[發(fā)明專利]高純度膠原蛋白顆粒及其制備方法與用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201680037497.1
• 申請日: 2016-08-11
• 公開（公告）號: CN107849596B
• 公開（公告）日: 2022-02-25
• 發(fā)明（設計）人: 王俊杰;蔡佩樺;顧凱琪;謝達仁
• 申請（專利權）人: 亞果生醫(yī)股份有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/36;A61L27/24;A61L27/36
• 代理公司: 北京華夏正合知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 11017
• 代理人: 韓登營

1.一種制備膠原蛋白顆粒的方法，其特征在于，包含：

步驟(1)在壓力350巴以及溫度37℃下，以一超臨界二氧化碳(scCO2)對一去除毛發(fā)和脂肪且厚度為0.1-1毫米的豬皮膚去細胞40至180分鐘；

步驟(2)以一水溶液處理所述步驟(1)中所述經(jīng)超臨界二氧化碳(scCO2)去細胞的豬皮膚，其中所述水溶液包含一非離子表面活性劑，其選自于以下物質(zhì)所組成的群組：辛基酚聚氧乙烯醚、脫水山梨醇單硬脂酸酯、聚山梨醇酯、波洛莎姆(poloxomer)、壬苯醇醚、十六醇和烷基聚葡糖苷；

步驟(3)以一蛋白酶處理所述步驟(2)中所述經(jīng)水溶液處理的豬皮膚，其中所述蛋白酶是選自于以下物質(zhì)所組成的群組：胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、木瓜酶、木瓜凝乳蛋白酶、鳳梨酶、奇異果酶、蛋白酶A、蛋白酶K、肽酶、無花果酶、鈣蛋白酶、半胱天冬酶或其組合；

步驟(4)以一核酸酶處理所述步驟(3)中所述經(jīng)蛋白酶處理的豬皮膚，所述核酸酶是一DNA核酸酶或一RNA核酸酶；

步驟(5)對所述步驟(4)中所述經(jīng)核酸酶處理的豬皮膚施以一過氧化氫溶液處理一小時；

步驟(6)對所述步驟(5)中所述經(jīng)過氧化氫處理的豬皮膚施以連同一共溶劑的所述超臨界二氧化碳(scCO2)，于壓力350巴和溫度37℃下，處理60分鐘，以從中移除殘留的化學物質(zhì)，以產(chǎn)生一膠原蛋白基質(zhì)；以及

步驟(7)將所述步驟(6)中所述膠原蛋白基質(zhì)在液態(tài)氮下切割或研磨進行造粒，以產(chǎn)生所述膠原蛋白顆粒，其粒徑為10-250微米，

其中，所述方法的特征在于不使用交聯(lián)劑或鹽類。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步驟(2)的所述水溶液更包含一陰離子表面活性劑，其選自于以下物質(zhì)所組成的群組：月桂基磺酸、十二烷基磺酸、十二烷基硫酸鈉(SDS)、十二烷基苯磺酸、十三烷基苯磺酸、烷基苯氧基苯二磺酸、萘磺酸、烷基萘磺酸和烯基萘。

3.如權利要求1所述的方法，更包含以所述步驟(2)的水溶液處理所述步驟(4)的產(chǎn)物。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述水溶液更包含一陰離子表面活性劑，其是選自于以下物質(zhì)所組成的群組：月桂基磺酸、十二烷基磺酸、十二烷基硫酸鈉(SDS)、十二烷基苯磺酸、十三烷基苯磺酸、烷基苯氧基苯二磺酸、萘磺酸、烷基萘磺酸和烯基萘。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述共溶劑是乙醇。