[發(fā)明專利]胰內(nèi)分泌細(xì)胞的制造方法和轉(zhuǎn)分化劑

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201680062837.6
• 申請(qǐng)日: 2016-10-28
• 公開（公告）號(hào): CN108431212B
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 松本征仁;岡崎康司;菅原泉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 學(xué)校法人順天堂
• 主分類號(hào): C12N5/10
• 分類號(hào): C12N5/10;C07K14/435;C12N5/071;C12N15/09
• 代理公司: 北京清亦華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11201
• 代理人: 宋融冰

本發(fā)明提供一種胰內(nèi)分泌細(xì)胞的制造方法，該方法包括將下述(A)～(D)中的任一種基因或其基因產(chǎn)物導(dǎo)入體細(xì)胞內(nèi)的導(dǎo)入工序：(A)與序列號(hào):1和序列號(hào):2中的任一個(gè)所表示的堿基序列具有85％以上的序列同源性的突變GLIS1基因或其基因產(chǎn)物、神經(jīng)原素3基因或其基因產(chǎn)物、Pdx1基因或其基因產(chǎn)物和MafA基因或其基因產(chǎn)物；(B)與序列號(hào):1和序列號(hào):2中的任一個(gè)所表示的堿基序列具有85％以上的序列同源性的突變GLIS1基因或其基因產(chǎn)物、神經(jīng)原素3基因或其基因產(chǎn)物和Pdx1基因或其基因產(chǎn)物；(C)GLIS1基因或其基因產(chǎn)物、神經(jīng)原素3基因或其基因產(chǎn)物、Pdx1基因或其基因產(chǎn)物和MafA基因或其基因產(chǎn)物；以及(D)與序列號(hào):1和序列號(hào):2中的任一個(gè)所表示的堿基序列具有85％以上的序列同源性的突變GLIS1基因或其基因產(chǎn)物、神經(jīng)原素3基因或其基因產(chǎn)物和MafA基因或其基因產(chǎn)物。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種由體細(xì)胞制造胰內(nèi)分泌細(xì)胞的胰內(nèi)分泌細(xì)胞的制造方法、以及將體細(xì)胞轉(zhuǎn)分化成胰內(nèi)分泌細(xì)胞的轉(zhuǎn)分化劑。

背景技術(shù)

胰內(nèi)分泌細(xì)胞被期待用作糖尿病的再生醫(yī)療材料、以及用于篩選糖尿病治療藥的材料等。從上述再生醫(yī)療的角度考慮，例如，期待著對(duì)胰島素不足的I型糖尿病患者給予作為胰內(nèi)分泌細(xì)胞之一的、產(chǎn)生胰島素的β細(xì)胞。

因此，強(qiáng)烈要求開發(fā)一種在體外大量制備胰內(nèi)分泌細(xì)胞的方法。

迄今為止，有人提出了利用胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cell、以下有時(shí)稱作“ES細(xì)胞”)或人工多能性干細(xì)胞(induced pluripotent stem cell、以下有時(shí)稱作“iPS細(xì)胞”)來(lái)制造β細(xì)胞的方法。然而，在上述方法中，需要在細(xì)胞培養(yǎng)用的培養(yǎng)基中加入各種參與成長(zhǎng)分化的抑制劑等以調(diào)整培養(yǎng)環(huán)境，存在著繁瑣的問(wèn)題，另外，還存在著有時(shí)無(wú)法獲得重現(xiàn)性的問(wèn)題。另外，在上述方法中，由于還制造了β細(xì)胞以外的細(xì)胞，因此還存在著效率方面的問(wèn)題。而且，到獲得β細(xì)胞為止最少需要21天～30天，還存在著無(wú)法在短期內(nèi)制造β細(xì)胞的問(wèn)題。

因此，現(xiàn)狀是強(qiáng)烈要求及時(shí)提供一種胰內(nèi)分泌細(xì)胞的制造方法，所述制造方法簡(jiǎn)便且容易重現(xiàn)、生產(chǎn)效率優(yōu)異、并且能夠在短期內(nèi)制造胰內(nèi)分泌細(xì)胞。

此外，已知GLIS1(GLIS family zinc finger1)會(huì)改善iPS細(xì)胞的建立改善效率(例如參照專利文獻(xiàn)1)。

然而，GLIS1參與將體細(xì)胞直接轉(zhuǎn)變成胰內(nèi)分泌細(xì)胞而不經(jīng)過(guò)干細(xì)胞一事還完全未知。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)1：日本特表2013－519371號(hào)公報(bào)

發(fā)明內(nèi)容

技術(shù)問(wèn)題

本發(fā)明的課題在于：解決上述現(xiàn)有的諸多問(wèn)題，達(dá)到以下目的。即，本發(fā)明的目的在于提供：一種胰內(nèi)分泌細(xì)胞的制造方法，所述制造方法簡(jiǎn)便且容易重現(xiàn)、生產(chǎn)效率優(yōu)異、并且能夠在短期內(nèi)制造胰內(nèi)分泌細(xì)胞；以及將體細(xì)胞轉(zhuǎn)分化成胰內(nèi)分泌細(xì)胞的轉(zhuǎn)分化劑。

解決問(wèn)題的方案

用于解決上述課題的方法如下。即：

＜1＞一種胰內(nèi)分泌細(xì)胞的制造方法，其特征在于，包括下述的導(dǎo)入工序：將下述(A)～(D)中的任一種基因或其基因產(chǎn)物導(dǎo)入體細(xì)胞內(nèi)。

(A)與序列號(hào):1和序列號(hào):2中的任一個(gè)所表示的堿基序列具有85％以上的序列同源性的突變GLIS1基因或其基因產(chǎn)物、神經(jīng)原素(Neurogenin)3基因或其基因產(chǎn)物、Pdx1基因或其基因產(chǎn)物和MafA基因或其基因產(chǎn)物。

(B)與序列號(hào):1和序列號(hào):2中的任一個(gè)所表示的堿基序列具有85％以上的序列同源性的突變GLIS1基因或其基因產(chǎn)物、神經(jīng)原素3基因或其基因產(chǎn)物和Pdx1基因或其基因產(chǎn)物。