[發明專利]純化生物組合物的方法及用于其的制品

有效

• 申請號: 201680017205.8
• 申請日: 2016-03-17
• 公開（公告）號: CN107406824B
• 公開（公告）日: 2021-02-05
• 發明（設計）人: A·W·瓦伊爾;J·K·拉斯馬森;J·J·施密德;A·E·奧茲卡姆;J·F·赫斯特;G·M·杰魯姆
• 申請（專利權）人: 3M創新有限公司
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00;C12N15/00;G01N30/00
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 陳長會

本發明公開了一種純化生物組合物的方法，所述方法包括：將松散的陽離子配體官能化短纖維和生物組合物設置在容器的混合容積內；攪拌所述生物組合物和所述松散的陽離子配體官能化短纖維，同時使它們在所述混合容積內彼此緊密接觸，以提供改性纖維和純化的生物組合物；以及將所述純化的生物組合物中的至少一部分與其所接觸的改性纖維和任何松散的陽離子配體官能化短纖維分離。所述松散的陽離子配體官能化短纖維具有包含接枝丙烯酸類聚合物的改性表面層，所述接枝丙烯酸類聚合物包含10至100重量％的可陽離子化的單體單元。本發明還公開了一種用于純化生物組合物的制品，所述制品包括：其中設置有混合容積的容器；以及設置在所述混合容積內的松散的陽離子配體官能化短纖維。

技術領域

本公開廣義描述使用松散的官能化短纖維用于純化生物組合物的方法和制品。

背景技術

靶標生物材料，諸如病毒和生物大分子(例如，包括活細胞的組分或產物，例如蛋白質、碳水化合物、脂質、和核酸)的檢測、定量、分離和純化一直以來都是研究人員的目標。從診斷上來講，檢測和定量是重要的，例如，作為各種生理條件(諸如疾病)的指示。對于治療和在生物醫學研究中，生物大分子的分離和純化是重要的。生物大分子諸如酶(它們是能夠催化化學反應的特殊種類蛋白質)在工業上也是可用的；酶已被分離、純化，并且隨后被用于甜味劑、抗生素和多種有機化合物，諸如乙醇、乙酸、賴氨酸、天冬氨酸和生物可用的產品，諸如抗體和類固醇的生產。

在它們的天然狀態下(即，體內)，這些生物大分子的結構和相應的生物活性一般保持在相當窄的pH和離子強度范圍內。因此，任何分離和純化操作必須考慮這些因素以得到具有效能的處理后的生物大分子。

基于在流動相(其可為氣體或液體)和固定相之間的溶質的交換，可對生物產物混合物進行色譜分離和純化操作。該溶液混合物中各種溶質實現分離，是由于改變了每種溶質與固定相的結合相互作用；當受到移動相的離解或置換作用時，與相互作用不太強的溶質相比，較強的結合相互作用一般導致較長的保持時間，并且以這種方式可以實現分離和純化。柱層析已被用于純化生物組合物；然而，這種技術一般受到低吞吐率、柱填料溝流、和/或高成本問題的困擾。

已知聚合物樹脂廣泛用于多種靶標化合物的分離和純化。例如，基于離子基團的存在、基于靶標化合物的大小、基于疏水相互作用、基于親和相互作用或基于共價鍵的形成而將聚合物樹脂用于純化或分離靶標化合物。近來，已經開發出在基底上具有此種聚合物涂層的配體官能化基底以幫助純化生物組合物；例如，如美國專利8,377,672B2(Rasmussen等人)和8,435,776B2(Rasmussen等人)所公開的。

發明內容

雖然上述兩個Rasmussen等人的專利描述了可經由過濾過程，使用配體官能化織物用于生物組合物的純化，該過程可能由于細胞碎片等造成織物中孔的積聚和阻塞而減慢。

優選地，本發明人已經發現了一種簡單的更快速的純化方法，該方法使用松散的配體官能化短纖維代替配體官能化織物。

在一個方面，本公開提供一種純化生物組合物的方法，該方法包括：

a)將松散的陽離子配體官能化短纖維和生物組合物設置在容器的混合容積內，其中松散的陽離子配體官能化短纖維具有包含接枝丙烯酸類聚合物的改性表面層，所述接枝丙烯酸類聚合物包含10至100重量％的可陽離子化的單體單元；

b)攪拌生物組合物和松散的陽離子配體官能化短纖維，同時使它們在混合容積內彼此緊密接觸，以提供改性纖維和純化的生物組合物；以及

c)將純化的生物組合物中的至少一部分與其所接觸的改性纖維和任何松散的陽離子配體官能化短纖維分離。

在另一方面，本公開提供一種用于純化生物組合物的制品。