[發明專利]用于調節李斯特菌屬某些種中PRFA介導的毒力基因活化的方法和組合物在審
| 申請號： | 201680052721.4 | 申請日： | 2016-09-01 |
| 公開（公告）號： | CN108138123A | 公開（公告）日： | 2018-06-08 |
| 發明（設計）人： | 丹尼爾·A·波特努瓦;喬納森·L·波特曼 | 申請（專利權）人： | 加利福尼亞大學董事會 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;C12N1/21;C12N15/09;C12N15/52 |
| 代理公司： | 北京柏杉松知識產權代理事務所(普通合伙) 11413 | 代理人： | 王春偉;劉繼富 |
| 地址： | 美國加利*** | 國省代碼： | 美國;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 表達構建體 李斯特菌 介導 成分確定培養基 宿主細胞 毒力基因 還原劑 評估 活化 疫苗 | ||
1.一種評估PrfA介導的表達構建體的表達的方法，所述方法包括：
將包含PrfA介導的表達構建體的李斯特菌宿主細胞維持在含有PrfA活化量的還原劑的成分確定培養基中；和
評價來自所述表達構建體的產物的表達以評估所述PrfA介導的表達構建體的表達。
2.根據權利要求1所述的方法，其中所述PrfA介導的表達構建體是修飾的毒力因子表達構建體。
3.根據權利要求1至2中任一項所述的方法，其中所述修飾的毒力因子表達構建體是ActA表達構建體。
4.根據權利要求3所述的方法，其中所述ActA表達構建體包含ActA啟動子。
5.根據權利要求4所述的方法，其中所述ActA表達構建體編碼融合蛋白。
6.根據權利要求5所述的方法，其中所述融合蛋白包含N-末端ActA結構域。
7.根據前述權利要求中任一項所述的方法，其中所述PrfA介導的表達構建體編碼異源抗原。
8.根據前述權利要求中任一項所述的方法，其中所述評估包括將觀察到的表達水平與閾值進行比較。
9.根據前述權利要求中任一項所述的方法，其中所述李斯特菌宿主細胞是單核細胞增多性李斯特菌。
10.一種產生疫苗的方法，所述方法包括以足以產生疫苗的方式在包含PrfA活化量的還原劑的成分確定生長培養基中培養包含編碼異源抗原的PrfA介導的表達構建體的李斯特菌宿主細胞。
11.根據權利要求10所述的方法，其中所述李斯特菌宿主細胞如權利要求1至10中任一項所述。
12.根據權利要求10至11中任一項所述的方法，其中所述方法還包括殺死所述李斯特菌宿主。
13.一種包含根據權利要求10至12中任一項所述的方法產生的李斯特菌屬細菌的疫苗。
14.一種引發或加強受試者體內對抗原的細胞免疫應答的方法，所述方法包括向所述受試者施用有效量的根據權利要求14所述的疫苗。
15.一種成分確定的細菌培養基，其包含PrfA活化量的還原劑。
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