制劑。

WO 96/40033 A1公開了具有止血劑的止血材料，包括ε-氨基己酸和凝血酶受體活化肽，其中將止血劑噴霧或涂布在止血基質上以獲得這樣的基質：藥劑物理(而非共價)地吸附在基質上。這種貼劑具有這樣的缺點：其提供的止血劑在接觸到患者的出血區域時容易從貼劑釋放。這樣就存在導致全身性血栓形成事件的潛在危險，特別是考慮到循環中沒有循環拮抗劑。

WO 03/057072 A2公開了止血組合物，其包含纖維素和與其共價連接的多糖。

發明內容

本發明的目的是：提供用于控制出血的具有凝血酶受體活化劑的改進的止血材料。

因此，本發明提供一種止血材料，其中凝血酶受體活化劑與生物相容性基質共價結合。

利用本發明首次顯示凝血酶受體活化劑可以共價固定在生物相容性基質上，從而獲得適合施用于需要其的人類患者的改進的止血材料。作為優選的實施方案，TRAP6、TRAP7或TRAP8與合成的水凝膠基質(例如，基于聚乙烯醇的聚合物)的共價結合產生合適的止血材料，在相當長的一段時間內以安全、局部的方式維持血小板活化的活性，從而能夠改善止血，特別是通過誘導的血小板聚集。