[發明專利]用于合成煙酰胺單核苷酸和煙堿酸單核苷酸的酶促系統和方法

在審

• 申請號: 201680047100.7
• 申請日: 2016-06-08
• 公開（公告）號: CN108368493A
• 公開（公告）日: 2018-08-03
• 發明（設計）人: L·吳;D·A·辛克萊;K·密茨
• 申請（專利權）人: 新南創新私人有限公司
• 主分類號: C12N9/12
• 分類號: C12N9/12;C07H19/00;C12P19/30;C12N11/18;C12N11/00
• 代理公司: 北京嘉和天工知識產權代理事務所(普通合伙) 11269
• 代理人: 甘玲;繆策

1.一種用于合成煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)前體的系統，所述系統包括超活性磷酸核糖焦磷酸合成酶(PRS)突變體，其中與野生型PRS相比，所述PRS突變體對所述PRS突變體催化的反應的產物較不敏感。

2.如權利要求1所述的系統，其中所述超活性PRS突變體包括通過一個或更多個氨基酸取代而與野生型PRS不同的多肽。

3.如權利要求1或權利要求2所述的系統，其中所述一個或更多個氨基酸取代選自由人類PRS的Asp51His、人類PRS的Asn133Ser、人類PRPP的Leu128Ile、人類PRS的Asp182His、人類PRS的Ala189Val、人類PRS的His192Gln、非人類PRS中的任何等效取代，及其任何組合組成的組。

4.如權利要求1-3中任一項所述的系統，其中所述超活性PRS突變體包括一個或更多個親和標簽。

5.如權利要求4所述的系統，其中所述親和標簽是6xHis標簽或谷胱甘肽S-轉移酶(GST)標簽。

6.如權利要求1-5中任一項所述的系統，其中所述超活性PRS突變體是重組產生的、分離的或純化的。

7.如權利要求1-6中任一項所述的系統，其中所述超活性PRS突變體被固定到表面上。

8.如權利要求7所述的系統，其中所述超活性PRS突變體通過吸附、親和結合、離子鍵合或共價鍵合被固定到所述表面上。

9.如權利要求7或權利要求8所述的系統，其中所述表面是珠的表面或所述表面包括樹脂。

10.如權利要求1-9中任一項所述的系統，所述系統還包括煙酰胺磷酸核糖轉移酶(NAMPT)或煙酸磷酸核糖轉移酶(NAPRT)。

11.如權利要求10所述的系統，其中所述NAMPT或NAPRT包括一個或更多個親和標簽。

12.如權利要求11所述的系統，其中所述親和標簽是6xHis標簽或谷胱甘肽S-轉移酶(GST)標簽。

13.如權利要求10-13中任一項所述的系統，其中所述NAMPT或NAPRT是重組產生的、分離的或純化的。

14.如權利要求10-13中任一項所述的系統，其中所述NAMPT或NAPRT被固定到表面上。

15.如權利要求14所述的系統，其中所述NAMPT或NAPRT通過吸附、親和結合、離子鍵合或共價鍵合被固定到所述表面上。

16.如權利要求14或權利要求15所述的系統，其中所述表面是珠的表面或所述表面包括樹脂。

17.如權利要求14-16中任一項所述的系統，其中所述PRS突變體也被固定到表面上。

18.如權利要求17所述的系統，其中所述PRS突變體和所述NAMPT或NAPRT被固定到不同的表面上。

19.如權利要求17所述的系統，其中所述PRS突變體和所述NAMPT或NAPRT被固定到相同的表面上。

20.如權利要求1-19中任一項所述的系統，所述系統還包括三磷酸腺苷(ATP)。

21.如權利要求1-20中任一項所述的系統，所述系統還包括核糖-5-磷酸。