[發明專利]用于數字計數的流動系統和方法

有效

• 申請號: 201680058071.4
• 申請日: 2016-10-07
• 公開（公告）號: CN108291910B
• 公開（公告）日: 2019-11-05
• 發明（設計）人: A·H·昆丁
• 申請（專利權）人: 塞爾瑪生物技術有限責任公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;B01L3/00
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 袁泉

1.用于數字計數樣品中一種或多種分析物類型的流動系統(10)，所述流動系統包含：在疏水性基底(16)中或在疏水性基底(16)上具有親水性特征(14)的圖案的支持體(12)，所述的疏水性基底(16)嵌入在包含至少一個開口(20)的流動分隔區(18)中，所述的親水性特征(14)支持多個液體納升-至-阿升液滴，其中每個所述的液滴都具有最大液滴體積，并且所述的流動分隔區(18)支持減少各個納升-至-阿升液滴的蒸發的氣相密封。

2.根據權利要求1所述的流動系統(10)，其中所述的流動分隔區(18)具有體積(V_C)，其中所述的體積(V_C)大于所有的液體納升-至-阿升液滴的聚集最大液滴體積(V_DA)并且小于通過以下等式計算的V_MAX：

其中ρ_L為所述的液體的體積密度，R為摩爾氣體常數，T為溫度，RHI為所述的液體的氣體成分的初始相對蒸氣飽和度，P₀為在相應的參照溫度T₀的所述液體的參照蒸氣壓力，M_W為所述的液體的摩爾重量，并且ΔH_VAP為所述的液體的蒸發焓。

3.根據權利要求1所述的流動系統(10)，其包含用于所述的一種或多種不同的分析物類型的至少一種捕獲探針(22)，所述捕獲探針(22)附著在所述的親水性特征(14)上。

4.根據權利要求1所述的流動系統(10)，其中所述的親水性特征(14)為具有半徑(R_D)的圓形，并且其中所述的最大液滴體積(V_D)為：

其中γ為在所述的疏水性基底上的液體接觸角。

5.根據權利要求1所述的流動系統(10)，其中所述的氣相密封的氣相是通過大氣提供的。

6.根據權利要求3所述的流動系統(10)，其中不同類型的捕獲探針(22)排列在區域(24)中，每個區域呈現特定類型的捕獲探針。

7.根據權利要求1所述的流動系統(10)，其中所述的流動分隔區是通道成型的，并且在所述的分隔區的相對末端的2個開口之間形成流動方向。

8.使用上述權利要求的任意一項所定義的流動系統用于數字計數至少一種或多種不同的分析物類型的方法。

9.用于數字計數樣品中的至少一種或多種不同的分析物類型的方法，所述的方法包括在氣相密封下計數在多個液體納升-至-阿升液滴中包含的所述的一種或多種分析物類型，其中所述的氣相密封在流動系統內建立能夠減少所述的液滴的蒸發的蒸汽壓力。

10.根據權利要求9所述的方法，其進一步包括以下步驟：

(i)將在疏水性基底中或在疏水性基底上的親水性特征的圖案與包含所述的一種或多種分析物類型的樣品接觸，

(ii)在所述的親水性特征上捕獲所述的一種或多種分析物類型，

(iii)使用對待檢測的分析物類型具有特異性的標記試劑標記所述的被捕獲的多種分析物類型，

(iv)使檢測試劑流動穿過所述的圖案并從所述的圖案收回，從而產生納升-至-阿升液滴形式的單個液滴，

(v)計數容納所述的標記和檢測試劑的液滴的數量。

11.根據權利要求10所述的方法，其包括一次或多次重復步驟(iii)、(iv)和(v)。

12.根據權利要求10所述的方法，其包括通過使用對待檢測的第二分析物類型具有特異性的第二標記試劑，不使用第一標記試劑，重復步驟(iii)、(iv)和(v)。