[發(fā)明專利]脂肪細(xì)胞與巨噬細(xì)胞的三維共培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201680043379.1
• 申請日: 2016-07-22
• 公開（公告）號: CN107922923B
• 公開（公告）日: 2021-08-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 金奇映;樸盛范;李相達(dá);金熹煉;鄭元?jiǎng)?/a>
• 申請（專利權(quán)）人: 韓國化學(xué)研究院
• 主分類號: C12N5/077
• 分類號: C12N5/077;C12N7/00;G01N33/50
• 代理公司: 北京匯思誠業(yè)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11444
• 代理人: 王剛;龔敏

1.一種脂肪細(xì)胞與巨噬細(xì)胞的共培養(yǎng)方法，其中，包括以下步驟：

(a)準(zhǔn)備包含前脂肪細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和水凝膠的混合物；

(b)利用三維細(xì)胞-打印系統(tǒng)，以所述混合物制造包含前脂肪細(xì)胞與巨噬細(xì)胞的水凝膠支架；

(c)使用氯化鈣在所述水凝膠支架中形成交聯(lián)鍵；

(d)利用培養(yǎng)液對步驟(b)的所述水凝膠支架進(jìn)行處理；和

(e)對步驟(d)的處理后的水凝膠支架進(jìn)行培養(yǎng)，使所述水凝膠支架中所包含的前脂肪細(xì)胞與巨噬細(xì)胞增殖及分化而形成脂肪樣組織，

其中，所述水凝膠為藻酸鹽水凝膠，所述藻酸鹽水凝膠還包括選自膠原、殼聚糖、透明質(zhì)酸和明膠中的一種或兩種以上，

其中，步驟(a)中的所述巨噬細(xì)胞的含量相對于所述前脂肪細(xì)胞的總數(shù)為1.0％至2.0％。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的共培養(yǎng)方法，其中，所述水凝膠為包含藻酸鹽、膠原和明膠的藻酸鹽水凝膠。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的共培養(yǎng)方法，其中，所述藻酸鹽的含量相對于步驟(a)的混合物為2.0至4.0％(w/v)。

4.一種與脂肪組織相關(guān)的代謝性疾病的分析方法，其中，包括以下步驟：

(a)準(zhǔn)備包含前脂肪細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和水凝膠的混合物；

(b)利用三維細(xì)胞-打印系統(tǒng)，以步驟(a)的所述混合物制造包含前脂肪細(xì)胞與巨噬細(xì)胞的水凝膠支架；

(c)使用氯化鈣在所述水凝膠支架中形成交聯(lián)鍵；

(d)利用培養(yǎng)液對步驟(b)的所述水凝膠支架進(jìn)行處理；

(e)對步驟(d)的處理后的水凝膠支架進(jìn)行培養(yǎng)，從而使所述水凝膠支架中所包含的前脂肪細(xì)胞與巨噬細(xì)胞增殖及分化而形成脂肪樣組織；以及

(f)檢測步驟(e)的所述脂肪樣組織中的基因表達(dá)和蛋白質(zhì)活性中的一種以上，

其中，所述水凝膠為藻酸鹽水凝膠，所述藻酸鹽水凝膠還包括選自膠原、殼聚糖、透明質(zhì)酸和明膠中的一種或兩種以上，

其中，步驟(a)中的所述巨噬細(xì)胞的含量相對于所述前脂肪細(xì)胞的總數(shù)為1.0％至2.0％。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的分析方法，其中，所述代謝性疾病為2型糖尿病。