[實用新型]一種XRCC1基因多態性擴增檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201620047498.1
• 申請日: 2016-01-19
• 公開（公告）號: CN205313553U
• 公開（公告）日: 2016-06-15
• 發明（設計）人: 卿志榮;鄭幫
• 申請（專利權）人: 上海睿玻生物科技有限公司
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本實用新型屬于生物技術領域，涉及一種基因多態性擴增檢測試劑盒，具體 涉及一種XRCC1基因多態性擴增檢測試劑盒。

背景技術

近年來結直腸癌在我國的發病率迅速上升，居常見惡性腫瘤發病率的第5 位。流行病學證實腫瘤的發生與個體遺傳背景及環境的交互作用密切相關，90％ 結腸癌的發生是由于遺傳因素和環境因素交互作用的結果。DNA的損傷在腫瘤發 生過程中起到非常重要的作用，如不能成功修復會導致腫瘤的發生。XRCC1基因 為DNA修復基因，位于人19號染色體長臂區，編碼的蛋白質通過與多聚ADP核 糖聚合酶(PAPR)、APE1、多聚核苷酸激酶/磷酸酶、DNA連接酶Ⅲ及DNA多聚 酶β的相互作用參與DNA損傷的修復，而R399Q位于其功能結構序列內 (BerwickM,VineisP.MarkersofDNArepairandsusceptibilitytocancer inhumans:anepidemiologicreview.JNatlCancerInst2000；92:874-897)。 有研究顯示XRCC1R399Q基因多態性與結直腸癌具有遺傳易感性的關系。因此在 結直腸癌的診療中對XRCC1基因R399Q位點多態性檢測顯得尤為重要(MonacoR, RosalR,DolanMA,PincusMR,Brandt-RaufPW.Conformationaleffectsofa commoncodon399polymorphismontheBRCT1domainoftheXRCC1protein. ProteinJ2007；26:541-546)。

實用新型內容

本實用新型要解決的技術問題為目前市場上針對XRCC1基因多態性擴增檢 測特異性不強，成本高且操作復雜的問題，本實用新型能較好的應用于XRCC1 基因R399Q多態性檢測，體積小，便于運輸攜帶和使用。

為實現上述目的，本實用新型采用以下技術方案：

一種XRCC1基因多態性擴增檢測試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒包括盒 體(1)、海綿襯墊(2)，所述的海綿襯墊(2)置于盒體(1)內，海綿襯墊(2) 上設有的容器孔裝有多個裝有試劑的離心管，分別為裝有XRCC1基因多態性擴增 檢測PCR反應液的離心管(3)、裝有野生型陽性對照的離心管(4)、裝有突變型 陽性對照的離心管(5)、裝有雜合子陽性對照的離心管(6)、裝有陰性對照的離 心管(7)。

所述的容器孔較佳的為5個，容器孔在所述的襯墊上分兩排排列，上述的裝 有XRCC1基因多態性擴增檢測PCR反應液的離心管為2ml離心管，裝有野生型陽 性對照、突變型陽性對照、雜合子陽性對照、陰性對照的離心管均為0.5ml離心 管。

上述的XRCC1基因多態性擴增檢測PCR反應液包括DNA聚合酶、尿嘧啶-N- 糖基化酶(UNG酶)、特異性引物和探針及Mg2+，所述的探針為TaqManMGB探針 (美國AppliedBiosystems公司生產)。

優選地，所述的陽性對照包括野生型陽性對照、突變型陽性對照、雜合子陽 性對照，所述的野生型陽性對照為含野生型純合子XRCC1序列的質粒，突變型陽 性對照為含突變型純合子XRCC1序列的質粒，雜合子陽性對照為等比例混合的野 生型陽性對照和突變型陽性對照。

所述的XRCC1基因多態性檢測引物包括：

上游引物，其序列為：5'-GCATTGCCCAGCACAGGATAAG-3'；

下游引物，其序列為：5'-GTCCAGCACCCACTCCTTACG-3'。

所述的XRCC1基因多態性檢測探針包括：

野生型檢測探針，其序列為：5'-GCCTTACCTCCGGGAGGGCA-3'，其5'端標記 物為VIC，3'標記物為MGB；

突變型檢測探針，其序列為：5'-GCCTTACCTCTGGGAGGGCA-3'，其5'端標記 物為FAM，3'標記物為MGB；

所述的陽性對照為本領域常規的陽性對照，本實用新型優選的為含有XRCC1 基因DNA序列且包含多態性檢測上游和下游檢測引物及引物之間的基因組DNA 序列的質粒。

本實用新型的保存溫度為-20℃，盡量減少反復凍融。

本實用新型較佳的應用方法為：