[發(fā)明專利]用于采用聚合物囊泡遞送基因編輯工具的組合物和方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201680050998.3
• 申請(qǐng)日: 2016-07-01
• 公開（公告）號(hào): CN108699563A
• 公開（公告）日: 2018-10-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: P·P·高洛夫奇安;J·N·約爾
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 波賽伊達(dá)治療學(xué)股份有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/63
• 分類號(hào): C12N15/63;C12N9/22;A61K48/00
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 錢文宇;陶啟長(zhǎng)

1.用于遺傳修飾的組合物，包含：

合成聚合物囊泡；和

包封在所述合成聚合物囊泡中的基因編輯系統(tǒng)，所述基因編輯系統(tǒng)包含核酸組分，該核酸組分經(jīng)設(shè)置以與宿主細(xì)胞基因組中的靶序列相互作用。

2.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中，所述基因編輯系統(tǒng)還包含蛋白質(zhì)組分。

3.如權(quán)利要求2所述的組合物，其中：

所述蛋白質(zhì)組分包含核糖核酸(RNA)導(dǎo)向的核酸酶；和

所述核酸組分包含與所述靶序列互補(bǔ)的引導(dǎo)RNA。

4.如權(quán)利要求3所述的組合物，其中：

所述核酸組分還包含外源脫氧核糖核酸(DNA)修復(fù)模板；

所述RNA導(dǎo)向的核酸酶經(jīng)設(shè)置以在所述宿主細(xì)胞基因組中于所述靶序列附近產(chǎn)生雙鏈斷裂；和

在所述宿主細(xì)胞基因組的再連接過(guò)程中，所述宿主細(xì)胞中的修復(fù)過(guò)程觸發(fā)基于外源DNA修復(fù)模板的對(duì)所述宿主細(xì)胞基因組的修飾。

5.如權(quán)利要求4所述的組合物，其中，所述DNA修復(fù)模板包含端部區(qū)域，其與所述宿主細(xì)胞基因組的側(cè)接雙鏈斷裂的區(qū)域同源，所述雙鏈斷裂由所述RNA導(dǎo)向的核酸酶誘導(dǎo)。

6.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中，所述基因編輯系統(tǒng)以相對(duì)于組合物總重量至少3重量％的量包括在所述合成聚合物囊泡中。

7.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中，所述蛋白質(zhì)組分包含如下形式的酶：天然形式，或經(jīng)設(shè)置以在遞送進(jìn)入宿主細(xì)胞之后被翻譯成酶的信使RNA(mRNA)分子。

8.如權(quán)利要求2所述的組合物，其中，所述蛋白質(zhì)組分以包含編碼酶的脫氧核糖核酸(DNA)序列的表達(dá)載體的形式被遞送。

9.如權(quán)利要求8所述的組合物，其中，所述核酸組分包含編碼引導(dǎo)核糖核酸(RNA)的DNA序列。

10.如權(quán)利要求9所述的組合物，其中，編碼所述酶的所述DNA序列和所述引導(dǎo)RNA在單一表達(dá)載體上提供。

11.如權(quán)利要求2所述的組合物，其中，所述蛋白質(zhì)組分包含酶，該酶經(jīng)設(shè)置以基于所述核酸組分與所述宿主基因組的互補(bǔ)區(qū)段的結(jié)合而切割宿主基因組。

12.如權(quán)利要求11所述的組合物，其中，所述酶包含規(guī)律成簇的間隔短回文重復(fù)(CRISPR)相關(guān)蛋白9(Cas9)。

13.如權(quán)利要求2所述的組合物，其中：

所述核酸組分包含含有轉(zhuǎn)座子的表達(dá)載體；和

所述蛋白質(zhì)組分包含轉(zhuǎn)座酶。

14.如權(quán)利要求13所述的組合物，其中，所述轉(zhuǎn)座酶是如下之一：

天然酶；

經(jīng)設(shè)置以在遞送進(jìn)入宿主細(xì)胞之后被翻譯成所述酶的信使核糖核酸(mRNA)分子；和

編碼所述酶的脫氧核糖核酸(DNA)序列。

15.如權(quán)利要求14所述的組合物，其中，所述DNA序列在包含所述轉(zhuǎn)座子的表達(dá)載體上提供。

16.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中，所述合成聚合物囊泡由至少一種嵌段共聚物產(chǎn)生，其包含：

包括聚(環(huán)氧乙烷)的親水嵌段；和

疏水嵌段。

17.如權(quán)利要求15所述的組合物，其中，所述疏水嵌段選自，脂族聚酸酐、多聚核酸、聚酯、聚原酸酯、多肽、聚磷腈和多糖。