[發明專利]具有糖蛋白H融合體的重靶向皰疹病毒

有效

• 申請號: 201680009622.8
• 申請日: 2016-02-11
• 公開（公告）號: CN107406834B
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發明（設計）人: 馬里亞·加布里埃拉·坎帕代利;瓦倫蒂娜·加塔
• 申請（專利權）人: 生物工程大學精神物質實驗室
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;C12N5/10;C12N15/62;C12N15/869;A61K39/00
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 鄭斌;張福譽

本發明涉及疾病治療領域。更具體地，其涉及具有與糖蛋白H融合的異源多肽的重靶向皰疹病毒，其中所述多肽靶向患病細胞。其還涉及包含本發明皰疹病毒的基因組的核酸、包含所述核酸的載體以及包含所述核酸和所述載體的細胞。其還涉及使用本發明的皰疹病毒來殺傷細胞并且涉及用于體外培養皰疹病毒的方法。

技術領域

本發明涉及疾病治療的領域。更具體地，本發明涉及具有與糖蛋白H融合的異源多肽的重靶向皰疹病毒，其中所述多肽靶向特定細胞，特別是患病細胞。本發明還涉及包含本發明皰疹病毒的基因組的核酸、包含所述核酸的載體以及包含所述核酸或所述載體的細胞。本發明還涉及使用本發明的皰疹病毒來殺傷細胞并且涉及用于體外培養皰疹病毒的方法。

實現本發明的工作已經接受來自歐洲研究委員會(European Research Council)的歐盟第七框架計劃(European Union’s Seventh Framework programme)(FP7/2007-2013)/ERC授權協議n°340060的資金。

背景技術

盡管在過去數十年內，大量發現已被轉化為治療或治愈手段并且使得人的健康和生命質量得到改善，但是不能被治療并且更加不能被治愈的疾病和病理的負擔仍然保持升高。其中突出的為多種形式的癌癥，特別是轉移性癌癥形式，其用化學放射治療或生物藥物或者其組合進行治療，但是成功非常有限。

在過去20年內，已進行大量努力以使用單純皰疹病毒(herpes simplex virus，HSV)作為溶瘤劑(o-HSV)來治療癌癥和轉移。實例為遺傳改造的HSV，其攜帶一些病毒基因的缺失以使病毒減毒并且賦予一定程度的癌癥特異性。以被命名為HSV1716的病毒為例的這些病毒攜帶γ₁34.5基因的一個或兩個拷貝的缺失，其產物與通過激活PKR(蛋白激酶R(protein kinase R))而施加的宿主防御形成對比。攜帶γ₁34.5基因缺失的HSV通過非癌細胞引發針對其的先天應答使得阻止病毒復制的事實而獲得其部分癌癥特異性；相比之下，一些癌細胞在先天應答中表現出缺陷并且因此允許Δγ₁34.5HSV復制，由此殺傷癌細胞。這些o-HSV的缺點是：癌細胞是異質的，并且Δγ₁34.5HSV僅能殺傷PKR應答缺陷的癌細胞部分。出于安全性原因并且為了實現提高的癌癥特異性，在一些情況下，Δγ₁34.5HSV已經被改造以攜帶另外的缺失，實例為缺失編碼核糖核苷酸還原酶的大亞基的UL39基因、缺失ICP 47缺失等。這些另外的缺失使得o-HSV進一步減毒。

為了克服由減毒引起的有限溶瘤效果，攜帶γ₁34.5基因缺失或缺失組合的o-HSV已被進一步修飾以編碼趨化因子或細胞因子。兩個相關的實例為T-VEC和M032。最初命名為Onco-Vex并且后來重命名為T-Vec的o-HSV編碼GM-CSF，其有利于單核細胞和樹突細胞的募集和成熟，并且因此增強所治療患者對其自身腫瘤的應答。效果為所治療患者通過免疫系統以清除腫瘤的增強。在III期臨床試驗中，其改善攜帶轉移性黑素瘤的患者的結果。第二個實例為M032，其為被改造以編碼IL12的序列的Δγ₁34.5HSV。這種病毒被預測有利于Th1應答。招募用于在1期試驗中用M032進行治療的患有膠質母細胞瘤的患者是開放的。經減毒病毒的主要限制是雙重的：(i)其整體復制降低，這表現為體內和在產生足夠大病毒貯存液以產生有效接種物方面的障礙；以及(ii)由于其能夠進入正常細胞并被正常細胞隔離而具有受限的癌癥特異性。這兩個限制預期對治療的臨床效力不利。