[發明專利]胰內分泌細胞的制造方法和轉分化劑

有效

• 申請號: 201680062837.6
• 申請日: 2016-10-28
• 公開（公告）號: CN108431212B
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發明（設計）人: 松本征仁;岡崎康司;菅原泉
• 申請（專利權）人: 學校法人順天堂
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C07K14/435;C12N5/071;C12N15/09
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 宋融冰

本發明提供一種胰內分泌細胞的制造方法，該方法包括將下述(A)～(D)中的任一種基因或其基因產物導入體細胞內的導入工序：(A)與序列號:1和序列號:2中的任一個所表示的堿基序列具有85％以上的序列同源性的突變GLIS1基因或其基因產物、神經原素3基因或其基因產物、Pdx1基因或其基因產物和MafA基因或其基因產物；(B)與序列號:1和序列號:2中的任一個所表示的堿基序列具有85％以上的序列同源性的突變GLIS1基因或其基因產物、神經原素3基因或其基因產物和Pdx1基因或其基因產物；(C)GLIS1基因或其基因產物、神經原素3基因或其基因產物、Pdx1基因或其基因產物和MafA基因或其基因產物；以及(D)與序列號:1和序列號:2中的任一個所表示的堿基序列具有85％以上的序列同源性的突變GLIS1基因或其基因產物、神經原素3基因或其基因產物和MafA基因或其基因產物。

技術領域

本發明涉及一種由體細胞制造胰內分泌細胞的胰內分泌細胞的制造方法、以及將體細胞轉分化成胰內分泌細胞的轉分化劑。

背景技術

胰內分泌細胞被期待用作糖尿病的再生醫療材料、以及用于篩選糖尿病治療藥的材料等。從上述再生醫療的角度考慮，例如，期待著對胰島素不足的I型糖尿病患者給予作為胰內分泌細胞之一的、產生胰島素的β細胞。

因此，強烈要求開發一種在體外大量制備胰內分泌細胞的方法。

迄今為止，有人提出了利用胚胎干細胞(embryonic stem cell、以下有時稱作“ES細胞”)或人工多能性干細胞(induced pluripotent stem cell、以下有時稱作“iPS細胞”)來制造β細胞的方法。然而，在上述方法中，需要在細胞培養用的培養基中加入各種參與成長分化的抑制劑等以調整培養環境，存在著繁瑣的問題，另外，還存在著有時無法獲得重現性的問題。另外，在上述方法中，由于還制造了β細胞以外的細胞，因此還存在著效率方面的問題。而且，到獲得β細胞為止最少需要21天～30天，還存在著無法在短期內制造β細胞的問題。

因此，現狀是強烈要求及時提供一種胰內分泌細胞的制造方法，所述制造方法簡便且容易重現、生產效率優異、并且能夠在短期內制造胰內分泌細胞。

此外，已知GLIS1(GLIS family zinc finger1)會改善iPS細胞的建立改善效率(例如參照專利文獻1)。

然而，GLIS1參與將體細胞直接轉變成胰內分泌細胞而不經過干細胞一事還完全未知。

現有技術文獻

專利文獻

專利文獻1：日本特表2013－519371號公報

發明內容

技術問題

本發明的課題在于：解決上述現有的諸多問題，達到以下目的。即，本發明的目的在于提供：一種胰內分泌細胞的制造方法，所述制造方法簡便且容易重現、生產效率優異、并且能夠在短期內制造胰內分泌細胞；以及將體細胞轉分化成胰內分泌細胞的轉分化劑。

解決問題的方案

用于解決上述課題的方法如下。即：

＜1＞一種胰內分泌細胞的制造方法，其特征在于，包括下述的導入工序：將下述(A)～(D)中的任一種基因或其基因產物導入體細胞內。

(A)與序列號:1和序列號:2中的任一個所表示的堿基序列具有85％以上的序列同源性的突變GLIS1基因或其基因產物、神經原素(Neurogenin)3基因或其基因產物、Pdx1基因或其基因產物和MafA基因或其基因產物。

(B)與序列號:1和序列號:2中的任一個所表示的堿基序列具有85％以上的序列同源性的突變GLIS1基因或其基因產物、神經原素3基因或其基因產物和Pdx1基因或其基因產物。