[實用新型]β2微球蛋白半定量金標快速檢測試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201620689409.3
• 申請日: 2016-07-01
• 公開（公告）號: CN206132782U
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 杜惠芬;李克生;徐楊;連曉雯;柴丹丹
• 申請（專利權(quán)）人: 甘肅省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本實用新型屬于臨床醫(yī)學(xué)檢測領(lǐng)域，具體涉及膠體金免疫層析檢測技術(shù)。

背景技術(shù)

β2-微球蛋白 (beta2-microglobulin, β2-MG) 是人體細胞表面HLA (human leukocyte antigen，人類白細胞抗原) 的輕鏈部分，為一條由100個氨基酸殘基組成的單鍵多肽，相對分子質(zhì)量11.8kDa，由人體間質(zhì)、上皮及造血系統(tǒng)的正常細胞或惡性細胞合成，存在于除成熟的紅細胞和胎盤滋養(yǎng)層細胞外所有細胞表面。正常人β2-MG的合成率及從細胞膜上的釋放量相當恒定。

β2-MG是一種分子量相對較小的蛋白，在人體正常血液循環(huán)中，β2-MG可經(jīng)腎小球自由濾過，其中99.9%以上被近曲小管重吸收并分解，故正常人血清和尿液中β2-MG含量相對恒定。當腎小球濾過功能減退時，血清中的β2-MG濃度開始升高，且與腎小球濾過率(glomerular filtration rate, GFR)呈顯著負相關(guān)；當腎小管吸收功能減弱或腎小球濾過功能增加時，尿液中β2-MG含量升高，故檢測血清或尿液中的β2-MG濃度能反映早期腎功能損傷。由于糖尿病及高血壓等慢性病的腎損傷一般首先發(fā)生于腎小管位置，因此檢測血液或尿液中的β2-MG可監(jiān)測此類疾病早期腎損傷。

目前，血清或尿液中β2-MG的檢測方法主要是免疫比濁法，多由自動生化分析儀分析完成，未有應(yīng)用膠體金免疫層析法檢測β2-MG的報道。本實用新型首次利用膠體金免疫層析法檢測血清或尿液中的β2-MG，不僅檢測方法簡單，結(jié)果判讀快速，可進行半定量檢測，提高對早期腎功能損傷檢測的準確度，為臨床診斷提供依據(jù)。

免疫膠體金技術(shù)（immunocolloidal gold technique）是一種新型診斷技術(shù)，將其與免疫層析技術(shù)結(jié)合制作的檢測試劑盒具有操作簡單、無需冷鏈及特殊輔助儀器，結(jié)果判讀快速等優(yōu)點，其基本原理如下：以高電子密度的酒紅色膠體金顆粒標記抗原（或抗體），若樣品中存在待檢抗體（或待檢抗原），則標記后的抗原與樣品中待檢抗體形成抗原-抗體-膠體金復(fù)合物，由毛細作用在硝酸纖維素膜(nitrocellulose filter membrane)上泳動，并與包被在硝酸纖維素膜上的另一表位抗原（或抗體）結(jié)合，形成肉眼可見的紅色線條，從而判定待檢蛋白的存在；若樣品中無待檢蛋白或待檢蛋白含量未達到閾值，則不會在硝酸纖維素膜上形成可見紅線。本實用新型以此技術(shù)為基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容

本實用新型旨在提供一種半定量檢測血清或尿液中β2-MG含量的試劑盒，用于糖尿病及高血壓等慢性病早期腎損傷的輔助診斷。本實用新型可解決血清或尿液中β2-MG檢測需特殊儀器及耗時長等問題，提供一種檢測特異性強、操作簡單快速的試劑盒，可廣泛用于各級醫(yī)療機構(gòu)的臨床檢測。

本實用新型包含卡盒、比色卡和試紙條三部分。

所述卡盒包括盒蓋和盒底兩部分，材質(zhì)為ABS樹脂（丙烯腈-丁二烯-苯乙烯共聚物）；盒蓋與盒底由柱和柱槽以插接方式連接，盒蓋與盒底均為圓角長方形；卡盒正面可見檢視窗、加樣孔和比色窗，檢視窗為長橢圓形，加樣孔為橢圓形，比色窗為圓角長方形；在檢視窗位置可見反應(yīng)膜、檢測線T和質(zhì)控線C，在加樣孔位置可見試紙條樣品墊，在比色窗位置可見比色卡上的比色卡標注和色帶及對應(yīng)濃度說明；盒蓋正面印有結(jié)果判別說明、加樣孔標注、品名標注和信息記錄欄；盒底下沿右側(cè)開有長方形口用以放入比色卡。

所述比色卡以滑動方式置入卡盒內(nèi)部，沿盒底上的比色卡槽放置；比色卡上印有比色卡標注、色帶及對應(yīng)濃度說明。

所述試紙條置于卡盒內(nèi)部，安放在盒底上的試紙條槽中；試紙條由基板、雙面膠、樣品墊、膠體金墊、膠帶、反應(yīng)膜、吸樣墊組成。基板材質(zhì)為PVC塑料（聚氯乙烯），樣品墊及膠體金墊材質(zhì)為無紡布，反應(yīng)膜為硝酸纖維素膜，吸樣墊材質(zhì)為油濾紙。所述試紙條使用一對配對性良好的鼠源抗β2微球蛋白單克隆抗體作為檢測抗體，分別稱為抗體a和抗體b；抗體a用膠體金標記形成抗體a-膠體金復(fù)合物并固化于膠體金墊上，抗體b包被于反應(yīng)膜檢測線T位置；質(zhì)控線C位置包被有羊抗鼠多克隆抗體。