[發(fā)明專利]甜菊醇糖苷轉(zhuǎn)運(yùn)

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201680047030.5
• 申請(qǐng)日: 2016-08-15
• 公開（公告）號(hào): CN107922465B
• 公開（公告）日: 2021-12-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 維克托·馬里厄斯·波爾;普利斯希勒·扎爾特簡(jiǎn)斯;埃里克·范·德恩·伯格
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 帝斯曼知識(shí)產(chǎn)權(quán)資產(chǎn)管理有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/39
• 分類號(hào): C07K14/39;C12P19/56;C12P15/00;C12N1/16;A23L2/60
• 代理公司: 北京東方億思知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11258
• 代理人: 肖善強(qiáng)

1.一種能夠產(chǎn)生甜菊醇糖苷的重組宿主，所述重組宿主過表達(dá)介導(dǎo)甜菊醇糖苷轉(zhuǎn)運(yùn)的多肽，并且所述多肽的氨基酸序列是如SEQ ID NO:29所示的。

2.一種能夠產(chǎn)生甜菊醇糖苷的重組宿主，所述重組宿主已被修飾，優(yōu)選在其基因組中被修飾，以導(dǎo)致介導(dǎo)甜菊醇糖苷轉(zhuǎn)運(yùn)的多肽的產(chǎn)生缺陷，并且所述多肽的氨基酸序列是如SEQ ID NO:29所示的。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組宿主，所述重組宿主包含編碼多肽的重組核酸，所述多肽的氨基酸序列是如SEQ ID NO:29所示的。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的重組宿主，其包含一種或更多種編碼以下多肽的重組核苷酸序列：

具有對(duì)映-柯巴基焦磷酸合酶活性的多肽；

具有對(duì)映-貝殼杉烯合酶活性的多肽；

具有對(duì)映-貝殼杉烯氧化酶活性的多肽；以及

具有貝殼杉烯酸13-羥化酶活性的多肽。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的重組宿主，其包含編碼具有NADPH-細(xì)胞色素p450還原酶活性的多肽的重組核酸序列。

6.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的重組宿主，其包含編碼以下項(xiàng)中的一種或更多種的重組核酸序列：

(i)具有UGT74G1活性的多肽；

(ii)具有UGT2活性的多肽；

(iii)具有UGT85C2活性的多肽；和

(iv)具有UGT76G1活性的多肽。

7.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的重組宿主，其中所述宿主屬于Saccharomyces、Aspergillus、Pichia、Kluyveromyces、Candida、Hansenula、Humicola、Issatchenkia、Trichosporon、Brettanomyces、Pachysolen、Yarrowia、Yamadazyma或Escherichia屬中的一種。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的重組宿主，其中所述重組宿主是Saccharomyces cerevisiae細(xì)胞、Yarrowia lipolytica細(xì)胞、Candida krusei細(xì)胞、Issatchenkia orientalis細(xì)胞或Escherichia coli細(xì)胞。

9.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的重組宿主，其中所述宿主產(chǎn)生香葉基香葉基二磷酸(GGPP)的能力被上調(diào)。

10.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的重組宿主，其包含編碼以下項(xiàng)中的一種或更多種的核酸序列：

具有羥甲基戊二酰基-輔酶A還原酶活性的多肽；或者

具有法尼基-焦磷酸合成酶活性的多肽。

11.一種制備甜菊醇糖苷的方法，所述方法包括在合適的發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一項(xiàng)所述的重組宿主，以及任選地回收所述甜菊醇糖苷。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的制備甜菊醇糖苷的方法，其中所述方法以工業(yè)規(guī)模進(jìn)行。