[發明專利]胚胎植入

有效

• 申請號: 201680007123.5
• 申請日: 2016-01-27
• 公開（公告）號: CN107206054B
• 公開（公告）日: 2021-08-20
• 發明（設計）人: N·高皮山德蘭;N·M·奧斯;D·A·布魯克
• 申請（專利權）人: 奧斯塔拉生物醫學公司
• 主分類號: A61K38/19
• 分類號: A61K38/19;A61K38/20;A61P15/00
• 代理公司: 北京市鑄成律師事務所 11313
• 代理人: 郗名悅;王建秀

本發明涉及通過在受精或胚胎植入之前提供免疫許可的子宮環境，改善雌性中的胚胎植入成功率和妊娠成功率的方法和組合物，所述組合物包括細胞因子。本發明的方法用于使得子宮更易于接受或較不排斥，例如，轉移的胚胎、精子或其他異源移植組織。

本發明涉及通過在受精或胚胎植入之前提供免疫許可(immunopermissive)的子宮環境，改善雌性中的胚胎植入成功率和妊娠成功率的方法和組合物。本發明的方法用于使得子宮更易于接受或較不排斥，例如，轉移的胚胎、精子或其他異源移植組織。本發明尤其也包括用于本發明的方法的組合物和制劑。

背景

子宮環境，其如果是排斥的/非接收的，可造成人類和動物等中良好質量胚胎的差植入率。拒信，就失敗的植入和自然流產而言，不適當的致敏子宮環境也可能是繁殖障礙的許多情況的原因。類似地，子宮致敏障礙被視為人類中妊娠并發癥，比如先兆子癇和通過阻止適當的胎盤發育的胎兒生長受限的原因。

基因改變或修飾的動物提供了用于體內測試新的基因和藥物療法的有價值的模型，并且是在過去十年中動物實驗的數量逐漸增加的主要原因。在英國，與1995年相比，在2011年進行超過四倍的使用基因修飾的動物的許多科學程序。基因修飾的動物的使用現在代表在動物上超過50％的所有科學程序。使用的最大類別是飼養(以產生基因修飾的動物)，僅2012年在英國嚙齒動物占幾乎180萬個程序，該數量的背景趨勢是每年增加。嚙齒動物中的胚胎轉移支撐了轉基因方法的發展、具體品系的再衍生，并且促進動物系跨長距離的轉運(transport)。典型地，胚胎轉移需要在受體雌性中誘導假妊娠。該現象準備了用于植入胚胎的子宮，但是，盡管誘導假妊娠，轉移基因修飾的胚胎的成功率仍相對較低。

小鼠是自發排卵的并且在發情期之后可假妊娠，其中在發情期中雌性與遺傳上不育的雄性比如可獲得自Harlan Laboratories Inc的T145H-Re品系(其由于染色體易位是不育的)或結扎輸精管的雄性交配。兩組雄性都射出沒有功能精子的精漿。但是，遺傳上不育的和結扎輸精管的小鼠都相對昂貴。在結扎輸精管的雄性的情況下，不育不能確保100％有效并且需要測試每個雄性，而產生遺傳上不育的雄性產生了不需要的過剩雌性。

可選地，假妊娠可通過由用人工機械刺激模擬交配獲得的正常的陰道刺激誘導，例如通過振動的刻紋工具(engraving tool)(Kenney等；J Reprod.Fert.1977,49,305-309)。發現插入的次數和速度對繁殖成功具有重要作用(Diamond；Science,1970,169,4,995-997)。盡管該方法已經在大鼠和小鼠中有一些成功，但是機械刺激對誘導金地鼠(Golden Hamster)的假妊娠沒有作用(Diamond等J.Reprod.Fert.1968,17,165-168)。當雌性和不育的雄性交配或機械刺激時，黃體持續而沒有胚胎，導致假妊娠。雌性在假妊娠狀態下，將使乳腺發育，分泌乳汁(lactate)和筑巢。需要改善誘導實驗室測試動物的假妊娠狀態的方法。

盡管用于在許多嚙齒動物物種中胚胎轉移的方案是相對成熟的，但是它們較差的優化意味著存在大量的動物損耗，其在全世界動物單位中造成許多經濟和倫理問題。現有技術標準方法目前依靠使受體雌性與結扎輸精管的雄性交配以誘導假妊娠，而不是機械刺激，其中交配活動和精液暴露于母體的生殖系(reproductive tract)觸發神經內分泌和涉及復雜的細胞因子級聯的局部的(主要位于子宮)炎癥應答和準備在子宮中產生免疫許可環境的前列腺素介導的事件，從而利于胚胎植入前的發育和/或胚泡植入和建立妊娠。即使在沒有受精的情況下，支持黃體發育和孕酮產生，并且母體的生理機能協同使得子宮易于接受轉移的胚胎多達10-13天。該技術常規用于支持正常的(冷藏保存品系再生/再衍生)或基因修飾的(轉基因/嵌合/克隆的)胚胎的發育。

但是，該方法的效力是受限的。典型地，為了該程序，與妊娠的那些雌性相比，準備了四倍多的雌性。當植入新鮮的或冷凍的胚胎時，這表示大量有價值的生物材料和努力的耗費。而且，伴隨著前瞻性受體，也需要維持大量年幼的結扎輸精管的雄性：這些一周可僅僅交配2-3次并且通常每6-9個月更換，以便維持性能。