[發(fā)明專利]用于調(diào)節(jié)李斯特菌屬某些種中PRFA介導(dǎo)的毒力基因活化的方法和組合物

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201680052721.4
• 申請日: 2016-09-01
• 公開（公告）號: CN108138123A
• 公開（公告）日: 2018-06-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 丹尼爾·A·波特努瓦;喬納森·L·波特曼
• 申請（專利權(quán)）人: 加利福尼亞大學(xué)董事會
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/21;C12N15/09;C12N15/52
• 代理公司: 北京柏杉松知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11413
• 代理人: 王春偉;劉繼富

1.一種評估PrfA介導(dǎo)的表達(dá)構(gòu)建體的表達(dá)的方法，所述方法包括：

將包含PrfA介導(dǎo)的表達(dá)構(gòu)建體的李斯特菌宿主細(xì)胞維持在含有PrfA活化量的還原劑的成分確定培養(yǎng)基中；和

評價來自所述表達(dá)構(gòu)建體的產(chǎn)物的表達(dá)以評估所述PrfA介導(dǎo)的表達(dá)構(gòu)建體的表達(dá)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述PrfA介導(dǎo)的表達(dá)構(gòu)建體是修飾的毒力因子表達(dá)構(gòu)建體。

3.根據(jù)權(quán)利要求1至2中任一項所述的方法，其中所述修飾的毒力因子表達(dá)構(gòu)建體是ActA表達(dá)構(gòu)建體。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述ActA表達(dá)構(gòu)建體包含ActA啟動子。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中所述ActA表達(dá)構(gòu)建體編碼融合蛋白。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中所述融合蛋白包含N-末端ActA結(jié)構(gòu)域。

7.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述PrfA介導(dǎo)的表達(dá)構(gòu)建體編碼異源抗原。

8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述評估包括將觀察到的表達(dá)水平與閾值進(jìn)行比較。

9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述李斯特菌宿主細(xì)胞是單核細(xì)胞增多性李斯特菌。

10.一種產(chǎn)生疫苗的方法，所述方法包括以足以產(chǎn)生疫苗的方式在包含PrfA活化量的還原劑的成分確定生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)包含編碼異源抗原的PrfA介導(dǎo)的表達(dá)構(gòu)建體的李斯特菌宿主細(xì)胞。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中所述李斯特菌宿主細(xì)胞如權(quán)利要求1至10中任一項所述。

12.根據(jù)權(quán)利要求10至11中任一項所述的方法，其中所述方法還包括殺死所述李斯特菌宿主。

13.一種包含根據(jù)權(quán)利要求10至12中任一項所述的方法產(chǎn)生的李斯特菌屬細(xì)菌的疫苗。

14.一種引發(fā)或加強受試者體內(nèi)對抗原的細(xì)胞免疫應(yīng)答的方法，所述方法包括向所述受試者施用有效量的根據(jù)權(quán)利要求14所述的疫苗。

15.一種成分確定的細(xì)菌培養(yǎng)基，其包含PrfA活化量的還原劑。