[發(fā)明專利]用于獲得種子處理耐受性微生物的高通量方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201680052084.0
• 申請日: 2016-08-18
• 公開（公告）號: CN107949280A
• 公開（公告）日: 2018-04-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: J·S·克羅沃;R·T·麥卡恩
• 申請（專利權(quán)）人: 孟山都技術(shù)公司
• 主分類號: A01N63/00
• 分類號: A01N63/00;A01N63/02;C05G3/02;C12N1/02;C12N1/20;C12R1/07;C12R1/01
• 代理公司: 北京市金杜律師事務(wù)所11256
• 代理人: 孟凡宏,謝燕軍

1.一種用于獲得微生物的高通量方法，其包括以下步驟：

a)獲得多種微生物；

b)將所述多種微生物施加于種子或其替代物；

c)將所述種子或其替代物儲存在其中所述多種微生物的一個或多個成員變得沒有活力的條件下；

d)將所述種子或其替代物放置在溶液中；和

e)從所述溶液鑒定在所述步驟(c)之后保持活力的至少第一微生物。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述步驟(a)包括使來自生長環(huán)境的所述多種微生物與作物植物相關(guān)聯(lián)。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述步驟(a)包括從所述多種微生物產(chǎn)生微生物細(xì)胞混懸液。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其包括在所述步驟(b)之前使所述微生物細(xì)胞混懸液濃縮。

5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述步驟(e)包括將所述溶液涂鋪于生長培養(yǎng)基上，并選擇包含所述微生物的菌落。

6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述步驟(a)包括：

i)產(chǎn)生微生物細(xì)胞混懸液；

ii)將所述微生物細(xì)胞混懸液涂鋪于生長培養(yǎng)基上；

iii)選擇微生物菌落；和

iv)通過使在步驟iii)中選擇的微生物菌落的成員組合來產(chǎn)生所述多種微生物。

7.如權(quán)利要求2所述的方法，其中所述生長環(huán)境包括來自農(nóng)田的土壤。

8.如權(quán)利要求2所述的方法，其中所述生長環(huán)境是非農(nóng)業(yè)環(huán)境。

9.如權(quán)利要求1所述的方法，其還包括以下步驟：

f)鑒定所述微生物能夠賦予作物植物物種的植物的至少第一有益性狀。

10.如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述種子屬于與所述作物植物物種相同的物種。

11.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述多種微生物來自作物植物根際、內(nèi)球、葉圈或其任何組合。

12.如權(quán)利要求3所述的方法，其中所述微生物細(xì)胞混懸液從所述作物植物的組織獲得。

13.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述作物植物是雙子葉植物。

14.如權(quán)利要求13所述的方法，其中所述雙子葉植物選自由以下組成的組：苜蓿、菜豆、甜菜、西蘭花、卷心菜、胡蘿卜、花椰菜、芹菜、大白菜、棉花、黃瓜、茄子、亞麻、萵苣、羽扇豆、甜瓜、豌豆、胡椒、花生、馬鈴薯、南瓜、蘿卜、油菜籽、菠菜、大豆、倭瓜、糖用甜菜、向日葵、番茄和西瓜。

15.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述作物植物是單子葉植物。

16.如權(quán)利要求15所述的方法，其中所述單子葉植物選自由以下組成的組：大麥、玉米、韭菜、洋蔥、稻米、高粱、甜玉米、小麥、黑麥、谷子、甘蔗、燕麥、黑小麥、柳枝黍和草坪草。

17.如權(quán)利要求1所述的方法，其中保持活力的所述微生物是革蘭氏陰性非芽孢形成性細(xì)菌。

18.如權(quán)利要求1所述的方法，其中保持活力的所述微生物是革蘭氏陽性芽孢形成性或非芽孢形成性細(xì)菌。

19.如權(quán)利要求1所述的方法，其中儲存所述種子或其替代物持續(xù)約1小時至約1年進(jìn)行。

20.如權(quán)利要求1所述的方法，其中儲存所述種子或其替代物在環(huán)境溫度下進(jìn)行。

21.如權(quán)利要求1所述的方法，其中儲存所述種子或其替代物在高于或低于環(huán)境溫度下進(jìn)行。

22.如權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟(b)還包括在施加所述多種微生物之前、同時或之后將種子處理劑施加于所述種子或其替代物。

23.如權(quán)利要求22所述的方法，其中所述種子處理劑包括所述多種有益微生物。

24.如權(quán)利要求22所述的方法，其中所述種子處理劑包括化學(xué)殺蟲劑。

25.如權(quán)利要求22所述的方法，其中在施加所述多種微生物之前或之后將所述種子處理劑施加于所述種子或其替代物。