[實用新型]一種適合藥物分析學樣品前處理的96孔板

有效

• 申請號: 201621284680.5
• 申請日: 2016-11-28
• 公開（公告）號: CN206281697U
• 公開（公告）日: 2017-06-27
• 發明（設計）人: 楊勇
• 申請（專利權）人: 蘇州海科醫藥技術有限公司
• 主分類號: G01N1/34
• 分類號: G01N1/34;G01N1/28
• 代理公司: 蘇州唯亞智冠知識產權代理有限公司32289
• 代理人: 高玉蓉

技術領域

本實用新型涉及一種96孔板，尤其涉及一種適合藥物分析學樣品前處理的96孔板。

背景技術

96孔板是一塊塑料平板，上面有96個小孔，每一個小孔可以當作一個小的試驗管。與多通道移液器組合使用可大大提高試驗的平型性和工作效率。96孔板的應用范圍很廣泛，包括濃度分析、臨床檢測、酶聯免疫等等。

血漿藥物分析試驗的樣品量多、包括復雜的樣品前處理操作。為了提高樣品前處理的效率，96孔板被大量應用。

血漿是一種成分非常復雜的基質、含有大量的內源性蛋白、多肽、激素、各種營養成分和細胞代謝廢物。這些物質往往會干擾目標藥物的檢測分析。因此，血漿藥物分析實驗樣品前處理的目的是將樣品提純，最大程度去除內源性基質。越純凈的樣品越有利于后續的分析檢測。具體做法是在血漿中加入有機試劑將藥物從血漿中提取的有機試劑中，丟棄剩余的內源性基質。

96孔板目前主要適合兩種樣品前處理方法，即蛋白沉淀法和液-液提取法。

蛋白沉淀法是一種在血漿中加入蛋白變性試劑去除蛋白的方法。其目的是將血漿中蛋白去除掉，將與蛋白結合的藥物提取到有機試劑中，最終達到純化或濃縮樣品的目的。具體流程如下：

加樣：將一定體積的血漿加入到提取容器中。

加入蛋白沉淀劑：通常為有機化學試劑例如甲醇、乙醇、乙腈等，體積大于血漿體積的2倍。

渦流：渦流或振蕩提取容器使血漿與提取試劑充分混勻。血漿中的蛋白質在有機試劑的作用下變性凝聚為固體顆粒。

離心：蛋白充分變性后將提取容器離心，固體蛋白顆粒處于容器底部從而與提取液分離。

分離：使用移液器分離提取液進行后續的分析檢測。丟棄剩余的蛋白顆粒。

液-液提取法通過在血漿中加入不溶于水的有機試劑，將易溶于有機試劑的藥物從血漿中提取出來。其主要步驟如下：

加樣：將一定體積的血漿加入到提取容器中。

加入提取試劑：通常為有機化學試劑有乙酸乙酯、醚類、正己烷等。

渦流提取：渦流或振蕩提取容器使血漿與提取試劑充分接觸。

離心分層：提取容器經離心后，容器內的液體分為兩層，多數種類的提取試劑的密度比水小處于上層，水層處于下層。上層提取試劑中含有需要檢測的藥物。下層水溶液中含有血漿中的大部分內源性基質，這些內源性基質對分析檢測造成干擾。

分離：使用移液器分離處于上層的提取液進行后續的濃縮分析檢測。丟棄下層含基質的水溶液。

常規96孔板的版面尺寸約為128×86mm，集中了96個樣品提取孔，密度很大。大部分處于中間孔中的樣品狀態難以從側面觀察。常用的血漿藥物濃度分析的96孔板為聚丙烯，材料透光性很差，導致不但中間部分樣品無法從側面觀察其狀態，邊緣的孔徑也無法觀察。另外96孔的直徑比較細，分離提取液時從正上方也幾乎無法觀察到提取孔底部的樣品狀態。

這種視線上的阻礙大大降低了96孔板在樣品前處理過程中的應用。

當預處理方法為蛋白沉淀時，沉淀蛋白結束后分離提取液時，不易觀察到底部蛋白沉淀顆粒和提取液的分界線。使用移液器分離提取液時不易判斷吸液管插入液面的高度。如果移液管插入液面的高度約深。其底部的顆粒狀沉淀物在虹吸產生的水流作用下漂浮起來，進入移液管中。這些顆粒狀沉淀物可能堵塞移液管導致吸液體積出現誤差。顆粒物還可能在隨后的分析過程中堵塞分析儀器，使儀器不能正常使用或損壞。

當預處理方法為液-液提取時，無法觀察上層提取試劑與下層含基質的水溶液之間的分界線，使分離工作變得十分困難。如果吸取了下層含內源性基質的水溶液，很容易干擾樣品的檢測。

在分離提取液后，可以進行后續的濃縮處理，使提取液中的濃度變高，有利于檢測。也就是說，分離獲得提取液體積越大，濃縮后濃度越高。但96孔視線上有阻礙，為了避免分離提取液時吸到蛋白沉淀顆粒或下層含內源性基質的水層，試驗人員只能分離獲得一部分提取液，丟棄了很多提取液。為了獲得更多的提取液，試驗人員往往選擇透明的離心管作為提取容器替代96孔板。由于每個離心管只能提取一個樣品，需要大量的體力操作如編碼、單管加樣和單管移液。整個樣品前處理的通量大大降低。

實用新型內容

為解決上述技術問題，本實用新型的目的是提供一種適合沉淀蛋白的96孔板。

為實現上述目的，本實用新型采用如下技術方案：