[發(fā)明專利]聚合酶變體有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201680008277.6 | 申請(qǐng)日: | 2016-02-01 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN107257854B | 公開(kāi)(公告)日: | 2022-02-15 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | A.阿耶;A.比比洛;B.埃克特;S.蘇科;C.R.阿諾爾德;C.W.施瓦布;E.泰;I.萊德曼;C.A.麥克戈;T.O.舒爾茨;M.伯尼茨-杜拉特;B.韋斯德費(fèi)爾;D.D.旺德利希 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 豪夫邁·羅氏有限公司 |
| 主分類號(hào): | C12N9/12 | 分類號(hào): | C12N9/12 |
| 代理公司: | 中國(guó)專利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 權(quán)陸軍;黃希貴 |
| 地址: | 瑞士*** | 國(guó)省代碼: | 暫無(wú)信息 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說(shuō)明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 聚合 變體 | ||
1.一種如SEQ ID NO:1或2的氨基酸序列所示的具有DNA聚合酶活性的經(jīng)修飾的DNA聚合酶,其中存在對(duì)應(yīng)于S366A/L的取代且任選存在選自以下的一個(gè)或多個(gè)氨基酸取代:H223、N224、Y225、H227、I295、Y342、T343、I357、S360、L361、I363、S365Q、Y367、P368、D417、E475、Y476、F478、K518、H527、T529、M531、N535、G539、P542、N545、Q546、A547、L549、I550、N552、G553、F558、A596、G603、A610、V615、Y622、C623、D624、I628、Y629、R632、N635、M641、A643、I644、T647、I648、T651、I652、K655、W656、D657、V658、H660、F662、L690及其組合。
2.權(quán)利要求1的經(jīng)修飾的DNA聚合酶,其中改變的特征是將核苷酸多磷酸摻入生長(zhǎng)中的DNA鏈中的能力,其中所述核苷酸多磷酸是四磷酸、五磷酸、六磷酸、七磷酸或八磷酸核苷酸。
3.權(quán)利要求1的經(jīng)修飾的DNA聚合酶,其選自
S366A+N535L;
S366L+G553S+F558P;
S366A+N535L+A547M;
S366A+P542E+N545K;
S366A+P542E+I652Q;
S366A+N535L+T529M;
S366A+N535L+I652Q;
S366A+N535L+N545K;
T651Y+P542E+S366A;
S366A+N535I+I652Q;
T651Y+S366A+A547F;
A547F+A610T+S366A;
S366A+T647G+A547F;
T529M+S366A+A547F;
T647E+S366A+A547F;
N545K+S366A+A547F;
S366L+F478L+A596S+L690M;
S366A+N535L+I652Q+T529M;
S366A+S365A+P368G+G603T;
S366A+N535L+I652Q+A547Y;
S366A+N535L+A547M+T647G;
T529M+S366A+A547F+N545K;
T529M+S366A+A547F+N545R;
T529M+S366A+A547F+N552L;
T529M+S366A+A547F+Y629W;
S366A+N535L+A547M+T647G+S360G;
S366A+N535L+I652Q+A547Y+K655G;
T529M+S366A+A547F+N545L+Y629W;
T529M+S366A+A547F+N545L+Y225L;
T529M+S366A+A547F+N545L+Y225F;
T529M+S366A+A547F+N545L+K655F;
T529M+S366A+A547F+N545L+N552L;
T529M+S366A+A547F+N545R+M531A;
T529M+S366A+A547F+N545R+G539Y;
T529M+S366A+A547F+N545R+V658L;
T529M+S366A+A547F+N545L+Y225L+D657R;
T529M+S366A+A547F+N545L+Y225L+N552L;
T529M+S366A+A547F+N545L+Y225L+I652G;
T529M+S366A+A547F+N545L+Y225L+I652Q;和
T529M+S366A+A547F+N545L+Y225L+N552M。
4.權(quán)利要求1的經(jīng)修飾的DNA聚合酶,其包含S366A+T529M+N545L+A547F。
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