[發明專利]使用小分子的人成纖維細胞至神經干細胞的直接轉化方法有效
| 申請號： | 201680019389.1 | 申請日： | 2016-04-12 |
| 公開（公告）號： | CN107454913B | 公開（公告）日： | 2020-07-10 |
| 發明（設計）人： | 洪性會;崔京雅;黃仁植 | 申請（專利權）人： | 因斯戴姆凱爾股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/02 | 分類號： | C12N5/02;C12N5/0797;A61K35/30;A61P25/00 |
| 代理公司： | 北京坤瑞律師事務所 11494 | 代理人： | 陳桉 |
| 地址： | 韓國*** | 國省代碼： | 暫無信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 使用 分子 纖維 細胞 神經 干細胞 直接 轉化 方法 | ||
1.一種產生神經干細胞的方法，所述方法包括：
在包含Thiazovivin、丙戊酸、Purmorphamine、A8301、SB431542、CHIR99021、DZNep(去氮腺嘌呤A)和5-AZA的培養基中培養人成纖維細胞。
2.權利要求1所述的方法，其中所述培養基進一步包含一種或多種選自下組的小分子化合物：PD0325901、抗壞血酸、PS48、毛喉素和反苯環丙胺。
3.權利要求1所述的方法，其中所述培養基是含有N2、B27、bFGF和EGF的DMEM/F12。
4.權利要求1所述的方法，其中將所述人成纖維細胞培養10-15天。
5.權利要求1所述的方法，其進一步包括以下步驟：
通過傳代培養然后懸浮培養所述人成纖維細胞形成球體；和貼壁培養所形成的球體，然后懸浮培養所述貼壁培養的球體。
6.權利要求5所述的方法，其中將所述懸浮培養和所述貼壁培養各自進行7-10天。
7.權利要求5所述的方法，其中將貼壁培養和懸浮培養的步驟重復進行2至4次。
8.權利要求1所述的方法，其中所述神經干細胞表達巢蛋白、sox1或musashi1。
9.權利要求1所述的方法，其中所述神經干細胞分化為選自下組的一種或多種：星形膠質細胞、少突膠質細胞和神經元。
10.權利要求1所述的方法，其中所述神經干細胞分化為選自下組的一種或多種：多巴胺能神經元、GABA能神經元、運動神經元和膽堿能神經元。
11.權利要求1所述的方法，其中所述神經干細胞保持染色體的穩定性。
12.權利要求1所述的方法，其中所述神經干細胞在10次或更多次傳代保持未分化狀態。
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