[發明專利]工程化植酸酶及其使用方法有效
| 申請號： | 201680054081.0 | 申請日： | 2016-09-16 |
| 公開（公告）號： | CN108026145B | 公開（公告）日： | 2022-06-10 |
| 發明（設計）人： | R·M·拉布;G·拉扎爾;B·沈 | 申請（專利權）人： | 谷萬達公司 |
| 主分類號： | C07K14/00 | 分類號： | C07K14/00;C07K4/06;C07K14/245;C07K14/38;C07K14/39;C12N15/62;C12N15/10;C12N15/04;C12N15/52;C12N15/80;C12N15/65;C12N9/16;A23K10/14 |
| 代理公司： | 北京潤平知識產權代理有限公司 11283 | 代理人： | 喬雪微;劉依云 |
| 地址： | 美國馬*** | 國省代碼： | 暫無信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 工程 化植酸酶 及其 使用方法 | ||
1.一種工程化植酸酶，包括目標植酸酶、第一結合元件、第二結合元件、第一連接子和第二連接子，其中，所述第一結合元件的C-末端與所述目標植酸酶的N-末端連接，所述第二結合元件的N-末端與所述目標植酸酶的C-末端連接，所述第一連接子與所述第一結合元件和所述目標植酸酶鄰接，并在它們之間；所述第二連接子與所述目標植酸酶和所述第二結合元件鄰接，并在它們之間；所述第一結合元件與所述第二結合元件相互作用以引起所述工程化植酸酶的環化，并且增強所述目標植酸酶的熱穩定性，并且其中，所述目標植酸酶是來源于大腸桿菌（
其中，在所述相互作用時，所述第一結合元件和所述第二結合元件中的每個都能夠自發地從所述工程化植酸酶釋放出來。
2.根據權利要求1所述的工程化植酸酶，其中，所述目標植酸酶的氨基酸序列為SEQ IDNO：53-54、56或219所示的氨基酸序列。
3.根據權利要求1所述的工程化植酸酶，其中，所述第一結合元件是內含肽的C-內含肽；
其中，所述C-內含肽的氨基酸序列為SEQ ID NO：189、191或195所示的氨基酸序列。
4.根據權利要求1所述的工程化植酸酶，其中，所述第二結合元件是內含肽的N-內含肽；
其中，所述N-內含肽的氨基酸序列為SEQ ID NO：187或193所示的氨基酸序列。
5.根據權利要求1所述的工程化植酸酶，其中，所述工程化植酸酶的氨基酸序列為SEQID NO：95、97、99或101所示的氨基酸序列。
6.根據權利要求1所述的工程化植酸酶，其中，所述植酸酶的活性在70℃至90℃范圍的溫度下是穩定的。
7.一種編碼權利要求1-6中任意一項所述的工程化植酸酶的工程化核酸。
8.一種編碼工程化植酸酶的工程化核酸，其中，所述工程化植酸酶包括目標植酸酶、第一結合元件、第二結合元件、第一連接子和第二連接子，其中，所述第一結合元件的C-末端與所述目標植酸酶的N-末端連接，所述第二結合元件的N-末端與所述目標植酸酶的C-末端連接，所述第一連接子與所述第一結合元件和所述目標植酸酶鄰接，并在它們之間；所述第二連接子與所述目標植酸酶和所述第二結合元件鄰接，并在它們之間；所述第一結合元件與所述第二結合元件相互作用以引起所述工程化植酸酶的環化，并且增強所述目標植酸酶的熱穩定性，
并且其中，所述目標植酸酶為來源于大腸桿菌（
編碼所述第一連接子的序列為SEQ ID NO：120、122、124或126所示的核苷酸序列時，相應的編碼所述第二連接子的序列依次為SEQ ID NO：121、123、125或127所示的核苷酸序列；
其中，在所述相互作用時，所述第一結合元件和所述第二結合元件中的每個都能夠自發地從所述工程化植酸酶釋放出來。
9.根據權利要求8所述的工程化核酸，其中，所述工程化核酸的核苷酸序列為編碼所述目標植酸酶的序列，為SEQ ID NO：52或218所示的核苷酸序列。
10.根據權利要求8所述的工程化核酸，其中，包括編碼所述第一結合元件的序列，其中，所述第一結合元件是內含肽的C-內含肽；
其中，編碼C-內含肽的序列為SEQ ID NO：188、190或194所示的核苷酸序列。
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