[發(fā)明專利]用于調(diào)節(jié)李斯特菌屬某些種中PRFA介導(dǎo)的毒力基因活化的方法和組合物在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201680052721.4 | 申請日: | 2016-09-01 |
| 公開(公告)號: | CN108138123A | 公開(公告)日: | 2018-06-08 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 丹尼爾·A·波特努瓦;喬納森·L·波特曼 | 申請(專利權(quán))人: | 加利福尼亞大學(xué)董事會 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;C12N1/21;C12N15/09;C12N15/52 |
| 代理公司: | 北京柏杉松知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11413 | 代理人: | 王春偉;劉繼富 |
| 地址: | 美國加利*** | 國省代碼: | 美國;US |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 表達(dá)構(gòu)建體 李斯特菌 介導(dǎo) 成分確定培養(yǎng)基 宿主細(xì)胞 毒力基因 還原劑 評估 活化 疫苗 | ||
1.一種評估PrfA介導(dǎo)的表達(dá)構(gòu)建體的表達(dá)的方法,所述方法包括:
將包含PrfA介導(dǎo)的表達(dá)構(gòu)建體的李斯特菌宿主細(xì)胞維持在含有PrfA活化量的還原劑的成分確定培養(yǎng)基中;和
評價來自所述表達(dá)構(gòu)建體的產(chǎn)物的表達(dá)以評估所述PrfA介導(dǎo)的表達(dá)構(gòu)建體的表達(dá)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中所述PrfA介導(dǎo)的表達(dá)構(gòu)建體是修飾的毒力因子表達(dá)構(gòu)建體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1至2中任一項所述的方法,其中所述修飾的毒力因子表達(dá)構(gòu)建體是ActA表達(dá)構(gòu)建體。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其中所述ActA表達(dá)構(gòu)建體包含ActA啟動子。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其中所述ActA表達(dá)構(gòu)建體編碼融合蛋白。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法,其中所述融合蛋白包含N-末端ActA結(jié)構(gòu)域。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法,其中所述PrfA介導(dǎo)的表達(dá)構(gòu)建體編碼異源抗原。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法,其中所述評估包括將觀察到的表達(dá)水平與閾值進(jìn)行比較。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法,其中所述李斯特菌宿主細(xì)胞是單核細(xì)胞增多性李斯特菌。
10.一種產(chǎn)生疫苗的方法,所述方法包括以足以產(chǎn)生疫苗的方式在包含PrfA活化量的還原劑的成分確定生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)包含編碼異源抗原的PrfA介導(dǎo)的表達(dá)構(gòu)建體的李斯特菌宿主細(xì)胞。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法,其中所述李斯特菌宿主細(xì)胞如權(quán)利要求1至10中任一項所述。
12.根據(jù)權(quán)利要求10至11中任一項所述的方法,其中所述方法還包括殺死所述李斯特菌宿主。
13.一種包含根據(jù)權(quán)利要求10至12中任一項所述的方法產(chǎn)生的李斯特菌屬細(xì)菌的疫苗。
14.一種引發(fā)或加強受試者體內(nèi)對抗原的細(xì)胞免疫應(yīng)答的方法,所述方法包括向所述受試者施用有效量的根據(jù)權(quán)利要求14所述的疫苗。
15.一種成分確定的細(xì)菌培養(yǎng)基,其包含PrfA活化量的還原劑。
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