[發明專利]用微生物高水平生產長鏈二羧酸有效
| 申請號： | 201680055065.3 | 申請日： | 2016-07-20 |
| 公開（公告）號： | CN108138121B | 公開（公告）日： | 2022-04-19 |
| 發明（設計）人： | Q.Q.朱;X.范;S-P.洪;D.博吉奧考;D.謝;H.H.德哈曼卡 | 申請（專利權）人： | 納幕爾杜邦公司 |
| 主分類號： | C12N1/19 | 分類號： | C12N1/19;C12N9/00;C12P7/6409 |
| 代理公司： | 中國專利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 翟建偉;黃希貴 |
| 地址： | 美國特*** | 國省代碼： | 暫無信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 微生物 水平 生產 二羧酸 | ||
1.一種包含工程化的LCDA生產途徑的重組微生物細胞，所述LCDA生產途徑包括編碼由SEQ ID NO: 44或49的氨基酸序列所示的長鏈酰基輔酶A合成酶（ACoS酶）的多核苷酸序列的上調，
其中所述微生物細胞可以從含有長鏈脂肪酸的底物生產一種或多種長鏈二羧酸（LCDA）產物，
其中所述微生物細胞是耶氏酵母屬（
2.如權利要求1所述的重組微生物細胞，其中所述ACoS酶具有長鏈酰基輔酶A合成酶活性和香豆酰輔酶A合成酶活性兩者。
3.如權利要求1所述的重組微生物細胞，其中所述工程化的LCDA生產途徑進一步包括以下特征中的一種或多種：
(i) 編碼細胞色素P450單加氧酶（CYP酶）的多核苷酸序列的上調
(ii)編碼細胞色素P450還原酶（CPR酶）的多核苷酸序列的上調，
(iii)編碼脂肪醇氧化酶（FAO酶）的多核苷酸序列的上調，
(iv)編碼脂肪醇脫氫酶（FADH酶）的多核苷酸序列的上調，和/或
(v) 編碼脂肪醛脫氫酶（FALDH酶）的多核苷酸序列的上調。
4.如權利要求3所述的重組微生物細胞，其中編碼所述CYP酶的多核苷酸序列和編碼所述CPR酶的多核苷酸序列之一或兩者被上調。
5.如權利要求1所述的重組微生物細胞，其中所述微生物細胞進一步包括編碼過氧化物酶體生物合成因子的內源多核苷酸序列的下調。
6.如權利要求5所述的重組微生物細胞，其中所述過氧化物酶體生物合成因子是過氧化物酶體生物合成因子-3。
7.如權利要求1所述的重組微生物細胞，其中所述微生物細胞進一步包括編碼過氧化物酶體酰基輔酶A氧化酶的內源多核苷酸序列的下調。
8.如權利要求7所述的重組微生物細胞，其中所述過氧化物酶體酰基輔酶A氧化酶是過氧化物酶體酰基輔酶A氧化酶-2、-3和/或-4。
9.如權利要求1所述的重組微生物細胞，其中所述微生物細胞具有降低的脂質合成和/或儲存能力。
10.如權利要求9所述的重組微生物細胞，其中所述降低的脂質合成和儲存能力是由于至少一種編碼二酰基甘油酰基轉移酶（DGAT酶）的內源多核苷酸序列的下調。
11.如權利要求1所述的重組微生物細胞，其中：
所述LCDA產物具有10至24個碳原子的鏈長度，和/或
所述含有長鏈脂肪酸的底物包含游離的長鏈脂肪酸或酯化的長鏈脂肪酸。
12.一種生產長鏈二羧酸（LCDA）的方法，所述方法包括：
a)使權利要求1所述的重組微生物細胞與含有長鏈脂肪酸的底物接觸，其中所述微生物細胞從所述底物合成LCDA；并且
b)任選地回收步驟 (a) 的LCDA，其中所述微生物細胞是耶氏酵母屬細胞。
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